作者： 向静;刘毅;江为民;曹满湖;李娜

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2007年33(1):49-52 ISSN：1007-1032

作者机构： [向静] 长沙学院生物工程与环境科学系;[刘毅; 曹满湖; 李娜] 湖南农业大学动物医学院;[江为民] 湖南省畜牧水产局技术推广站

关键词： 黄牛;日本血吸虫病;粪检;血清学诊断

摘要： 为找寻特异性强、敏感性高，且操作简便、费用低廉，并能大规模应用于临床的日本血吸虫病血清学诊断方法，以疫区黄牛为研究对象，应用环卵沉淀试验（COPT）、血清法间接血凝试验（sIHA）和血纸法间接血凝试验（bpIHA）、胶乳凝集试验（PAPS）、三联斑点酶联免疫吸附试验（兰联Dot-ELISA）5种血清学诊断方法与粪检方法检测牛日本血吸虫病，并对5种血清学检测结果进行评价．检测分析结果表明，甩血清学方法COPT，sIHA，三联Dot-ELISA对疫区黄牛进行血吸虫病检测．与三粪九检结果符合率高，具有灵敏度高、特异性好、简捷方便、费用低等特点，特别适用于疫区家畜血吸虫病的诊断、普查．是比较理想的现场检测方法，值得推广．血清学方法bpIHA和PAPS检测血吸虫病，尽管方法简便、费用低廉，但其灵敏度、特异性与三粪九检结果符合率低于血清学方法COPT，sIHA，三联Dot-ELISA，易造成漏检，似阳性，故在普查时，不建议采用．

语种： 中文

作者： 钟辉;刘湘新;张俊鹏;王喆

期刊： 动物学杂志,2007年42(5):121-124 ISSN：0250-3263

作者机构： [钟辉; 刘湘新] 湖南农业大学动物医学院;[张俊鹏] 华东师范大学生命科学学院;[王喆] 中国科学院动物研究所;中国科学院研究生院

关键词： 精子储存;组织切片;蝙蝠

摘要： 精子储存是蝙蝠的生殖对策之一,有些种类的蝙蝠能将成熟精子在交配前(雄性)或交配后(雌性)储存在附睾或者输卵管及子宫内数月.采用冰冻切片和苏木精-伊红(H.E)染色法,观察了6种蝙蝠的睾丸、附睾、卵巢、输卵管和子宫,发现5种蝙蝠有精子储存现象.另外,本文还讨论了不同生殖对策蝙蝠的地理分布.

语种： 中文

作者： 唐宇龙;杨华;刘湘新;秦莲花;柳彬;...

期刊： 中国病原生物学杂志,2007年2(1):14-16 ISSN：1673-5234

作者机构： [唐宇龙; 杨华; 秦莲花; 胡忠义] 上海市结核重点实验室;[刘湘新; 柳彬] 湖南农业大学动物医学院;上海市结核重点实验室上海200433;上海市结核重点实验室 上海200433湖南农业大学动物医学院湖南长沙410128

关键词： 结核分枝杆菌;克隆;表达

摘要： 目的构建结核杆菌分泌蛋白MPT53原核表达载体并进行表达和纯化。方法以结核分枝杆菌标准株H37Rv基因组DNA为模板扩增MPT53基因，产物经纯化回收后与载体pMD-T连接转化，酶切鉴定，克隆到pET32a原核表达载体，测序鉴定插入序列完全正确者转化大肠埃希菌BL21，诱导表达MPT53融合蛋白，亲和层析纯化后，进行SDS-PAGE电泳鉴定。结果成功构建PET32a-MPT53重组质粒，转化BL21后经IPGT诱导成功表达分子质量单位为36ku的MPT53蛋白，与理论值相符。结论成功表达结核分枝杆菌MPT53蛋白，为其应用打下了基础。

语种： 中文

作者： 邱元;黄复深;陈尔曼;郝知友;袁鑫

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2007年33(2):200-204 ISSN：1007-1032

作者机构： [邱元; 黄复深; 陈尔曼; 郝知友; 袁鑫] 湖南农业大学动物医学院;湖南农业大学动物医学院 湖南长沙410128;湖南农业大学细胞工程重点实验室

关键词： 猪瘟病毒E2基因;粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子;核酸疫苗;免疫应答

摘要： 为探讨粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）对猪瘟病毒E_2基因核酸疫苗小鼠免疫应答诱导的影响,将CSFVE_2基因和GM-CSF片段插入真核表达载体pcDNA3.0内构建pcE_2,pcE_2-GF及pcGF核酸疫苗.动物试验时,50只雌性供试小鼠随机分为5组,即pcE_2,pcE_2-GF,pcDNA3.0,pcGF,生理盐水组,每组10只.0,2,4周于小鼠左后肢胫前肌进行肌注免疫,质粒量为每只每次50μg.每次免疫前和末次免疫后2周尾静脉采血收集血清,ELISA检测血清内特异性IgG水平.末次免疫后1周每组随机选3只无菌取脾,MTT法检测淋巴细胞增殖情况.结果表明,与对照组比较,pcE_2和pcE_2-GF第3次免疫2周后,免疫小鼠IgG抗体水平逐渐增高,淋巴细胞的转化率也明显增高,且pcE_2-GF免疫组的IgG抗体水平和淋巴细胞的转化率高于pcE_2免疫组.可见,细胞因子GM-CSF可有效提高猪瘟病毒E_2基因核酸疫苗的免疫应答.

语种： 中文

作者： 罗浑金;李梅;傅童生;邱星辉;候慧丽;...

期刊： 生物技术通报,2007年(5):141-143 ISSN：1002-5464

作者机构： [罗浑金; 傅童生; 候慧丽; 姚艳] 湖南农业大学动物医学院;[李梅; 邱星辉] 中国科学院动物研究所

关键词： 家蝇;抗药性;拟除虫菊酯;多杀菌素;氟虫腈

摘要： 拟除虫菊酯的广泛使用使家蝇普遍产生了抗药性,为有效的控制家蝇的危害,需要了解家蝇对轮换或新杀虫剂的交互抗性状况。作者用点滴法测定了两个实验室汰选的拟除虫菊酯抗性家蝇品系对几种杀虫剂的交互抗性,结果表明：二氯苯醚菊酯和溴氰菊酯之间存在较高程度的交互抗药性;拟除虫菊酯抗性较高的家蝇对作用机制不同的新农药（多杀菌素、氟虫腈）表现较低程度的交互抗性。

语种： 中文

作者： 贺军宇;袁慧;李芳

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2006年32(6):655-657 ISSN：1007-1032

作者机构： [贺军宇; 袁慧] 湖南农业大学,动物医学院;[李芳] 沙市雅礼寄宿制中学,生物教研组

关键词： F-2毒素;维生素E;卵巢颗粒细胞;丙二醛;脂质过氧化作用;细胞活性

摘要： 采用细胞体外培养的方法,在卵巢颗粒细胞对数生长期,对F-2毒素的繁殖遗传毒性和V-E对其的解毒作用进行了研究.结果表明,各毒素组细胞活性显著低于正常对照组,而丙二醛(MDA)含量显著低于正常对照组;各解毒组细胞活性均显著高于各毒素组,但明显低于正常对照组,而MDA含量显著低于各毒素组,但明显高于正常对照组.这表明,F-2毒素可能是通过脂质过氧化作用,对颗粒细胞致毒,V-E对F-2毒素具有较好的解毒作用,能提高中毒卵巢颗粒细胞的抗过氧化能力.

语种： 中文

作者： 王乃东;薛立群;许道军;袁安文;邓治邦;...

期刊： 生物工程学报,2006年22(5):727-732 ISSN：1000-3061

通讯作者： Wang, N.D.

作者机构： 湖南农业大学动物医学院,长沙,410128;湖南农业大学动物科技学院,长沙,410128;[袁安文; 薛立群; 王乃东; 邓治邦; 许道军; 崔树良] 湖南农业大学

关键词： 小鼠;H-Y抗原;噬菌体展示技术;抗体库

摘要： 利用噬菌体抗体库筛选技术获得抗雄性特异性抗原的噬菌体Fab抗体,首次采用雄鼠脾细胞对鼠源性抗雄性特异性抗原噬菌体Fab抗体库进行3轮亲和富集和2轮雌鼠脾细胞吸附,对筛选后特异性噬菌体Fab抗体进行ELISA分析,重组率鉴定及基因测序分析.结果显示,5次筛选后的15个菌落中有9个能产生抗雄性特异性抗原特异性噬菌体抗体,噬菌体Fab抗体的基因重组率为60%,E5克隆的重链、轻链可变区序列分别属于V_H1和VκⅣ基因家族,这为挑选出高亲和力的抗雄性特异性抗原噬菌体Fab抗体奠定了实验基础,将推进雄性特异性抗原及其抗体的研究进程,并为性别控制研究开创新途径.

语种： 中文

作者： 唐宇龙;刘湘新;杨华;丁元生;胡忠义

期刊： 中国兽医科学,2006年36(10):811-814 ISSN：1673-4696

作者机构： [唐宇龙; 刘湘新] 湖南农业大学动物医学院;[杨华; 丁元生; 胡忠义] 上海市结核重点实验室

关键词： 结核分枝杆菌;融合蛋白CFP10-ESAT-6;表达;多克隆抗体

摘要： 以结核分枝杆菌标准株H37Rv的基因组DNA为模板，经重叠PCR扩增获得CFP10-ESAT-6融合基因片段，克隆于pET21a表达载体中，获得了重组质粒pET21a—CFP10—ESAT—6，将其转化大肠杆菌BL21细胞，经IPTG诱导表达，得到了25ku的目的蛋白。表达产物经纯化和定量分析后免疫新西兰大白兔，收集兔血清进行抗体ELISA检测。结果显示，成功构建了CFP10-ESAT-6融合基因的原核表达质粒，获得了CFP10-ESAT-6融合蛋白，以此蛋白免疫动物可产生高效价的抗体。

语种： 中文

作者： 郝知友;黄复深;袁鑫;陈尔曼;邱元;...

期刊： 中国寄生虫学与寄生虫病杂志,2006年24(6):445-448 ISSN：1000-7423

通讯作者： Hao, Z.Y.

作者机构： [郝知友; 黄复深; 袁鑫; 陈尔曼; 邱元; 刘毅] 湖南农业大学动物医学院;湖南农业大学细胞工程重点实验室 长沙410128

关键词： 日本血吸虫;核酸疫苗;小鼠;免疫保护力

摘要： 目的 探讨日本血吸虫SjIR3核酸疫苗诱导小鼠抗日本血吸虫攻击感染的保护效果.方法 用SjIR3的特异引物构建疫苗SjIR3/pC.54只昆明小鼠随机分为3组:A组(对照组)、B组(空质粒组)和C组(实验组)分别肌注生理盐水(100 μl)、pcDNA3.0和SjIR3/pC(各50 μg),共免疫3次,每次间隔2周.于每次免疫前和感染前尾静脉采血,ELISA检测血清IgG抗体水平.末次免疫后2周,各组剖杀其中6只小鼠取脾细胞,分别用ConA或rSjIR3重组蛋白诱导,用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测脾淋巴细胞增殖情况.各组余下小鼠分别经腹部感染日本血吸虫尾蚴40±1条,45 d后宰杀,观察实验组小鼠的减虫率和肝减卵率.结果 ELISA结果显示,A组与B组IgG抗体水平变化不明显(P＞0.05),C组于末次免疫后2周(攻击感染前)IgG抗体水平最高为0.78±0.05,且与A、B两组比较差异有统计学意义(P＜0.01);末次免疫后,实验组小鼠脾淋巴细胞分别在ConA或rSjIR3重组蛋白诱导下可增殖,分别为0.57±0.02、0.68±0.01,与A、B组相比差异有统计学意义(P＜0.01).经SjIR3/pC免疫的实验组小鼠攻击感染后可产生29.4%的减虫率和36.6%的肝减卵率.结论 SjIR3/pC核酸疫苗具有较好的免疫原性,可诱导小鼠产生部分免疫保护力.

语种： 中文

作者： 王水莲;薛立群;刘自逵

期刊： 中国兽医学报,2006年26(4):451-453,456 ISSN：1005-4545

作者机构： [王水莲; 薛立群; 刘自逵] 湖南农业大学动物医学院;湖南农业大学动物医学院 湖南长沙410128

关键词： 兔;子宫内膜;蛋白质;双向电泳;附植

摘要： 为了有效地研究胚泡附植的分子机制．本研究建立了一套适合兔子宫内膜蛋白分析的双向电泳技术体系．包括蛋白质含量测定、第1向IEF—PAGE和第2向SDS—PAGE的凝胶配方及电泳参数的选择、电极溶液的选择，并运用该技术体系分析了未孕兔和受孕2、4、6、9d兔子宫内膜蛋白。结果表明，在给定的时期内，兔子宫内膜蛋白质的含量有变化，但差异不显著；用所建立的双向电泳体系分析子宫内膜蛋白质后发现，双向电泳图谱的重复性好，蛋白质点的分辨率高，共同蛋白质点多。差异蛋白质点少。

语种： 中文

作者： 李文平;罗国良;马美湖

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2006年32(3):296-299 ISSN：1007-1032

作者机构： [李文平; 罗国良] 湖南农业大学动物医学院;[马美湖] 湖南农业大学食品科技学院

关键词： 茶多酚复方制剂;肿瘤;细胞凋亡

摘要： 为探讨茶多酚复方制剂对荷瘤小鼠的抑瘤效果及可能的机制，采用动物移植性肿瘤试验法，建立荷瘤（S180）小鼠模型，用茶多酚复方制剂治疗10d后，处死后剥离肿瘤，测试抑瘤率．观察肿瘤组织HE染色切片的肿瘤细胞凋亡情况，并提取肿瘤细胞DNA进行琼脂糖凝胶电泳．结果表明，药物组的抑瘤率达26．5％，并能使肿瘤切片出现大量细胞发生凋亡特征性改变．琼脂糖凝胶电泳，从电泳带可见到细胞发生凋亡的特征性DNA梯状条带．茶多酚复方制剂可以抑制荷瘤小鼠肿瘤生长，有明显的抑瘤作用，其抑瘤机制与诱导肿瘤细胞凋亡的机理有关．

语种： 中文

作者： 王水莲;杨利国;薛立群;曹迎春;陈小军

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2006年32(6):644-647 ISSN：1007-1032

作者机构： [王水莲; 薛立群; 曹迎春; 陈小军] 湖南农业大学,动物医学院;[杨利国] 华中农业大学,动物科技学院

关键词： 抑制素基因;免疫;抗体;肉牛;反应性

摘要： 为探讨佐剂、质粒纯度和免疫次数3种因素对抗抑制素抗体效价的影响,以分析抑制素基因免疫是否使肉牛产生免疫应答,利用已构建的抑制素真核融合表达质粒pCISI对肉牛进行了免疫试验.结果表明,抑制素pCISI基因免疫肉牛后佐剂处理组比无佐剂组免疫效果明显.对抗体P/N(待测血样的吸光值P与阴性血样吸光值N的比值)来说,普鲁卡因佐剂显著优于脂质体,但就抗体阳性率来说,普鲁卡因和脂质体差异不显著.无论是抗体P/N值还是抗体阳性率,高纯度组的效果略高于低纯度组,但差异不明显.随着免疫次数的增加抗体P/N值和抗体阳性率均升高,两者差异显著,说明了抑制素基因免疫肉牛可诱导产生抗抑制素抗体,纯度对抗体的产生和抗体阳性牛比例没有影响,但免疫佐剂与免疫次数有影响.

语种： 中文

作者： 程天印;周金林;周勇志;施启顺;林矫矫

期刊： 畜牧兽医学报,2006年37(11):1194-1197 ISSN：0366-6964

作者机构： 中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所,上海,200232;湖南农业大学动物医学院,长沙,410128

关键词： 亚洲璃眼蜱;GP29基因;GST-融合蛋白;肽质量;肽序列

摘要： 将吸血诱导的亚洲璃眼蜱唾液腺差异表达基因GP29的开放性阅读框插入pGEX-4T-1,转化BL21,表达出一相对质量为53 ku的蛋白,其大小与预计结果一致.蛋白质的肽质量图谱和 "1381.7511"肽段序列两方面的结果证明,SDS-PAGE胶板上相对质量为53 ku的蛋白就是由目的基因表达的GST融合蛋白.该蛋白与Swiss PROT库中的任何蛋白均有较大差别,可能是一个新功能分子.

语种： 中文

作者： 王一然;贺兰;刘进辉;徐芳;刘湘新;...

期刊： 建筑材料学报,2005年8(4):341-348 ISSN：1007-9629

通讯作者： Huang, Z.-L.

作者机构： [王一然; 徐芳] 湖南农业大学食品科学技术学院;[贺兰] 益阳市赫山区沧水铺人民医院;[刘进辉; 刘湘新] 湖南农业大学动物医学院;[贺建华] 湖南农业大学动物科学技术学院

通讯机构： Department of Construction Engineering, Taiwan University of Science and Technology, Taiwan

关键词： 高性能轻骨料混凝土;配比;电渗;电阻率

摘要： 由于传统轻骨料吸水率高及连通孔洞多,而传统轻骨料混凝土又使用大量的水泥及水,因此在台湾的海洋性气候所形成的盐雾侵蚀环境下,传统轻骨料混凝土在达到隔热效果的同时却降低了其耐久性能,并对混凝土结构物的服务寿命也造成了影响.采用低吸水率的淤泥轻骨料,并通过致密配比设计,制成了高流动度、高性能的轻骨料混凝土(HPLWC);以3种水胶比(0.28,0.32,0.40)及3种用水量(140,150,160 kg/m3),探讨了水泥浆的质与量对高性能轻骨料混凝土耐久性能的影响.对混凝土试件730 d龄期的测量结果显示,各组轻骨料混凝土可同时达到具有足够强度、高流动度、高电阻率(在91 d及730 d可分别达到33～82 kΩ·cm及137～175 kΩ·cm)、低电渗(在91 d可达到650～980 C)的工程性质.

语种： 中文

作者： 汤东江;缪文超;向秀成

期刊： 中国兽医科学,1999年29(10):37-38 ISSN：1673-4696

作者机构： 湖南省微生物研究所!湖南长沙410009;湖南农业大学兽医系!湖南长沙410128

关键词： 猪;传染性胸肺炎;诊断

语种： 中文

作者： 黎满香;刘红旗;陈可毅;蒋武成;王吉祥

期刊： 中国兽医科学,1997年27(2):31-32 ISSN：1673-4696

作者机构： [黎满香; 陈可毅; 蒋武成; 王吉祥] 湖南农业大学动物科技学院;[刘红旗] 湖南农业大学兽医系

关键词： 试管法;纸片法;抑菌试验

摘要： 试管法和纸片法抑菌试验的比较黎满香刘红旗１）陈可毅蒋武成王吉祥（湖南农业大学动物科技学院长沙４１０１２８）药物的体外抑菌试验已广泛应用于各个方面，如抗菌药物的筛选、提取过程的追踪、抗菌谱测定、含量测定以及指导医疗用药的药敏试验等。其方法分连续稀释法和...

语种： 中文

作者： 陈丽君;蒋武成;陈可毅

期刊： 中国兽医杂志,1996年22(7):21-22 ISSN：0529-6005

作者机构： 上海农科院生物技术研究中心;[陈丽君; 蒋武成; 陈可毅] 湖南农业大学动物医学系;湖南农业大学动物医学系 201106;长沙 410128

关键词： 仔猪;伪狂犬病（PR）;诊断

摘要： <正> 1992年3月至1993年4月,湖南长沙、湘阴和益阳地区的3个种猪场暴发流行一种以神经症状为主的疾病,致死率达90%以上,作者进行了详细的调查和诊断,经实验室确诊为猪伪狂犬病（PR）,报告如下。一、流行情况及临诊症状 1992年3月,8月和1993年4月,长沙、湘阴和益阳地区的3个种猪场陆续发生仔猪发病死亡,共有500多头发病,死亡470头,发病率为25～55%,病死率为94%。最小的3日龄,最大50日龄,以10～20日龄发病率最高。病程平均4～5天,长可达1周,最短则为1～2天,患病仔猪体温40.0～41.6℃,持续高温,至濒死期体温才下隆,精神沉郁,食

语种： 中文

作者： 李桓英;翁小满;李彤;郑大有;毛志民;...

期刊： 中国兽医科学,1995年42(5):333-337 ISSN：1673-4696

作者机构： [刘诚; 黎满香; 卢帅; 蒋伟] 湖南农业大学动物医学院

关键词： 麻风;流行病学;药物治疗;预测

摘要： 为了获得抗菌肽Dermadistinctin-K并鉴定其生物活性,依据GenBank中的氨基酸序列,使用化学合成和PCR相结合的方法获得了完整的Dermadistinctin-K基因序列;使用表达载体pET-32a(+)构建工程菌;用IPTG诱导融合蛋白表达并优化其表达条件,在IPTG终浓度0.1mmol/L下诱导5h表达量最大;最后用His-tag protein Purification kit纯化了融合蛋白,使用肠激酶酶切获得目的蛋白,并进行生物活性鉴定。分析结果表明,抗菌肽Dermadistinctin-K具有抗菌活性和一定的耐热性,其生物活性与pH值密切相关。

语种： 中文

作者： 杨亚;刘进辉;伏健;严芬;程天印

期刊： 钢铁,1993年28(4):5-10 ISSN：0449-749X

通讯作者： Liu, Yuncai

作者机构： [杨亚; 刘进辉; 伏健; 严芬; 程天印] 湖南农业大学动物医学院

通讯机构： Shoudu Iron and Steel Co, China

关键词： 无钟炉顶;高炉;布料;炉料;溜槽;偏斜;转速;参数计算;轨迹

摘要： 蜱类系统分类学研究已经进入分子阶段,与传统的形态学、生物学鉴定相比,无疑更加客观准确,建立系统进化树更能全面反映其亲缘关系,极大地提高了鉴定效率与可信度。论文总结了近年来应用分子生物学技术鉴定硬蜱的主要方法,包括核酸序列分析、随机扩增DNA多态性分析、限制性片段长度多态性分析。随着分子生物学和现代统计学的广泛应用,蜱类的鉴定将更加依赖现代分类学方法。

语种： 中文

作者： 李健夫;刘毅;田维中

期刊： 动物分类学报：英文版,1992年17(2):156-159 ISSN：2095-6827

作者机构： 湖南农学院牧医系;兰州市兽防站

关键词： 新种;首尾属;异尖线虫科;尖尾亚目

摘要： 本文报道了西藏高寒山区田鼠盲肠内的一寄生线虫——加查首尾线虫,新种（Cephaluris jiachaensis sp-nov.）。隶属于线虫纲、尖尾亚目、异尖线虫科。本新种的鉴别特征为:1.缺肛前栉。2.泄殖孔前后仅两对乳突。3.交合刺明显长于已知种的交合刺。

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