为了建立成熟的猪脐静脉血管内皮细胞(SUVECs)分离培养和鉴定体系,采用1％的Ⅰ型胶原酶灌注法分离细胞,计数板计数,以10％1640培养基于37℃、5％CO2条件下培养;待融合80％左右胰蛋白酶消化1:2传代,利用倒置显微镜观察细胞生长状态及形态;采用血管性血友病因子(VWF)和血小板-内皮细胞粘附分子(PECAM-1/CD31)进行免疫荧光细胞鉴定;利用ICELLigence细胞功能分析仪测定细胞活力和生长曲线.研究从30头新生仔猪脐带(8～15cm)中分离到超过107个细胞,VWF和CD31双重检测阳性,分离得到的SUVECs超过90％,细胞生长状态良好,呈小三角形、椭圆形、梭形、多边形单层生长,界限清晰,融合后呈铺路石状,增殖能力强,...
