期刊论文

Establishment of the Culture System in Vitro and Functional Identification of Mouse Spermatogonial Stem Cells

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畜牧兽医学报

0366-6964

2021

52

02

408-419

10.11843/j.issn.0366-6964.2021.02.013

国家科技重大项目（2016zx08006002）； 国家自然科学基金（31772555）；

本校为第一机构

旨在通过探索ICR品系小鼠精原干细胞（spermatogonial stem cells, SSCs）的体外稳定培养,为别的品系小鼠和大动物的SSCs体外培养提供参考。本研究采集6～8日龄ICR乳鼠的睾丸,用两步酶消化法（胶原酶和胰蛋白酶）和差速贴壁法来纯化SSC细胞。用不同的饲养层（小鼠胎儿成纤维细胞（mouse embryonic fibroblasts, mEF）作为饲养层和层黏连蛋白与多聚赖氨酸联合铺板）,不同的培养基（StemPro-34培养基和DMEM培养基）,添加不同的生长因子（GDNF、LIF、EGF、bFGF、IGF1）来观察体外SSCs的生长。将传代至第6代的SSCs用免疫染色法和分子检测法来评估细胞增殖。最后将稳定增殖的SSCs移植到受体睾丸中进行...