作者： 李晓云;石德时;李自力;肖运才;胡思顺;...

期刊： 中国兽医学报,2009年29(9):1125-1128 ISSN：1005-4545

作者机构： [李晓云; 石德时; 李自力; 肖运才; 胡思顺; 刘梅; 袁宗辉; 毕丁仁] 华中农业大学动物医学院

关键词： 嗜血性霉形体(附红细胞体);犬;PPLO肉汤;体外培养;血影

摘要： 犬血样经Giemsa染色镜检及PCR检测.证实感染附红细胞体.选择添加新生牛血清(BS)、酵母浸出液、葡萄糖等成份的PPLO肉汤(PPLO-S-BS)为培养液,将染虫红细胞稀释后接种到细胞培养板,置37℃、5%CO_2的培养箱中培养.24～72 h后红细胞溶血变为带虫血影(ghost);在PPLO-S-BS中虫体生长较好,并能连续培养180 d;除首次接种外不添加任何红细胞.对PPLO-S-BS中培养的带虫血影进行了光镜及扫描电镜观察、PCR鉴定、感染阴性红细胞试验、抗生素敏感性试验,结果表明其特征与接种物相同.

语种： 中文

作者： 肖红波;卢向阳;孙志良;罗志峰;易金娥

期刊： 食品科学,2009年30(3):267-269 ISSN：1002-6630

作者机构： [肖红波; 孙志良; 易金娥] 湖南农业大学动物医学院;[卢向阳] 湖南农业大学生化与发酵工程实验室;[罗志峰] 湘南学院基础医学系

关键词： 裙带菜;膳食纤维;一氧化氮;内皮型一氧化氮合酶;大鼠

摘要： 40只大鼠分为4组(n=10):正常对照组、自发性高血压大鼠组、膳食纤维低剂量组(5%)、膳食纤维高剂量组(10%).经裙带菜膳食纤维处理8w后,检测离体血管的内皮依赖性舒张效应、尾动脉收缩压、血浆一氧化氮(NO)水平,并用Western印迹检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达水平,发现裙带菜可溶性膳食纤维显著降低尾动脉收缩压,显著改善内皮功能及血浆NO的水平并伴随着eNOS蛋白表达水平的上调.这些结果表明,裙带菜膳食纤维能降低自发性高血压大鼠的尾动脉收缩压,这可能与增加NO的产生来改善其内皮功能有关.

语种： 中文

作者： 李安平;王权;黄克和;朱志宏;王赞江;...

期刊： 中国兽医学报,2009年29(5):619-622 ISSN：1005-4545

作者机构： [李安平] 南京农业大学,动物医学院;[王权] 中国农业科学院,上海兽医研究所;[黄克和] 南京农业大学动物医学院;[朱志宏; 王赞江; 袁耀明] 上海光明荷斯坦牧业有限公司;[曾晓华] 湖南农业大学动物医学院

会议名称： 中国动物学会原生动物学分会第十五次学术讨论会

会议时间： 2009-7-13

会议地点： 兰州

会议主办单位： 中国动物学会

会议论文集名称： 中国动物学会原生动物学分会第十五次学术讨论会论文集

关键词： 实时荧光定量PCR;aqMan探针;氏隐孢子虫

摘要： 根据GenBank公布的安氏隐孢子虫SSU rRNA基因序列设计1对引物和TaqMan探针,建立了基于TaqMan探针检测安氏隐孢子虫的实时荧光定量PCR方法,并对奶牛粪便进行了检测.结果显示,设计的探针对检测安氏隐孢子虫具有很高的特异性;粒DNA和卵囊的检测阈值分别达到5个拷贝和10个卵囊,奶牛粪便阳性率为21.15%(11/52).建立的安氏隐孢子虫TaqMan荧光定量PCR检测方法简便、快速,特异性强,敏感度高,可用于安氏隐孢子虫的快速定量检测.

语种： 中文

作者： 唐春华;杨丹;左振华;黄小西;陈韬;...

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2009年35(6):673-678 ISSN：1007-1032

作者机构： [唐春华; 左振华; 陈韬] 湖南农业大学动物医学院;[杨丹; 黄小西] 中南林业大学生物技术开放性中心实验室;[张东裔] 长沙学院,生物技术研究所

关键词： C-反应蛋白;组织特异性表达;草鱼

摘要： 利用草鱼C-反应蛋白(CRP)的EST序列(CK233056)设计引物,采用快速扩增cDNA末端(SMART-RACE)的方法克隆CRP基因的5′末端,获得1个约520 bp的cDNA片段.将该片段与EST拼接,得到CRP基因全长cDNA,长度为889 bp,含有1个672 bp的开放阅读框,两侧分别有74 bp和143 bp的5′和3′非翻译区域(open reading frame, ORF),CRP基因编码224个氨基酸残基,N端含有15个氨基酸残基的信号肽.利用RT-PCR半定量法对健康及被嗜水产气单胞菌人工感染的草鱼的心脏、脑、前肠、肾脏、肝胰脏、肌肉、脾等组织CRP的mRNA表达水平进行检测,结果表明,CRP基因在7种组织中均有表达,表达水平差异不明显.在人工感染24 h后,各组织中CRP的mRNA水平平均升高5倍左右,与哺乳动物和一些鱼类在炎症反应中血清CRP水平升高一致,而人工感染48 h后,除心脏和肌肉组织中有显著降低外,其他组织没有明显变化,仍维持较高水平.

语种： 中文

作者： 李晶;余兴龙;李润成;罗维;向卫军;...

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2009年35(5):521-525 ISSN：1007-1032

作者机构： [李晶; 余兴龙; 李润成; 李薇; 向卫军; 罗维; 王亚; 葛猛] 湖南农业大学,动物医学院

关键词： 猪巨细胞病毒;gB基因;序列分析

摘要： 根据GenBank登录的猪巨细胞病毒(PCMV)gB基因序列设计检测引物和全长gB基因引物,对来自湖南浏阳和江西景德镇不同养殖场的猪鼻拭子样品(51份)进行PCR检测,60.78%(31/51)的鼻拭子样品扩增出了260 bp的特异性条带.再以阳性样品为模板扩增全长gB基因,并将其克隆到pMD18-T载体,核苷酸序列测定和结果分析表明,所获得PCMVgB基因序列全长2 580 bp,编码860个氨基酸,与国外PCMV分离株的核苷酸同源性为97.6% ～ 98.9%,氨基酸同源性为97.0%～98.6%,且 PCMV可分为2个群:一群为中国湖南株、英国株和德国株,命名为A群;另一群为日本株、瑞士株和西班牙株,命名为B群.抗原表位优势、亲水性、表面可及性预测分析表明,PCMVgB蛋白是理想的免疫学抗原候选蛋白.

语种： 中文

作者： 王水莲;薛立群;陈小军;杨利国

期刊： 华中农业大学学报,2009年28(1):61-64 ISSN：1000-2421

作者机构： [王水莲; 杨利国] 华中农业大学动物科技学院;[薛立群; 陈小军] 湖南农业大学动物医学院

关键词： 抑制素;基因免疫;肉牛;生殖激素

摘要： 选择40头南阳黄牛,用3.0 mg抑制素基因重组质粒(pCIS,免疫组,n=30)或同剂量的生理盐水(对照组,n=10)间隔21 d注射2次,分别在首次免疫当天、首次免疫后第10天和第21天、加强免疫后第10天和第45天收集血清,应用放射免疫法(RIA)测定处理后不同时期血清中激素水平.结果表明:在5个采血时间点内,加强免疫后第10天抗体阳性牛比率最高,为37.5%,与其他采血时间点有显著差异.免疫组促卵泡素(FSH)平均含量比对照组高,但差异不显著;17-β雌二醇(E_2)和孕酮(P_4)水平在加强免疫后2组有显著性差异.另外.抑制素抗体阳性牛的FSH、E_2和P_4比阴性牛高,但差异不显著.这些结果说明抑制素基因重组质粒可促进肉牛产生特异性抗体,且对FSH、E_2和P_4水平有影响.

语种： 中文

作者： 李文平;蒋昊;李小广;段柳春

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2009年35(5):554-557 ISSN：1007-1032

作者机构： [李文平; 蒋昊; 李小广; 段柳春] 湖南农业大学,动物医学院

关键词： 蚯蚓提取液;肉品;保鲜

摘要： 采用5、10、20倍稀释的蚯蚓提取液处理肉样,以灭菌蒸馏水处理为对照,在温度(4.0±0.5) ℃冷藏保存,根据贮藏期间肉样的感官指标、菌落总数、挥发性盐基氮、pH值及持水性的变化评价蚯蚓提取液对肉样的保鲜效果.结果表明,蚯蚓提取液对温度(4.0±0.5) ℃冷藏保存的鲜肉有较明显的保鲜效果,15倍和10倍稀释液处理的猪肉保鲜期至少分别达14 d和21 d,5倍稀释液处理的猪肉保鲜期至少达28 d.

语种： 中文

作者： 许宝红;肖调义;苏建明;江辉;葛熹凯

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2009年35(1):88-91,103 ISSN：1007-1032

作者机构： [江辉; 肖调义; 许宝红; 葛熹凯] 农业大学动物科学技术学院,湖南,长沙,410128;农业大学物医学院,湖南,长沙,410128;[苏建明] 农业大学物医学院

关键词： 蚌;遗传多样性;南洞庭湖

摘要： 采用RAPD技术,选用11条有效随机引物研究了南洞庭湖15种野生蚌(圆顶珠蚌、尖锄蚌、圆头楔蚌、鱼尾楔蚌、巨首楔蚌、射线裂脊蚌、球形无齿蚌、勇士尖嵴蚌、扭蚌、杜氏珠蚌、背瘤丽蚌、短褶矛蚌、三巨瘤丽蚌、环带丽蚌、蚶形无齿蚌)之间的遗传多样性,得到RAPD-DNA扩增条带1 775条,片段长度500～1 500 bp,平均每条引物扩增出43.5条带,这些条带构成了南洞庭湖15种野生蚌的遗传多样性图谱.分析表明,属间的遗传距离以裂脊蚌属和尖嵴蚌属间最近,为0.485 7,丽蚌属与其他属间的遗传距离最远,为0.729 2;种间的遗传距离以圆头楔蚌和巨首楔蚌间最小,为0.333 3,背瘤丽蚌与三巨瘤丽蚌及环带丽蚌的遗传距离最大,为0.678 2.从种属关系归属来看,丽蚌属和尖锄蚌属归属于小方蚌亚科;无齿蚌属归属于无齿蚌亚科;矛蚌属、扭蚌属、裂脊蚌属、尖嵴蚌属、楔蚌属和珠蚌属同归属于珠蚌亚科.

语种： 中文

作者： 卢帅;黎满香;刘珂;颜运秋;郑元敬;...

期刊： 中国兽医科学,2009年39(12):1099-1103 ISSN：1673-4696

作者机构： 湖南农业大学,动物医学院,湖南,长沙,410128;[黎满香; 林荣高; 颜运秋; 刘珂; 郑元敬; 卢帅] 湖南农业大学

关键词： 抗菌肽Dermadistinctin;串联体;抗菌活性

摘要： 根据GenBank中Dermadistinctin K(DDK)和Dermadistinctin L(DDL)的氨基酸序列,选择大肠杆菌偏嗜性密码子,采用SOE法合成了DDK和DDL基因.在DDK及DDL基因序列中引入肠激酶裂解位点,并将其依次克隆入pET-32a(+)质粒,构建了串联体融合表达载体P-DDK,并将其转入Rosetta(DE3)中进行融合表达;表达产物在终浓度为0.1 mmol/L IPTG诱导4 h后可达到最大表达量.对重组蛋白DDK进行镍离子亲和层析柱纯化以及肠激酶裂解之后,对酶切产物进行了抑菌活性分析.分析结果表明,抗菌肽DDK与DDL的混合物对金黄色葡萄球菌(Cowan Ⅰ)、大肠杆菌DH5α、致病性大肠杆菌O_1、猪霍乱沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌均具有一定的抑菌活性.

语种： 中文

作者： 陈普成;柳金雄;曾青华;姜永萍;田国彬;...

期刊： 中国预防兽医学报,2009年31(12):988-990 ISSN：1008-0589

作者机构： [陈普成; 柳金雄; 姜永萍; 田国彬; 陈化兰] 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所;[曾青华] 湖南农业大学动物医学院

关键词： UL41基因;UA2基因;进化分析;分类

摘要： 依据GenBank登录的鸭肠炎病毒(DEV)核苷酸序列设计引物,利用长片段PCR技术扩增了DEV基因组UL36与UL43基因之间的未知序列,扩增所得片段长度约为15 kb.经EcoRV单酶切,将其中的3.9 kb片段克隆到pUC18中.序列分析表明该3.9 kb EcoR V片段含有2个完整的转录方向相反的与单纯疱疹病毒(HSV)UL41和UL42基因同源的ORF,命名为DEV UL41和ULA2基因.通过氨基酸序列比对发现:DEV UL41基因含有5个高度保守位点,而UL42含有2个,进化树分析表明DEV与疱疹病毒科a疱疹病毒亚科的马立克病毒、火鸡疱疹病毒的进化关系非常相近,为DEV的分类提供了参考依据.

语种： 中文

作者： 黄泽彬;余兴龙;李润成;谢小雨;尹德明;...

期刊： 中国人兽共患病学报,2009年25(7):623-626 ISSN：1002-2694

作者机构： [黄泽彬; 余兴龙; 李润成; 谢小雨; 尹德明; 颜运秋; 白霞; 刘忠华; 丁建; 汪镇南; 黎满香] 湖南农业大学动物医学院

关键词： 猪肠道杯状病毒;猪札如病毒;腹泻;猪

摘要： 目的 了解国内猪札如病毒(猪肠道杯状病毒成员)的存在和流行情况.方法 从多个腹泻猪场共采集腹泻猪粪便189份,采用RT-PCR方法进行分子流行病学调查.结果 检出猪札如病毒阳性病料24份,阳性率为12.70%(24/189).测序后与国外已发表的毒株比较,表明了所测定流行毒株的序列与猪札如病毒代表株Cowden相近(同源性介于75.6%～88.3%之间),证实了其均为猪札如病毒.结论 首次发现我国猪群中存在猪札如病毒.

语种： 中文

作者： 王水莲;薛立群;陈小军;杨利国

期刊： 畜牧兽医学报,2009年40(6):830-835 ISSN：0366-6964

作者机构： [王水莲; 薛立群; 陈小军] 湖南农业大学动物医学院;[杨利国] 华中农业大学动物科技学院

关键词： 抑制素;基因免疫;卵泡发育;生殖激素;黄牛

摘要： 分别用O(C)、0.75(T_1)、1.50(T_2)、2.25(T_3)和3.0(T_4)mg·头~(-1)的抑制素pCIS基因疫苗免疫58头黄牛,以探讨抑制素pCIS基因免疫对卵泡发育和生殖激素的影响.结果表明,抑制素pCIS基因免疫组的大卵泡(d≥10 mm)数显著高于对照组(P<0.01),中卵泡(7 mm≤d<10 mm)数和小卵泡(4 mm≤d<7 mm)数与对照组均没有显著差异(P>0.05),T1组左右两侧成熟卵泡大小与对照组差异不显著(P>0.05),其它3组两侧成熟卵泡均显著大于对照组(P<0.05).抑制素pCIS基因免疫黄牛的促卵泡素(FSH)平均含量高于对照组,且在加强免疫阶段差异显著(P<0.05);加强免疫后雌二醇(E_2)和孕酮(P_4)含量均显著增加,且均与对照组差异显著(P<0.05).这些结果表明,抑制素pCIS基因免疫可促进FSH分泌,进而影响黄牛卵泡发育和成熟.

语种： 中文

作者： 马再玉;马君;罗林丰

期刊： 四川动物,2009年28(6):921-922 ISSN：1000-7083

作者机构： [马再玉] 长沙动物园;[马君] 湖南农业大学动物医学院;[罗林丰] 湘潭和平公园

关键词： 东北虎上颚;浸润性的高中分化鳞癌;报告

摘要： 东北虎上颚浸润性高中分化鳞癌的临床特点是:病初精神、饮食、粪便等无明显变化,随着肿瘤增大,鼻肿大,鼻孔出血,鼻孔通气不畅,不食,最后衰竭死亡.

语种： 中文

作者： 程天印;王晓君;潘细妹;陈志强

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2009年35(5):526-528 ISSN：1007-1032

作者机构： 湖南农业大学,动物医学院,湖南,长沙,410128;[王晓君; 潘细妹; 程天印; 陈志强] 湖南农业大学

关键词： 刚地弓形虫;Sag2基因;环媒恒温基因扩增检测法

摘要： 基于已公布的刚地弓形虫Sag2基因序列设计了1套特异引物,经过条件优化,成功建立了针对刚地弓形虫(简称弓形虫)的环媒恒温基因扩增检测法.根据扩增弓形虫和其他几种病原生物的效果对该方法进行评估.结果表明,该方法只检出致病性弓形虫,特异性良好;检测最低速殖子浓度为4个/μL.对长沙、株洲、湘潭三地生猪血样检测的结果是仔猪、成猪和种母猪弓形虫感染率分别为6.45%、7.69%和15.38%.

语种： 中文

作者： 左振华;唐建州;张钊;唐春华;陈韬;...

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2009年35(3): 299-303,313 ISSN：1007-1032

作者机构： 湖南农业大学,动物医学院,湖南,长沙,410128;长沙学院,生物技术研究所,湖南,长沙,410003;中南林业科技大学,生物技术开放性中心实验室,湖南,长沙,410004;[陈韬; 唐春华; 左振华] 湖南农业大学;[唐建州] 长沙学院

关键词： 草鱼;凋亡抑制蛋白;快速扩增cDNA末端;表达分析

摘要： 利用快速扩增cDNA末端(rapid amplification cDNA end, RACE)技术获得草鱼细胞凋亡抑制蛋白基因全长cDNA序列为2 093 bp,含有1个1 944 bp的开放阅读框,5′非编码区长25 bp,3′非编码区长124 bp,可编码647个氨基酸.生物信息学分析表明,在IAP的N端无氨基酸残基组成的信号肽;与斑马鱼的同源性最好,其次是斑猫鲿;在系统进化上,与斑马鱼、斑猫鲿共聚为1支.用半定量RT-PCR分析正常及细菌诱导下草鱼细胞凋亡抑制蛋白基因在不同组织中的表达分布,正常情况下,凋亡抑制蛋白基因在所取的7种组织中均有表达,其中脑、肠和肾表达最高,肝和心脏次之,鳃和肌肉最低,但差异不显著;用嗜水气单胞菌人工感染24 h后,所有组织中的IAP mRNA水平平均降低约26%,以肝脏和肌肉降低较为明显,在感染48 h后,所有组织中的IAP mRNA水平平均升高约4%,其中心脏、肝脏和鳃分别升高8%、16%、19%,这表明草鱼细胞凋亡抑制蛋白可能参与了机体对嗜水气单胞菌感染的免疫应答.

语种： 中文

作者： 李润成;余兴龙;白霞;向卫军;葛猛;...

期刊： 生物工程学报,2009年25(4):560-565 ISSN：1000-3061

通讯作者： Yu, X.

作者机构： [李润成; 余兴龙; 白霞; 向卫军; 葛猛; 黎满香] 湖南农业大学动物医学院

通讯机构： College of Animal Medicine, Hunan Agricultural University, China

关键词： 口蹄疫病毒;VP1基因;LTB基因;抗体效价

摘要： 以质粒pMDTLT为模板,用PCR的方法扩增出LTB基因,然后将其插入到pETVP1质粒中VP1基因的上游,构建了含有融合基因LTBVP1的表达质粒pETLTBVP1.转化宿主菌BL21(DE3)LysS后进行诱导表达,诱导菌经SDS-PAGE显示重组蛋白以包涵体的形式表达,分子量约为39 kD;Western blotting分析表明,重组蛋白能与FMDV阳性血清及兔抗霍乱毒素(CT)血清反应,说明融合蛋白保持了LTB和VP1各自的免疫学活性.小鼠免疫实验表明:该融合蛋白通过腹腔接种小鼠能诱导产生较强的免疫应答反应,免疫鼠产生的血清抗体水平高于试验中商品口蹄疫疫苗免疫组.

语种： 中文

作者： 白霞;李润成;余兴龙;丁建;黎满香

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2008年34(5):568-571 ISSN：1007-1032

作者机构： [白霞; 李润成; 余兴龙; 丁建; 黎满香] 湖南农业大学动物医学院

关键词： 猪瘟病毒;Erns基因;定点突变;RNase酶活性;原核表达

摘要： 利用重组PCR技术将猪瘟病毒兔化弱毒株(Hog cholera virus lapinized Chinese strain,HCLV)E~(rns)编码区30位His残基密码子CAT突变为Pro残基密码子CCC,将突变后的基因克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,构建成重组质粒pETmE~(rns),并将此重组子转入宿主菌BL21(DE3)plysS中,在IPTG的诱导下表达重组转化菌.结果:突变的mE~(rns)基因能在pET表达系统成功表达.用Western blotting检测表明,所表达的蛋白是猪瘟病毒特异性的,但克隆于pET-28a(+)中未突变的E~(rns)基因却不能表达,说明E~(rns)基因的RNA酶活性是影响该基因在Escherichia coli中表达的因素之一.

语种： 中文

作者： 黄泽彬;李润成;尹德明;颜运秋;刘忠华;...

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2008年34(6):680-685 ISSN：1007-1032

作者机构： [黄泽彬; 李润成; 尹德明; 颜运秋; 刘忠华; 丁建; 汪镇南; 余兴龙] 湖南农业大学动物医学院

关键词： 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒;缺失变异株;Nsp2基因;遗传变异

摘要： 从湖南省内多个出现疑似猪"高热病"症状的猪场采集病料70份,采用RT-PCR方法进行分子流行病学调查.结果检出PRRSV阳性病料54份,阳性率高达77.14%(54/70).对其中8份分别来自娄底、浏阳、永州、双峰、益阳、株洲、宁乡和溆浦的病料中的PRRSV基因组Nsp2高变区部分基因片段进行RT-PCR扩增、克隆和序列测定分析.与国内外美洲型PRRSV分离株比较,序列相似性为72.2%～100%,其中,与公布的高致病性PRRSV缺失变异毒株的同源性最高,序列相似性为98.2%～100%.序列分析表明,这些毒株均是天然存在缺失的变异毒株,其Nsp2均有2个部位出现了缺失,分别为编码1个氨基酸的3个核苷酸的缺失和编码29个氨基酸的连续87个核苷酸的缺失,与高致病性PRRSV缺失变异毒株序列的缺失情况完全一致,且与其具很高的同源性,从而确定了分离的毒株均为引起猪"高热病"的猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株,这是国内外少见的PRRSV缺失变异及毒力显著增强的现象.

语种： 中文

作者： 许宝红;肖调义;唐湘北;章怀云;苏建明;...

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2008年34(4):474-477 ISSN：1007-1032

作者机构： [许宝红; 肖调义; 唐湘北; 陈立祥] 湖南农业大学动物科学技术学院;[张学文] 湖南农业大学生物科学技术学院;[苏建明; 陈韬] 湖南农业大学动物医学院;湖南省畜牧水产局;[章怀云] 中南林业科技大学

关键词： Hu-IFN-a基因;转基因草鱼;雌核发育;生理转雄性草鱼

摘要： 为快速获得转Hu-IFN-a基因抗病草鱼纯系,从转Hu-IFN-a基因草鱼中,挑选9尾高表达水平的雌鱼作为亲本,经人工雌核发育,得到子一代水花89尾,与普通草鱼的雌核发育结果相比,两者孵化率差异不显著,但畸形率前者比后者高.从雌核发育子一代鱼苗中随机选取45尾鱼苗投喂含甲基睾丸素的饲料,进行生理转雄性试验,获得生理转雄性鱼苗21尾.

语种： 中文

作者： 唐宇龙;刘湘新;杨华;柳彬;胡忠义

期刊： 中国兽医学报,2008年28(9):1040-1042,1056 ISSN：1005-4545

作者机构： [唐宇龙; 杨华; 胡忠义] 上海市结核重点实验室;[刘湘新; 柳彬] 湖南农业大学动物医学院

关键词： 结核分枝杆菌

摘要： 用重组蛋白CFP10-ESAT-6免疫新西兰大白兔,通过ELISA方法检测抗体效价水平;高效价抗体用DEAE-32阴离子交换柱纯化后,一部分抗体为包被所用,另一部分抗体用辣根过氧化物酶标记后,作为检测用,建立双抗体夹心法,进行了初步鉴定,确定该方法的可行性。结果表明:抗CFP10-ESAT-6多克隆抗体的效价在1∶16000稀释后D_(450)值基本都达到1.0左右,在纯化、酶标记后,分别以1∶5000为包被工作浓度,1∶3000为酶标工作浓度时,能较高特异性检测结核杆菌培养上清分泌的CFP10-ESAT-6抗原。

语种： 中文