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草鱼呼肠孤病毒VP7蛋白单克隆抗体的制备与应用

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成果类型:
期刊论文
作者:
季宁;魏伟;郭家鸿;王俊亚;李耀国;...
通讯作者:
Ji, N.;Zou, J.
作者机构:
[邹钧] 上海海洋大学水产与生命学院,上海201306
[邹钧] 湖南农业大学,湖南省特色水产资源利用工程技术研究中心,长沙410128
[魏伟; 王俊亚; 郭家鸿; 季宁] 上海海洋大学
[肖调义; 李耀国] 湖南农业大学
通讯机构:
[Ji, N.; Zou, J.] C
College of Fisheries and Life Science, China
语种:
中文
关键词:
原核表达;单克隆抗体;免疫荧光;草鱼
关键词(英文):
GCRV;VP7;Western Blot
期刊:
水生生物学报
ISSN:
1000-3207
年:
2022
卷:
46
期:
9
页码:
1293-1300
基金类别:
草鱼CD4 T辅助(Th)细胞免疫系统及其应答病毒感染的分子机理研究(32030112)资助;
机构署名:
本校为其他机构
院系归属:
动物科学技术学院
摘要:
草鱼病毒性出血病的暴发严重危害草鱼养殖业的健康发展,造成巨大经济损失。草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)是导致该病的主要病原,本研究将Ⅰ型草鱼呼肠孤病毒GCRV-873株的外衣壳蛋白VP7基因进行原核表达,获得高度纯化VP7重组蛋白,通过免疫BALB/c小鼠,首次制备筛选得到高效价单克隆抗体。结果显示,GCRV-I vp7基因可在原核表达系统中高效表达,主要以包涵体形式存在,大小约为40 kDa。免疫小鼠后筛选到了5株IgG类型阳性杂交瘤细胞株,其中3株亚型为IgG1,2株亚型为IgG2a。Western Blotting实验和直接免疫荧光实验显示,该抗体可特异识别GCRV-873,并且ELISA检测原核重组蛋白的...
摘要(英文):
Grass carp reovirus (GCRV) poses great threat to the grass carp aquaculture industry and causes huge eco-nomic losses. Grass carp reovirus is the pathogen of this disease, which consists of three types, type Ⅰ, Ⅱ and Ⅲ. GCRV-873 is the most well studied stain of type I GCRV, with its complete genome sequenced in the 1980s. It has a segmented double stranded RNA genome with 11 fragments, encoding 7 structural proteins. VP5 and VP7 proteins form virus capsid. In this study, the capsid protein VP7 (GenBank: AF403396) of GCRV-873 strain was expr...

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