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苎麻纤维素合酶BnCesA1高变区蛋白的原核表达与条件优化

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成果类型:
期刊论文
作者:
谢庆宁;揭雨成;周清明;蒋杰;周精华;...
作者机构:
[谢庆宁; 常心海; 钟英丽] 湖南农业大学生物科学与技术学院
[揭雨成; 蒋杰; 周精华] 湖南农业大学苎麻研究所
[周清明] 湖南农业大学农学院
语种:
中文
关键词:
纤维素合酶;高变区;原核表达;正交优化
关键词(英文):
NHVR;prokaryotic expression;orthogonal optimization
期刊:
植物遗传资源学报
ISSN:
1672-1810
年:
2013
卷:
14
期:
6
页码:
1130-1136
基金类别:
湖南农业大学大学生科技创新基金项目(XCX1038) 省科技计划项目博士后专项基金(S2010R1040) 湖南省作物种质创新与资源利用国家重点试验室培育基地一般重点项目(09KFXM02) 湖南省科技厅重点项目(2010TP4004-1)
机构署名:
本校为第一机构
院系归属:
农学院
摘要:
高等植物纤维素合酶是含有多个功能结构域的糖苷转移酶, 催化合成β-1, 4葡萄糖苷链, 即高等植物细胞壁的重要成分之一纤维素。在同一物种例如在拟南芥中比对纤维素合酶家族各成员的序列信息, 发现其蛋白序列中存在2个高变异区域(HVR), 其中第一个HVR 靠近NH_2端(NHVR), 富含酸性氨基酸。本研究克隆了苎麻纤维素合酶基因(BnCesA1)的NHVR编码序列, 并以正确的阅读框亚克隆至含有6 × His接头的pQE-N1原核表达载体, 构建了pQE-N1-NHVR重组表达载体。在大肠杆菌BL21(DE3)中表达的重组蛋白His-tag-NHVR 经Western-blotting 验证后, 正交优化得到该蛋白小量表达的最优条件组合为:所挑取的2号菌落在37...
摘要(英文):
Cellulose synthases of advanced plants have multiple functional domains and belong to the family of glycosyltransferases. They act as the catalyst for the transfer of the [3-1,4-glucan, and construct the cellulose mole- cule which is one of the important cell wall components of advanced plants. Comparison among cellulose synthase family members within one species such as Arabidopsis demonstrats that there are two hypervariable regions (HVR) in its protein. The first HVR lies at the NHz-terminal (NHVR) and is rich of acidic amino acid residu...

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