期刊论文

DEVELOPMENT OF TAQMAN PROBE REAL-TIME PCR METHOD FOR DETECTION OF AFRICAN SWINE FEVER VIRUS

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中国动物传染病学报

1674-6422

2020

28

03

42-48

“十三五”国家重点研发专项“烈性外来动物疫病防控技术研发”资助（2017YFD0502302）；

本校为第一机构

为建立一种快速、准确的非洲猪瘟病毒（ASFV）分子检测方法,以2018年8月分离的SY18毒株P72基因序列（GenBank登录号:MH713612.1）为参考毒株,人工合成质粒标准品,命名为pcDNA3-P72,基于该毒株P72基因序列,在1627～1876 bp处设计一对特异性引物和TaqMan探针,优化反应体系及条件,本研究成功建立了基于P72基因的 TaqMan探针qPCR方法,并与OIE的特异性引物和TaqMan探针进行灵敏度、稳定性和特异性比较。结果显示:本研究建立的qPCR检测方法,标准曲线线性关系良好,R2值可达到0.9932,灵敏性最低能检测到10 copies/μL,与OIE引物扩增灵敏度相当,比普通PCR方法高100倍。该方法重复性良好,批内和批间变异系...