期刊论文、会议论文

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中国兽医科学

1673-4696

2012

42

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35-38

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第一次全国鸭病防控高级研讨会

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第一次全国鸭病防控高级研讨会论文集

2011-08-01

山东泰安

中国畜牧兽医学会

10.16656/j.issn.1673-4696.2012.01.001

201003012:公益性行业(农业)科研专项 863;2011AAl0A200:国家高技术研究发展计划（863计划） 31101848:国家自然科学基金 2011JB01:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项

本校为其他机构

为研究鸭病毒性肝炎病毒RNA依赖性RNA聚合酶的分子生物学特性及其在细胞中的定位，构建了RNA依赖性RNA聚合酶与增强型绿色荧光蛋白融合表达的真核重组表达质粒；然后用脂质体介导转染MDCK细胞。分别使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜以及4，6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）染色和蛋白免疫电泳试验等方法检测了RNA依赖性RNA聚合酶在细胞中的表达和亚细胞定位情况。结果表明，RNA依赖性RNA聚合酶能与增强型绿色荧光蛋白一起在MDCK细胞中良好表达，且主要分布于细胞核中，Western—blot分析结果显示，融合蛋白在80ku处出现阳性条带，说明表达的外源蛋白具有免疫活性。表明成功构建了RNA依赖性RNA聚合酶...

To study the molecular biological characteristics and subcellular localization of RNAdependent RNA polymerase（RdRp） of duck hepatitis A virus（DHAV）,the recombinant plasmid pEGFPRdRp containing RdRp fused with the green fluorescent protein（GFP） was constructed. After transfected into MDCK cells,the expression of RdRp was detected with fluorescence microscope and Western-blotting, and the results showed that RdRp fused with GFP was expressed well in the MDCK cells. Besides, the localization of RdRp in MDCK cells was determined with laser co...