版权说明 操作指南
首页 > 成果 > 详情

赤眼鳟MDA5双链RNA结合位点区扩增的引物、方法及应用

认领
导出
反馈
分享
QQ微信 微博
成果类型:
专利
发明/设计人:
李耀国;肖调义;赵鑫
申请/专利权人:
湖南农业大学
专利类型:
发明专利
语种:
中文
申请时间:
2019-10-24
申请/专利号:
CN201911016697.0
公开时间:
2020-01-21
公开号:
CN110714086A
主申请人地址:
410128 湖南省长沙市芙蓉区湖南农业大学
申请地区:
湖南
机构署名:
本校为第一完成单位
主权项:
1.赤眼鳟MDA5双链RNA结合位点区扩增的引物,其特征在于,该引物的前向引物序列如SEQ ID No.1所示,后向引物序列如SEQ ID No.2所示。 2.赤眼鳟MDA5双链RNA结合位点区,其核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。 3.赤眼鳟MDA5双链RNA结合位点区扩增的方法,其特征在于,以赤眼鳟的DNA为扩增模板,以权利要求1所述的引物进行PCR扩增,得到SEQ ID No.3所示的赤眼鳟MDA5双链RNA结合位点区。 4.根据权利要求3所述的扩增方法,其特征在于,所述PCR扩增的反应条件为:94℃预变性5min;94℃30s,60℃30s,72℃60s,共30个循环;72℃延伸7min。 5.一种表达质粒,含有SEQ ID No.3所示的核苷酸片段。 6.权利要求5所述的表达质粒的构建方法,其特征在于,以权利要求3所述的方法进行扩增,挑选目的产物进行纯化和回收,测序验证后经Kpn Ⅰ和BamH Ⅰ酶切,然后与同样经KpnⅠ和BamH Ⅰ酶切的pEGFP-N1-Flag载体进行连接;连接体系为:0.5微升胶纯化回收片段、2.5微升线性化pEGFP-N1-Flag、1微升Exnase Ⅱ、2微升5×CE Ⅱ Buffer和4微升ddH2O;37℃连接30min;在转化涂板后挑菌测序,获取含有SEQ ID No.3所示的核苷酸片段的表达质粒。 7.权利要求2所述的赤眼鳟MDA5双链RNA结合位点区或权利要求5所述的表达质粒在提高鱼类抗GCRV上的应用。
摘要:
本发明公开了赤眼鳟MDA5双链RNA结合位点区扩增的引物、方法及应用。赤眼鳟MDA5双链RNA结合位点区扩增的引物,该引物的前向引物序列如SEQ ID No.1所示,后向引物序列如SEQ ID No.2所示。赤眼鳟MDA5双链RNA结合位点区,其核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。本发明获得具有增强鱼类细胞免疫功能的双链RNA结合特征序列,在鱼类分子免疫功能研究、疫苗制作和抗病分子育种方面具有良好应用前景。

反馈

验证码:
看不清楚,换一个
确定
取消

成果认领

标题:
用户 作者 通讯作者
请选择
请选择
确定
取消

提示

该栏目需要登录且有访问权限才可以访问

如果您有访问权限,请直接 登录访问

如果您没有访问权限,请联系管理员申请开通

管理员联系邮箱:yun@hnwdkj.com