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牛乳铁蛋白功能片段在大肠杆菌中的表达及抑菌活性验证

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成果类型:
期刊论文
作者:
戴珊;赵燕;刘芬;滕慧;张学文
作者机构:
湖南农业大学生物科学技术学院
语种:
中文
期刊:
湖南农业大学学报(自然科学版)
ISSN:
1007-1032
年:
2024
卷:
CSCD
机构署名:
本校为第一机构
院系归属:
生物科学技术学院
摘要:
以pET–30a和pEGX为出发载体,构建牛乳铁蛋白功能片段BlfFf基因工程表达的非融合性表达质粒pET–BlfFf和和融合性表达质粒pEGX–BlfFf,并在大肠杆菌BL21中诱导了蛋白表达。表达产物经SDS–PAGE分析,非融合型表达pET–BlfFf导表达的目标蛋白主要以包涵体形式存在,而融合型的pEGX–BlfFf表达的目标蛋白则可大量溶于细胞破碎上清液中,说明后者更适合表达可溶性目标蛋白。pEGX–BlfFf诱导表达产物经GST标签填料柱亲和层析纯化后,可制备出可溶性融合蛋白GST–BlfFf,其产量约为60 mg/L。该蛋白经凝血酶去除GST标签,获得纯化的目标肽BlfFf。对BlfFf的生物活性的试验表明,经过胃蛋白酶水解后的...

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