作者： 袁安文;彭南妮;王乃东;许道军;薛立群

期刊： 动物学报,2008年54(2):265-270 ISSN：1674-5507

作者机构： [袁安文; 彭南妮; 王乃东; 许道军; 薛立群] 湖南农业大学动物医学院;湖南农业大学动物医学院 湖南长沙410128;湖南长沙410128深圳市罗湖区人民医院生殖医学中心;广东深圳518000

关键词： 小鼠;移植;卵巢;卵泡

摘要： 将1日龄小鼠卵巢移植入成年雄鼠肾囊下,分别于移植后18 d、36 d回收移植卵巢进行形态学、组织学观察,以评价卵巢移植体在成年雄性受体小鼠体内生长及卵泡发育潜能.结果表明:移植体生长增大,有各级生长卵泡发育;18日龄移植体平均直径为1881.1 μm±204.7 μm,与1日龄卵巢相比差异极显著(P＜0.01),卵泡发育到有腔卵泡阶段;36 日龄移植体平均直径达2575.3 μm±466.4 μm,显著大于18日龄移植体(P＜0.01),有成熟卵泡出现,未观察到黄体;从移植体分离到GV期卵母细胞和卵丘卵母细胞复合体.研究表明1日龄小鼠卵巢移植体在雄性受体生理环境中具有正常生长发育和形成成熟卵泡的潜能.

语种： 中文

作者： 李润成;余兴龙;白霞;侯强红;罗维;...

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2008年34(3):333-337 ISSN：1007-1032

作者机构： [李润成; 余兴龙; 白霞; 侯强红; 罗维; 刘忠华; 向卫军] 湖南农业大学,动物医学院

关键词： 口蹄疫病毒;VP1基因;合成;表达;免疫原性

摘要： 通过对GenBank近10年内收录的O型口蹄疫(FMD)病毒 VP1基因序列的同源性比较分析,并根据中国、老挝、缅甸等国家FMDV流行毒株的基因序列,设计并合成了有群内抗原代表性的结构蛋白VP1全基因序列.将合成的序列克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建了VP1的表达质粒pETVP1.SDS-PAGE和Western-blot分析表明,该质粒的BL21(DE3)LysS转化菌在IPTG诱导下可特异性表达VP1蛋白,该重组蛋白以包涵体的形式存在,相对分子质量约30 000,能与口蹄疫病毒(FMDV)阳性血清发生特异性反应.动物接种试验表明,重组蛋白能诱导小白鼠产生特异性抗FMDV抗体.

语种： 中文

作者： 尹可;郭军庆;黄杰;黎满香;周继勇

期刊： 中国兽医科学,2008年38(9):762-766 ISSN：1673-4696

作者机构： [尹可; 黄杰; 黎满香] 湖南农业大学动物医学院;[郭军庆; 周继勇] 浙江大学动物预防医学研究所;浙江大学传染病诊治国家重点实验室人兽共患病研究室

关键词： 猪流感病毒;H5亚型;HA1蛋白

摘要： 利用化学合成技术合成H5亚型猪流感病毒（SIV）的HA1基因，克隆到原核表达载体pET-28a（＋），构建了重组表达质粒pET28a—HA1／H5，用重组质粒转化表达菌株E．coli BL2l（DE3），经IPTG诱导表达，以镍螯合层析纯化表达蛋白；通过优化反应条件，建立了基于HA1重组蛋白的H5亚型SIV抗体间接ELISA（iHA1-ELISA）检测方法。SDS—PAGE分析结果显示，在大肠杆菌中成功表达了分子质量为45ku的His—HA1融合蛋白，表达蛋白以包涵体形式存在；Western—blot分析结果显示，表达蛋白能被抗His单克隆抗体和抗H5亚型SIV阳性血清特异识别。优化iHAI—ELISA中HA1／H5重组蛋白的包被浓度为0．31μg／mL，待检血清的最佳稀释度为1：100。特异性测定结果显示，iHA1-ELISA方法不与H1、H3、H9亚型猪流感病毒抗体以及猪圆环病毒、猪生殖与呼吸综合征病毒阳性血清发生交叉反应；iHA1-ELISA方法与血凝抑制试验的符合率达93．5％。表明利用重组HA1蛋白建立的检测H5亚型SIV抗体的ELISA方法具有良好的特异性和敏感性。

语种： 中文

作者： 文利新;丁小波;罗维

期刊： 湖南农业科学,2008年(4):153-154 ISSN：1006-060X

作者机构： 湖南农业大学动物医学院,湖南,长沙,410128;长沙绿叶生物科技有限公司,湖南,长沙,410125

关键词： 高致病性蓝耳病;季节特点;夏季防控

摘要： 在总结猪高致病性蓝耳病的临床症状、病理变化以及季节性发病特点的基础上,提出"猪高热病"的防治须坚持"扶正祛邪"的原则:增强生猪的特异性抗病力;加强母猪、断奶仔猪及保育仔猪、育肥猪的保健;并提高生猪场的管理水平.在治疗"猪高热病"时还需预防继发感染并对症治疗;减少应激和正确使用磺胺类药.

语种： 中文

作者： 彭小列;易能;程天印

期刊： 中国野生植物资源,2008年27(3): 1-2,11 ISSN：1006-9690

作者机构： [彭小列; 易能] 吉首大学生物资源与环境科学学院;[程天印] 湖南农业大学动物医学院

关键词： 乌桕;化学成分;药理作用;研究进展

摘要： 乌桕为大戟科乌桕属植物,简要介绍了近年来乌桕主要化学成分和药理作用的研究进展,并对当前研究中存在的问题进行了探讨.

语种： 中文

作者： 刘伟;刘毅;林瑞庆;戴荣四;程天印;...

期刊： 中国寄生虫学与寄生虫病杂志,2008年26(2):152-153 ISSN：1000-7423

作者机构： [刘伟; 刘毅; 戴荣四; 程天印] 湖南农业大学动物医学院;[林瑞庆; 朱兴全] 华南农业大学兽医学院;华南农业大学兽医学院 长沙410128 华南农业大学兽医学院;广州510642

关键词： 日本血吸虫;线粒体NADH脱氢酶4;序列分析

摘要： 采用PCR技术及DNA序列分析技术对采自湖南省4个不同地区的日本血吸虫的线粒体NADH脱氢酶基因亚基Ⅳ（nad4）部分片段（pnad4）进行克隆及序列分析．获得480bp的pnad4序列。与GenBank上的日本血吸虫相应基因序列进行比对．发现pnad4序列有一定的种内差异（0.4％～1.3％）。

语种： 中文

作者： 汪镇南;苏丁丁;刘为;王亚;肖利军;...

期刊： 激光生物学报,2008年17(3):367-370 ISSN：1007-7146

作者机构： [汪镇南; 王亚; 肖利军; 李润成; 白霞; 余兴龙] 湖南农业大学动物医学院;[苏丁丁] 湖南农业大学动物科学技术学院;[刘为] 湖南师范大学生命科学院

关键词： 鸡;鹌鹑;基因克隆;序列分析

摘要： 根据GenBank已登录的鸡和鹌鹑IFN-α基因序列,用Oligo6.0设计一对能同时扩增鸡和鹌鹑INF-α基因的共用引物,利用RT-PCR方法从经ConA诱导培养的三黄鸡、鹌鹑外周血淋巴细胞中分别扩增到IFN-α ORF全长cDNA,并克隆到pET-28a（＋）载体上。将测序结果分别与GenBank中已收录的家禽类IFN-α核苷酸序列进行同源性比较及遗传进化分析。结果发现鸡、鹌鹑IFN-α cDNA遗传进化稳定,与GenBank中收录的鸡、鹌鹑IFN-α核苷酸序列同源性为98.6%-99.8%、99.8%。鸡与其它家禽类的IFN-α核苷酸序列比较分析发现,与鹌鹑亲缘性较高,同源性达86.9%-87.1%,但与家水禽（鸭、鹅）差距较大,同源性最高也只有67.6%;鹌鹑IFN-α核苷酸序列与家水禽同源性在也只在62.7%-62.9%之间;基因遗传进化树分析可见家禽类IFN-α被分成两个大分枝,分别是由鸡和鹌鹑两个小分支组成的一个大分支与家水禽独立分支组成。

语种： 中文

作者： 江超;陈小军;张建超;刘伟;王慧;...

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2008年34(5):572-575 ISSN：1007-1032

作者机构： [江超; 陈小军; 张建超; 刘伟; 王慧; 孙志良] 湖南农业大学动物医学院

关键词： 地锦草;总黄酮;槲皮素;紫外分光光度法;高效液相色谱法

摘要： 采用紫外分光光度法(UV)测定地锦草不同部位中总黄酮的含量;采用高效液相色谱法(HPLC)测定地锦草不同部位中槲皮素的含量.结果表明,总黄酮在2.0～16.0μg(R=0.999)时线性关系良好,平均回收率为102.2%;HPLC法测槲皮素在0.584～29.190μg(R=0.999)时线性关系良好,平均回收率为99.6%.地锦草不同部位中总黄酮和槲皮素含量由高到低依次为叶、全草、种子、茎、根,其中叶的总黄酮和槲皮素含量分别为43.25mg/g和17.86mg/g.

语种： 中文

作者： 李晓云;贾杏林;石德时;肖运才;胡思顺;...

期刊： 畜牧兽医学报,2008年39(8):1142-1146 ISSN：0366-6964

作者机构： [李晓云; 石德时; 肖运才; 胡思顺; 刘梅; 袁宗辉; 毕丁仁] 华中农业大学动物医学院;农业微生物学国家重点实验室;[贾杏林] 湖南农业大学动物医学院

关键词： 猪附红细胞体;PPLO肉汤;体外培养;血影

摘要： 临床疑似猪附红细胞体病猪红细胞,经Giernsa染色镜检及PCR扩增,证实感染猪附红细胞体(M.suis).PCR扩增片段(781 bp)与M.suis已知序列(AJ504999)同源性达99.4%.经预试验对红细胞接种量、血清添加量、pH等条件优化后,选用添加新生牛血清、酵母浸出液、葡萄糖等成分的PPLO肉汤,将染虫红细胞接种到细胞培养板上,置于37℃、含5%CO_2的培养箱培养,定期更换培养液,约72 h后红细胞溶血变为带虫血影(Ghost).除首次接种外不添加任何红细胞,连续培养达280 d以上,染虫率维持近100%.对培养的带虫血影进行了光镜及扫描电镜观察、PCR鉴定、感染阴性红细胞试验、抗生素敏感性试验,证实与接种物为同一病原,并保持有感染阴性红细胞的能力.

语种： 中文

作者： 胡仕凤;高必达;陈捷

期刊： 中国生物防治学报,2008年24(4):369-375 ISSN：2095-039X

作者机构： [胡仕凤; 高必达] 湖南农业大学生物安全技术学院;湖南农业大学动物医学院;[陈捷] 上海交通大学农业与生物学院

关键词： 木零;几丁质酶;分子生物学;综述

摘要： 现已报道8种木霉的39个几丁质酶基因,其中22个为42kD内切酶基因.这些42kD内切酶基因的核苷酸序列及其编码的前体蛋白的氨基酸序列极为相似.42kD几丁质酶基因开放阅读框一般有3个内含子,前体蛋白一般有约22AA的信号序列,引导输出.成熟蛋白具有催化域、磷酸化域和耱基化域.基因的表达是诱导型的,受几丁质及真菌几丁质细胞壁的强诱导,受代谢物阻遏.转入植物的木霉几丁质酶基因可正确表达.本文就木霉生防菌株几丁质酶及其基因克隆、几丁质酶基因结构和功能、几丁质酶基因的表达和调控,以及木霉几亍质酶的生防应用前景等几方面进行了综述.

语种： 中文

作者： 文利新;袁慧

期刊： 中国兽医学报,2008年28(7):867-870 ISSN：1005-4545

作者机构： [文利新; 袁慧] 湖南农业大学动物医学院;湖南农业大学动物医学院 湖南长沙410128

关键词： 生产繁殖应激;被动应激;宫内应激;发病机理;应激

摘要： 1 动物生殖应激及其综合征的主要概念1.1 "生殖应激"理论主要学术观点文利新等在从事"规模化养猪主要应激疾病关键防治技术研究及产品研制"课题研究时,提出了"生产繁殖应激"假说,经过发展和完善,形成了以下主要学术观点:(1)人类和动物的生产繁殖过程如发情、妊娠、分娩和过度哺乳等特殊生理活动本身就是应激原(对于人类而言,广义的生殖应激的应激原还应包括与生殖有关的社会心理因素和负性生活事件),能引起应激,这种应激称为"生产繁殖应激"(简称"生殖应激或生产应激");(2)胎儿也是母体的一个特殊应激原,胎儿及其胎盘组织分泌的CRH和胎儿皮质醇进入母体血液引起的应激称为母体被动应激;(3)胎儿在母体子宫内不断地生长发育成熟,同样会受到母体、母体子宫张力、宫内环境等应激原作用而引起应激,称为胎儿宫内应激;(4)应激机制是人类和动物在正常完成生产繁殖任务过程时必需的,如分娩需要CRH、ACTH和肾上腺素等参与,胎儿宫内应激可能是正常分娩的原始动因;(5)在营养供给不足或生殖任务加重时,如母体过度哺乳从而导致机体负氮平衡会加重生殖应激.生殖应激对母体来说是一个持续长期的过程,而长期持续的过程必然导致机体内一系列神经内分泌改变,如CRH和糖皮质激素的持续升高,从而引起母体营养代谢改变、免疫加减弱、抗病力下降、生殖功能障碍以及并发多种族病,从而导致母体损害,在临床上表面为生殖应激综合征.生殖应激及其综合征对人类和所有的动物都存在,因此具有普遍意义和重要的学术价值.

语种： 中文

作者： 黄复深;袁鑫;邱元

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2008年34(2):215-220 ISSN：1007-1032

作者机构： [黄复深] 湖南农业大学,动物医学院;[袁鑫; 邱元] 湖南农业大学细胞工程重点实验室

关键词： 植物转基因;疫苗;进展

摘要： 植物基因工程疫苗是现代疫苗学研究中的一个热点,它具有价廉、安全、有效、易于运输与保存等优点.综述了国内外植物基因工程疫苗在临床应用、表位疫苗学研究和表达体系方面的研究进展.

语种： 中文

作者： 陈立祥;邹增丁;苏建明;章怀云;肖调义

期刊： 浙江大学学报(农业与生命科学版),2008年34(1):45-49 ISSN：1008-9209

作者机构： [陈立祥; 邹增丁; 肖调义] 湖南农业大学动物科技学院;[苏建明] 湖南农业大学动物医学院;[章怀云] 中南林业科技大学

关键词： 草鱼;脂肪酸结合蛋白;基因表达;克隆

摘要： 摘要：根据GenBank上已发表的其他物种的脂肪酸结合蛋白（fatty acid-binding protein, FABP）基因序列设计1对引物，从草鱼（ Ctenopharyngodon idellus ）cDNA文库中扩增出脂肪酸结合蛋白基因，定向克隆于表达质粒载体pET32A中构建成pET32A-FABP重组体，将重组体转化至大肠杆菌BL21（DE3）中，以终浓度1mmol·L^-1的IPTG对其进行诱导表达，表达产物经SDS-PAGE电泳分析表明，与阴性对照相比，阳性克隆在分子量33kDa处有1条明显的蛋白带，大小与预期结果一致，经光密度分析可知，目的蛋白约占总可溶性蛋白的49.5％，这为进一步研究脂肪酸结合蛋白生物学特性以及FABP基因对脂肪代谢调控规律奠定了基础。

语种： 中文

作者： 董伟;唐琴;卓如意;孙志良;刘静

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2008年34(1):61-63 ISSN：1007-1032

作者机构： [董伟; 唐琴; 卓如意; 孙志良] 湖南农业大学,动物医学院;[刘静] 常德鼎城区畜牧水产局

关键词： 大肠杆菌病;免疫荧光技术;诊断

摘要： 为建立一种快速、准确的仔猪大肠杆菌病诊断方法,从某猪场腹泻病死的小猪采取病料,经处理后取处理病料腹腔注射12只小白鼠,同时以灭菌生理盐水作对照.24 h内,注入病料的小白鼠全部死亡.采取死亡小白鼠的肝脏,充分研磨后加灭菌生理盐水作1∶5稀释,向稀释液中加入适量大肠杆菌兔血清抗体,混匀后分别于5,10,30 min时取病料涂片,用荧光标记的抗兔IgG抗体染色,荧光显微镜观察.结果显示:从死亡小白鼠病料涂片中能检测出大肠杆菌,其形态与标准大肠杆菌革兰氏染色形态一致.接种生理盐水小鼠未出现死亡,处死后取病料,以同样的方法进行检测,未检测出大肠杆菌.

语种： 中文

作者： 苏建明;肖调义;张学文;陈韬;章怀云

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2008年34(6):673-679 ISSN：1007-1032

作者机构： 湖南农业大学动物医学院,湖南,长沙,410128;[章怀云] 湖南农业大学动物科学技术学院,湖南,长沙,410128;湖南农业大学生物科学技术学院,湖南,长沙,410128;[章怀云] 中南林业科技大学,生物科学与技术学院,湖南,长沙410004;[陈韬; 张学文; 肖调义; 苏建明] 湖南农业大学

关键词： 草鱼;组织相容性复合体;克隆;组织特异性表达

摘要： 采用快速扩增cDNA末端方法,获得1007bp草鱼MHCⅡα基因全长cDNA片段,序列包括717bp的开放阅读框、34bp的5′端非编码区以及256bp的3′端非编码区.氨基酸序列比对和同源性比较分析结果表明,草鱼MHCⅡα与鲤鱼MHCⅡα相似性最高,为79%,与斑马鱼的相似性为75%,与人的相似性最低,为34%.RT-PCR组织表达分析,MHCⅡα基因在正常草鱼组织中除了肌肉中没有扩增出MHCⅡα基因转录本外,在所检测的其他组织中都有不同程度的表达,其中脾脏、头肾有较强的表达,血液有中等程度的表达,肝脏、眼与肌肉相对表达较弱.

语种： 中文

作者： 胡仕凤;唐俊;高永东;翟志伟;刘力行;...

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2008年34(2):207-211 ISSN：1007-1032

作者机构： [胡仕凤] 湖南农业大学,生物安全科学技术学院,湖南,长沙,410128;[胡仕凤] 湖南农业大学,动物医学院,湖南,长沙,410128;[胡仕凤] 上海交通大学,农业与生物学院,上海,200240;山东农业大学,植物保护学院,山东,泰安,271018;教育部微生物代谢重点实验室,上海,200240

关键词： 康氏木霉;固体发酵;纤维素酶;正交试验

摘要： 为探索康氏木霉REMI突变株适宜的产酶条件,通过正交试验对其固态发酵培养基、接种量、料水比、培养时间和培养温度等进行了研究.试验确定最佳培养基组分为稻草粉:麦麸为9:1(质量比),料水比1:1(质量比),硫酸铵1%,Tween-20 0.1%,通过单因素优化试验,确定最佳培养条件为:接种量5%(7.5%,培养温度30 ℃,培养时间96 h,pH自然;该突变株的FPA酶活和CMC酶活分别达6.097,8.123 IU/g.

语种： 中文

作者： 张佑祥;刘志霄;胡开良;钟辉;华攀玉;...

期刊： 动物学杂志,2008年43(2):141-144 ISSN：0250-3263

作者机构： [张佑祥; 刘志霄] 吉首大学生物资源与环境科学学院,生态研究所;[胡开良; 华攀玉; 钟辉] 华东师范大学生命科学学院;[张树义] 湖南农业大学动物医学院;[张礼标] 广东省昆虫研究所

关键词： 大菊头蝠;新纪录;湖南省

摘要： 2007年1月11日,在湘西土家族苗族自治州吉首市寨阳乡堂乐洞采到菊头蝠雌性标本1只,经鉴定为湖南省翼手目新纪录,属大菊头蝠华南亚种(Rhinolophus luctus lanosus).

语种： 中文

作者： 雷红宇;袁慧;邬静;袁莉芸;文利新;...

期刊： 生物工程学报,2008年24(5):898-902 ISSN：1000-3061

通讯作者： Lei, H.

作者机构： [雷红宇; 袁慧; 邬静; 袁莉芸; 文利新; 倪妲佳] 湖南农业大学动物医学院;湖南农业大学动物医学院 长沙410128

通讯机构： College of Veterinary Medicine, Hunan Agricultural University, China

关键词： 青霉酸;人工抗原;合成

摘要： 为建立圆弧青霉毒素-青霉酸的免疫学检测方法,研究了青霉酸（PA）的人工抗原合成。通过碳二亚胺法将青霉酸（PA）分别与牛血清白蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）联结,得到青霉酸人工抗原PA-BSA和PA-OVA。采用紫外扫描光谱法、SDS-PAGE和动物免疫试验对合成的抗原进行鉴定。结果显示联结后的人工抗原特征性吸收峰出现偏移,PA与BSA的偶联比为23.2：1,PA与OVA的偶联比为10.4：1。以PA-BSA为免疫抗原免疫小鼠,PA-OVA为包被抗原,采用间接ELISA检测抗血清,其效价达到1：12800。表明青霉酸的人工抗原已合成,为建立有效的免疫检测方法提供了基础。

语种： 中文

作者： 于慧珠;陈兆国;岳城;米荣升;夏延富

期刊： 中国兽医科学,2008年38(8):670-675 ISSN：1673-4696

作者机构： [于慧珠; 岳城] 新疆农业大学动物医学学院;[陈兆国; 米荣升] 中国农业科学院上海兽医研究所上海动物生物技术研究中心;[夏延富] 湖南农业大学动物医学院

关键词： 微小隐孢子虫;CP15／60基因;克隆;原核表达;抗原性

摘要： 提取微小隐孢子虫鼠基因型卵囊总RNA，用RT—PCR扩增微小隐孢子虫子孢子表面抗原CP15／60基因并克隆到pMD18-T载体中。将鉴定正确的序列亚克隆于原核表达载体pET-28b（＋），转化大肠杆菌BL21（DE3）进行诱导表达，表达产物进行SDS-PAGE和Western—blot分析，同时将重组蛋白免疫动物后检测血清抗体。结果显示，克隆的目的基因核苷酸序列与GenBank登录的序列的同源性为98．66％。目的基因在大肠杆菌中以可溶形式高效表达。表达的重组蛋白占茵体可溶性总蛋白的57．5％，纯化的重组蛋白纯度达95．2％。重组蛋白可被兔抗微小隐孢子虫血清特异性识别，用重组蛋白免疫3次后，兔血清特异性抗体达到较高水平。表明，该重组蛋白具有较好的反应原性和免疫原性。

语种： 中文

作者： 刘洵;程天印;王晓君

期刊： 中国病原生物学杂志,2008年3(4):255-257 ISSN：1673-5234

作者机构： 湖南农业大学动物医学院,湖南长沙,410128;[王晓君; 刘洵; 程天印] 湖南农业大学

关键词： 环媒恒温基因扩增;内引物;基因突变

摘要： 目的研究内引物在环媒恒温基因扩增（LAMP）中的作用,确定利用LAMP的同一套特异性引物区别具有单核苷酸差异的不同株型或同一株型的病原菌基因的可行性。方法采用PCR介导定点突变法对沙门氏菌invA基因定点突变,使其T669→A669、T725→A725,用原LAMP特异性引物扩增含单核苷酸差异序列,观察扩增结果。结果制备的点突变模板C大小与预期值（1 371 bp）一致。LAMP扩增的伤寒沙门氏菌CMCC50098标准株DNA产物的电泳条带呈梯状,而扩增模板C未扩出反应产物。结论LAMP不能利用同一套引物扩增具有单核苷酸差异的不同株型或同一株型的病原菌,即可利用同一套引物区分这些病原菌。

语种： 中文