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青鱼生长激素在毕赤酵母中的表达

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成果类型:
期刊论文
作者:
谢帝芝;刘臻;王赏初;张建设;肖调义;...
作者机构:
[谢帝芝; 刘臻; 王赏初; 张建设; 鲁双庆] 长沙学院生物工程与环境科学系
长沙学院生物技术与营养研究所
[肖调义] 湖南农业大学动物科技学院
语种:
中文
关键词:
青鱼(Mylopharyngodon picens);生长激素;毕赤酵母;表达
关键词(英文):
picens);growth hormone;pichia pastoris;expression
期刊:
淡水渔业
ISSN:
1000-6907
年:
2011
卷:
41
期:
6
页码:
19-24
基金类别:
国家自然科学基金项目(31001114) 湖南省科技厅计划项目(2010NK3042) 湖南省高校科技成果产业化培育项目(10CY017)
机构署名:
本校为其他机构
摘要:
根据GenBank数据库中登记的青鱼(Mylopharyngodon picens)生长激素(bcGH)基因序列(AF389238)设计特异性引物,采用RT-PCR技术扩增青鱼生长激素cDNA编码区,并通过定向插入含强启动子AOX I的表达载体pPIC3.5k、电击转入毕赤酵母GS115菌株、G418多克隆子筛选和测序验证等步骤进行了重组生长激素酵母菌诱导表达等相关实验,成功获得重组生长激素酵母菌(pPIC3.5k-bcGH重组酵母菌)。蛋白表达产物经SDS-PAGE和ELISA检测,在23 kD处发现一条与预期蛋白分子量大小一致的特异性条带,并且目的蛋白能与青鱼生长激素多克隆抗体特异性结合,说明bcGH在酵母胞内得到正确表达。表达条件优化过程中发现,诱导24 h已有重...
摘要(英文):
In order to amplify the cDNA of black carp growth hormone,the primers were designed according to the GenBank sequence of black carp growth hormone gene(AF389238).The black carp growth hormone(bcGH) cDNA was oriently inserted into pPIC3.5k which contains AOXI promoter and Pichia wild-type gene coding for histidinol dehydrogenase.The recombinant plasmid pPIC3.5k-bcGH was linearized by restriction endonucleases Sal I,then transformed into HIS4 mutant yeast GS115 by electroporation,the recombinant growth hormone yeasts were certified by the scr...

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