赖解旋酶恒温基因扩增技术的原理、应用和展望
作者：
刘洵;程天印;常小斌;王小君
期刊：
长沙大学学报,2007年21(2):29-31 ISSN：1008-4681
作者机构：
湖南农业大学动物医学院,湖南,长沙,410128;[王小君; 常小斌; 刘洵; 程天印] 湖南农业大学
关键词：
赖解旋酶恒温基因扩增;DNA解旋酶;单链DNA结合蛋白
摘要：
赖解旋酶恒温基因扩增方法(HDA法)是新近发明的一种简便、快速、高效的体外恒温基因扩增技术.该法依靠DNA解旋酶解开双链DNA、单链DNA结合蛋白(SSB)维持单链状态、DNA聚合酶催化靶片段的扩增.研究表明,HDA能扩增微生物基因组DNA、病原菌DNA、质粒DNA和cDNA等,从灵敏性、准确性和可操作性几方面看,该方法具有广阔的实用前景.
语种：
中文
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应用解旋恒温基因扩增技术检测沙门氏杆菌
作者：
刘洵;程天印;王晓君
期刊：
湖南农业大学学报(自然科学版),2007年33(4):450-453 ISSN：1007-1032
作者机构：
[刘洵; 程天印; 王晓君] 湖南农业大学,动物医学院
关键词：
沙门氏杆菌;检测;解旋恒温基因扩增技术
摘要：
为寻求快速简便的检测沙门氏杆菌及其他病原生物新方法,以沙门氏杆菌invA基因为目的片段,设计特异性引物,通过条件优化,建立了检测沙门氏杆菌的HDA法,用4株沙门氏杆菌和6种其他病原菌(大肠埃希菌、志贺氏菌、变形杆菌、绿脓杆菌、葡萄球菌、链球菌)考核特异性,用稀释法测定灵敏度.结果表明,本研究建立的HDA法可在恒温水浴锅中进行,扩增时程75 min;阳性检测率为100%,无假阳性;用HAD法检测12份饲料样品,结果检出沙门氏杆菌呈阳性的3份,阳性率为25%.HDA法极适合基层实验室使用.
语种：
中文
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多媒体条件下动物生理学教法的思考和实践
作者：
程天印
期刊：
高教论坛,2007年(3):48-50 ISSN：1671-9719
作者机构：
湖南农业大学动物医学院,湖南,长沙,410128;[程天印] 湖南农业大学
关键词：
动物生理学;多媒体;传统教学法
摘要：
本文首先分析了传统教学方法和多媒体教学方法的优、劣势;然后总结了目前使用多媒体教学普遍存在的问题;最后介绍了自己利用多媒体辅助课堂教学的经验。
语种：
中文
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嗜水气单胞菌Lamp检测方法的建立及应用
作者：
程天印;刘洵;常小斌
期刊：
中国兽医科学,2007年37(12):1013-1016 ISSN：1673-4696
作者机构：
[程天印; 刘洵; 常小斌] 湖南农业大学动物医学院;湖南农业大学动物医学院 湖南长沙410128
关键词：
嗜水气单胞菌;气溶素基因;环媒恒温基因扩增检测法
摘要：
基于嗜水气单胞菌气溶素（aerolysin）基因的序列，设计了1套引物，通过条件优化，成功建立了针对致病性嗜水气单胞菌的环媒恒温基因扩增（Lamp）检测法。采用Lamp法对病原菌进行了扩增，并对病鱼血样进行了检测。结果表明，该法只检出致病性嗜水气单胞菌。对不同浓度的细菌悬液扩增结果表明，Lamp检测嗜水气单胞菌的最低菌液浓度为1．4～14／μL。[第一段]
语种：
中文
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湖南省日本血吸虫线粒体cox1基因部分序列多态性的研究
作者：
刘伟;戴荣四;林瑞庆;宋慧群;程天印;...
期刊：
热带医学杂志,2007年7(10):939-941+970 ISSN：1672-3619
作者机构：
湖南农业大学动物医学院,长沙,410128;华南农业大学兽医学院,广州,510642
关键词：
日本血吸虫;克隆;序列分析
摘要：
目的 研究湖南省日本血吸虫不同自然隔离群的线粒体细胞色素c氧化酶亚基1基因(cox1)部分序列(pcox1)的变异,为阐明我国日本血吸虫的种群遗传结构奠定基础.方法 采用聚合酶链反应(PCR)技术对湖南省岳阳君山、泪罗的日本血吸虫的pcox1片段进行扩增、克隆及序列分析.结果 获得480 bp的pcox1序列.经DNAstar软件分析,pcox1序列有一定的种内差异(0～1.2%).结论 本研究为阐明我国日本血吸虫的种群遗传结构提供了数据.
语种：
中文
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多抗性猪源大肠杆菌的分离鉴定及耐药性检测
作者：
春晓;程天印;陈宇明
期刊：
农村养殖技术：新兽医,2007年(04):42-44 ISSN：1007-0869
作者机构：
湖南农业大学动物医学院
关键词：
猪源大肠杆菌;分离鉴定;耐药性;多抗性;致病性大肠杆菌;检测;猪大肠杆菌病
摘要：
大肠杆菌是生活中和兽医临床上最常见的一种病原菌，亦是人及动物的主要共生菌，其抗原性复杂，血清型多样，临床症状和病理变化多样，且多与病毒性疾病和其他细菌性疾病并发，给畜牧业生产造成了严重的经济损失，严重危害畜禽及人类的健康。在兽医临床上猪大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的一类传染性疾病的总称，其中仔猪黄．白痢主要是由产毒素大肠杆菌（EnterotoxigenicE．coli，ETEC）引起的规模化猪场的常见多发病，其发病率、死亡率均居猪疫病之首，给养殖业造成极大的经济损失。
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中文
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亚洲璃眼蜱唾液腺差异表达基因文库的构建及分析
作者：
程天印;周金林
作者机构：
[程天印; 周金林] 湖南农业大学动物医学院
会议名称：
全国动物生理生化第九次学术交流会
会议时间：
2006-08
会议地点：
中国广东广州
会议论文集名称：
全国动物生理生化第九次学术交流会论文摘要汇编
摘要：
<正>单雌蜱繁殖群中挑选未吸血雌蜱60只,随机分成Ⅰ、Ⅱ两组。Ⅰ组直接剖取唾液腺。Ⅱ组于吸血后第5天采集,分离唾液腺。Trizol法提取总RNA,经第一链合成、LD-PCR、Ras Ⅰ酶切、接头连接和抑制消减杂交(SSH)等步骤,获得差异表达基因的cDNA片段。将纯化的cDNA片段与pGEM T-Easy 载体连接,转化DHSa,获得159个白色菌落。酶切检查表明,142个克隆含有插入片段,片段大
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亚洲璃眼蜱唾液腺-新基因(GP29)的原核表达及产物鉴定
作者：
程天印;周金林
作者机构：
[程天印; 周金林] 湖南农业大学动物医学院;[程天印; 周金林] 中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所
会议名称：
全国动物生理生化第九次学术交流会
会议时间：
2006-08
会议地点：
中国广东广州
会议论文集名称：
全国动物生理生化第九次学术交流会论文摘要汇编
摘要：
<正>将吸血诱导的亚洲璃眼蜱唾液腺差异表达基因GP29开放性阅读框插入pGEX-4T-1,转化BL21,表达出一相对质量为53000μ的蛋白,其大小与预计结果一致。蛋白质的肽质量图谱和“1381．7511”肽段序列两方面的结果证明,SDS-PAGE胶板上相对质量为53000μ的蛋白就是由目的基因表达的GST融合蛋白。该蛋白与Swiss PROT库中的任何蛋白均有较大差别,可能是一个新功能分子。
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中文
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湖南省日本血吸虫线粒体cox1基因的多态性研究
作者：
刘伟;朱兴全;戴荣四;林瑞庆;宋慧群;...
作者机构：
[刘伟; 朱兴全; 戴荣四; 林瑞庆; 宋慧群; 程天印; 刘毅] 湖南农业大学动物医学院;[刘伟; 朱兴全; 戴荣四; 林瑞庆; 宋慧群; 程天印; 刘毅] 华南农业大学兽医学院
会议名称：
中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第九次学术研讨会
会议时间：
2006-08
会议地点：
中国吉林长春
关键词：
日本血吸虫;克隆;序列分析
摘要：
日本血吸虫病是由分体科、分体属的日本血吸虫(Schistosoma japonocum)寄生于人和动物的肝门静脉和肠系膜静脉内引起的一种疾病。该病是一种危害严重的人兽共患寄生虫病。对日本血吸虫基因的深入研究,对控制和消灭血吸虫病具有十分重要的意义。本节从线粒体基因的角度,应用DNA序列分析技术对日本血吸虫mtDNA coxl基因的多态性进行了研究。coxl基因是核基因组以外的线粒体基因组基因,也是
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亚洲璃眼蜱唾液腺新基因GP15的表达和鉴定
作者：
程天印;周金林
作者机构：
[程天印; 周金林] 湖南农业大学动物医学院;[程天印; 周金林] 中国农科院上海家畜寄生虫病研究所
会议名称：
全国动物生理生化第九次学术交流会
会议时间：
2006-08
会议地点：
中国广东广州
摘要：
<正>将GP15的阅读框序列插入ET32a(+)制成重组质粒,通过BL21成功表达出一相对质量为36000的蛋白。该蛋白可被His／Bind从细菌裂解物纯化出来,也可为抗融合蛋白抗体所识别。表达形式分析显示, 融合蛋白以包涵体形式在大肠肝菌内表达。
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湖南省日本血吸虫核糖体DNA ITS多态性的研究
作者：
刘伟;刘毅;戴荣四;林瑞庆;宋慧群;...
作者机构：
[刘伟; 刘毅; 戴荣四; 林瑞庆; 宋慧群; 程天印; 朱兴全] 湖南农业大学动物医学院;[刘伟; 刘毅; 戴荣四; 林瑞庆; 宋慧群; 程天印; 朱兴全] 华南农业大学兽医学院
会议名称：
中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第九次学术研讨会
会议时间：
2006-08
会议地点：
中国吉林长春
关键词：
日本血吸虫;内转录间隔区;序列分析
摘要：
日本血吸虫(Schistosoma japonocum)是亚洲国家重要的寄生虫病之一。特别是在中国的一些地区及菲律宾群岛流行严重。主要寄生于人、畜门静脉、肠系膜静脉和(或)盆腔静脉内。造成急性或慢性肠炎、肝硬化,并导致腹泻、消瘦、贫血与营养障碍等疾患。ITS是核糖体DNA(rDNA)中介于18 S和28 S之间的内转录间隔区,包括ITS-1和ITS-2两段序列。ITS序列存在于高度重复的核糖体中,
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环介导等温基因扩增技术及其应用研究进展
作者：
常小斌;刘洵;程天印;王小君;陈宇明
期刊：
畜牧兽医科技信息,2006年(12):10-12 ISSN：1671-6027
作者机构：
湖南农业大学,动物医学院,长沙,410128
关键词：
环介导等温基因扩增;人类和动物疫病;检测
摘要：
本文简单综述了环介导等温基因扩增方法（LAMP法）的基本原理,操作方法及其研究进展。LAMP法是一种简便、快速、高效、特异性很强的基因扩增方法,尤其适合于人类和动物疫病的检测。
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中文
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亚洲璃眼蜱唾液腺一新基因(GP_(29))的原核表达及产物鉴定
作者：
程天印;周金林;周勇志;施启顺;林矫矫
期刊：
畜牧兽医学报,2006年37(11):1194-1197 ISSN：0366-6964
作者机构：
中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所,上海,200232;湖南农业大学动物医学院,长沙,410128
关键词：
亚洲璃眼蜱;GP29基因;GST-融合蛋白;肽质量;肽序列
摘要：
将吸血诱导的亚洲璃眼蜱唾液腺差异表达基因GP29的开放性阅读框插入pGEX-4T-1,转化BL21,表达出一相对质量为53 ku的蛋白,其大小与预计结果一致.蛋白质的肽质量图谱和 "1381.7511"肽段序列两方面的结果证明,SDS-PAGE胶板上相对质量为53 ku的蛋白就是由目的基因表达的GST融合蛋白.该蛋白与Swiss PROT库中的任何蛋白均有较大差别,可能是一个新功能分子.
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环媒恒温基因扩增法检测藤黄微球菌的研究
作者：
陈宇明;程天印;王晓君
期刊：
中国病原生物学杂志,2006年(06):407-409 ISSN：1673-5234
作者机构：
湖南农业大学动物医学院;湖南农业大学动物医学院 湖南长沙410128
关键词：
藤黄微球菌;检测;环媒恒温基因扩增
摘要：
目的建立藤黄微球菌的环媒恒温基因扩增检测方法。方法基于藤黄微球菌23S rRNA基因部分序列设计1套（共4条）能够识别6个区域的特异性引物;优化扩增条件;评估该方法的特异性与敏感性。结果用7个参考株和大肠埃希菌等8种其他临床病原菌检验本检测法,成功地建立了环媒恒温基因扩增（LAMP）检测法。结论环媒恒温基因扩增法检测藤黄微球菌快速、灵敏高、特异性强。
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高炉并罐式无钟炉顶的均匀布料法
作者：
杨亚;刘进辉;伏健;严芬;程天印
期刊：
钢铁,1993年28(4):5-10 ISSN：0449-749X
通讯作者：
Liu, Yuncai
作者机构：
[杨亚; 刘进辉; 伏健; 严芬; 程天印] 湖南农业大学动物医学院
通讯机构：
Shoudu Iron and Steel Co, China
关键词：
无钟炉顶;高炉;布料;炉料;溜槽;偏斜;转速;参数计算;轨迹
摘要：
蜱类系统分类学研究已经进入分子阶段,与传统的形态学、生物学鉴定相比,无疑更加客观准确,建立系统进化树更能全面反映其亲缘关系,极大地提高了鉴定效率与可信度。论文总结了近年来应用分子生物学技术鉴定硬蜱的主要方法,包括核酸序列分析、随机扩增DNA多态性分析、限制性片段长度多态性分析。随着分子生物学和现代统计学的广泛应用,蜱类的鉴定将更加依赖现代分类学方法。
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中文
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