期刊论文

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中南林业科技大学学报

1673-923X

2008

28

5

22-27

10.3969/j.issn.1673-923X.2008.05.003

湖南省自然基金（编号04JJ3024） 湖南省教育厅省高等学校产业化培育项目（编号07CY001）.

本校为第一机构

为了获得红花檵木清晰的SRAP标记图谱,对红花檵木DNA的提取方法以及SRAP-PCR反应体系的影响因子进行了初步探讨,筛选和建立了扩增多态性高、重复性好、带型清晰的DNA模板和SRAP-PCR反应体系,同时提出了应用SRAP分子标记构建红花檵木遗传图谱的可行性.最佳SPAR-PCR反应体系为:在50μL的反应体系中,Mg2+1.6 mmol/μL,dNTPs 1.0 mmol/μL,DNA模板150 ng,DNA聚合酶3.6 U,上下引物各0.20 mmol/L.扩增程序为:94℃预变性4 min,反应前5个循环在94℃1 min、35℃1 min、72℃1 min条件下运行,随后的30个循环复性温度提高到55℃,最后72℃延伸5 min.

To obtain clear SequenceRelated Amplified Polymorphism （SRAP） fingerprints of Loropetalum chinense var. rubrum, this paper researched on the DNA extraction method and the factors influencing SRAP analysis, and then developed a reliable, effective and reproductive PCR reaction system for detecting SRAP. SRAP technology is a useful molecular marker system for mapping and gene tagging in Loropetalurn chinense var. rubrum, but its optimal SPAR-PCR reaction system is as follows, 50 /μL PCR reaction mixture consisting of 1. 6 mmol/L of MgC12, 1.0 ...