通过优化PCR反应条件,拟建立快速、特异、准确的检测柑桔溃疡病的方法.试验结果表明,25μL优化反应体系:10 ×PCR缓冲液2.5μL,10 mM/L dNTPs0.5 μL(终浓度为0.2 mM/L),2 U/μL Taq DNA聚合酶0.5μL(终浓度为0.04 U/μL),5 mM/L引物各0.5μL(终浓度为0.1 mM/L),DNA模板1μL(终浓度为6.0×106 cfu/mL/mL),灭菌ddH2O 19.5μL;PCR扩增退火温度为59 ℃;柑桔溃疡病菌病菌浓度检测下限为6.0×103 cfu/mL,可以获得柑桔溃疡病菌的特异性片段,能够满足生产中对柑桔溃疡病检测的要求.
