目的 对分散泛菌的胞内脱乙酰酶(Pantoea dispersa N-acetylglucosamine deacetylase,Pd-nagA)进行表达条件优化及酶学性质分析.方法 本研究使用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术对分散泛菌全基因组中Pd-nagA基因序列进行全长扩增,将含有Pd-nagA基因的质粒pET-28a(+)转化进入大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,同时采用单因素实验,优化诱导温度、诱导前菌体生物量、诱导时间以及乳糖类似物异丙基硫代半乳糖苷(isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)的浓度,采用 Ni2+-次氮基三乙酸(nitrilotriacetic acid,NTA)进行重组酶的纯化,再对其酶学特性进行测定.结果 以pET-28a(+)质...
