一种改进的高效模拟抗原表位噬菌体的筛选方法
作者:
胡云霏;葛猛;岑静;李润成;余兴龙
期刊:
中国兽医科学 ,2017年47(1):82-87 ISSN:1673-4696
作者机构:
[胡云霏; 葛猛; 岑静; 李润成; 余兴龙] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128
关键词:
噬菌体展示;模拟抗原表位;多样性;扩增
摘要:
以抗红斑丹毒丝菌多克隆抗体为研究对象,首先加入噬菌体与抗体作用,保证目的噬菌体与抗体的高效结合,再通过蛋白A和蛋白G能快速、高亲和力吸附抗体Fc段的特性,将抗体-噬菌体复合物固定在酶标孔中;经洗涤和洗脱后将筛选的噬菌体稀释,分装到10块96孔培养板中扩增。第1轮筛选所获得的噬菌体种类一般少于1×10~4个,经约1 000倍稀释后,每个酶标孔中扩增的噬菌体少于10个,这将极大地降低噬菌体因竞争扩增而丢失的概率,甚至无噬菌体丢失。结果显示,相比于传统方法从224个样品中获得36个多肽,本次从100个样品中就获得了72个多肽。同时,为满足大量噬菌体样品的验证工作,采用加入40 mL/ L吐温-80的培养基在10mL离心管中以2mL体积扩增噬菌体,最终的噬菌体效价提高了317%,总量超过8×10~(10),足以满足后续试验的要求。该改进的方法可以显著提高噬菌体筛选的效率,可操作性强,具有广泛的普遍适用性。
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绵羊虱蝇中肠和蛹菌群结构的分析
作者:
汪雅琴;程天印;段德勇
期刊:
中国兽医科学 ,2017年47(7):861-865 ISSN:1673-4696
作者机构:
[汪雅琴; 程天印; 段德勇] 湖南农业大学动物医学院, 湖南畜禽安全生产协同创新中心, 湖南, 长沙, 410128
关键词:
绵羊虱蝇;中肠;蛹;菌群结构
摘要:
为探明绵羊虱蝇雌、雄成虫中肠及蛹的菌群结构特点,提供防控绵羊虱蝇及其传播疾病的科学依据,本研究在无菌条件下采集雌、雄绵羊虱蝇成虫中肠内容物及蛹内容物,用试剂盒提取细菌总DNA,运用通用引物PCR扩增细菌16S rDNA V3区,DGGE电泳,选取优势条带,回收、测序,测序结果与GenBank数据库中已知序列进行比对。结果显示,雌、雄绵羊虱蝇成虫中肠及蛹的优势菌均为巴尔通氏体、杀雄菌、沃尔巴克氏体。研究结果表明,雌、雄绵羊虱蝇成虫中肠及蛹的菌群结构相似,且巴尔通氏体、杀雄菌、沃尔巴克氏体可垂直传播。
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中文
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桦木酸对地塞米松致氧化应激小鼠血清指标的影响
作者:
朱利娟;赵静;向思亭;王喜红;黄琳;...
期刊:
动物营养学报 ,2017年29(5):1627-1633 ISSN:1006-267X
作者机构:
湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128;湖南农业大学动物医学院, 湖南畜禽安全生产协同创新中心, 长沙, 410128;[朱利娟; 赵静; 向思亭; 王喜红; 黄琳; 易想炼; 朱若岑; 邬静] 湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128;[易金娥] 湖南农业大学动物医学院, 湖南畜禽安全生产协同创新中心, 长沙, 410128
关键词:
桦木酸;地塞米松;氧化应激;血清指标
摘要:
本试验旨在研究桦木酸(BA)对地塞米松(Dex)诱导氧化应激小鼠血清指标的影响。将40只健康雄性昆明小鼠随机分为5组, 即对照(NC)组、Dex组、0.25 mg / kg BA组、 0.50 mg / kg BA组、1.00 mg / kg BA组,每组8只。NC组和Dex组灌服1%的可溶性淀粉,其余各组灌服混悬于1%可溶性淀粉溶液中不同剂量的BA,连续灌服14 d后,除NC组注射生理盐水外,其余4组均腹腔注射25 mg / kg Dex诱导氧化应激模型。15 h后,眼眶采血,收集血清。检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)活性,总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、总胆红素(T–Bil)、钙离子(Ca~(2+))、细胞色素C(CytC)含量,总抗氧化能力(T–AOC)、抑制羟自由基能力、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量。结果显示:BA预处理后,能够显著或极显著降低Dex诱导氧化应激小鼠血清ALP活性及TG、T–Bil、CytC含量(P<0.05或P<0.01),且呈量效关系;低剂量BA(0.25、0.50 mg / kg)显著或极显著降低了血清MDA含量(P<0.01或P<0.05),但高剂量BA(1.00 mg / kg)反而极显著升高了其含量(P<0.01);能够显著或极显著升高血清Ca2+ 和GSH含量、SOD的活性、T–AOC和抑制羟自由基能力(P<0.05或P<0.01),并呈量效关系;降低了血清ALT和AST活性,但影响不显著(P>0.05),对血清TP和ALB含量无显著影响(P>0.05)。由此可见,BA能够改善Dex引起的小鼠血清指标的变化,对Dex诱导的氧化损伤有预防性的保护作用。
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东北虎源蛔虫线粒体cox1基因序列进化分析研究
作者:
邱启官;谭磊;商红帅;刘伟
期刊:
中国预防兽医学报 ,2017年39(1):71-73 ISSN:1008-0589
作者机构:
长沙生态动物园, 湖南, 长沙, 410109;湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128;铜陵动物园, 安徽, 铜陵, 244000;[邱启官] 长沙生态动物园, 湖南, 长沙, 410109;[谭磊; 刘伟] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128
关键词:
蛔虫;细胞色素I;序列分析;猫弓首蛔虫
摘要:
为了解东北虎源蛔虫与其他蛔虫的种群遗传关系,本研究对湖南省长沙生态动物园东北虎粪便中采集的蛔虫成虫的线粒体DNA中细胞色素I (cox1)基因序列进行扩增,将测序结果与GenBank中登录的其他蛔虫cox1序列进行对比及种系发育树分析。结果显示,来自长沙生态动物园7个东北虎蛔虫样品cox1序列长度基本一致,为413 bp~414 bp,与猫弓首蛔虫同源性最高,达98.4 %以上,而且系统进化分析显示所有样品均与猫弓首蛔虫位于同一分支。该结果表明,pcox1序列种内相对保守,种间差异较大,因此可以作为猫科弓首蛔虫的种间遗传变异研究的分子遗传标记,从而为蛔虫的群体遗传研究奠定了基础。
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PCV2a-ORF3基因缺失株感染性克隆的构建
作者:
湛洋;胡意;王东亮;蔡杰;邓治邦
期刊:
中国预防兽医学报 ,2017年39(5):351-355 ISSN:1008-0589
作者机构:
[湛洋; 胡意; 王东亮; 蔡杰; 邓治邦] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128
关键词:
ORF3基因;基因缺失;重叠延伸PCR
摘要:
为构建猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)的感染性克隆及其ORF3缺失的感染性克隆,本研究通过比较分析GenBank中8种亚型的PCV2基因组序列(各3株),设计了PCV2基因全长克隆引物,以从江西省萍乡市某猪场疑似感染断奶仔猪多系统衰竭综合征病死猪的病料中提取的DNA为模板,利用PCR方法扩增PCV2全长基因序列并进行测序。利用分子生物学软件对测序结果分析,结果表明所获得的克隆为PCV2a-2A基因型。采用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法扩增病毒全长基因组DNA,克隆于pSP72载体中构建野生型PCV2a病毒株感染性克隆。此外,采用SOE-PCR方法,缺失野生型PCV2a感染性克隆中的阅读框3 (ORF3),并将这两种重组质粒分别转染PK15细胞,盲传6代后经PCR和间接免疫荧光方法检测显示,构建的PCV2a病毒株与PCV2a-ORF3突变株克隆均具有感染性。本研究为进一步探究ORF3基因对PCV2致病机理和免疫原性的影响奠定了基础。
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湖南省健康猪群中不同基因型猪博卡病毒流行性及进化分析
作者:
屈泰龙;李润成;罗斌宇;葛猛;严美君;...
期刊:
华北农学报 ,2017年32(5):136-141 ISSN:1000-7091
作者机构:
[屈泰龙; 李润成; 罗斌宇; 葛猛; 严美君; 胡辉灿; 余兴龙] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128
关键词:
猪博卡病毒;流行性;进化分析;混合感染;致病性
摘要:
为了解猪博卡病毒在不同年龄健康猪群中的感染情况,通过对GenBank登录的猪博卡病毒基因序列分析设计2对引物可分别扩增PBoV1 /2的部分NS1基因和PBoV3 /4 /5的部分VP1基因。提取2016年8 - 12月收集自湖南5个集约化猪场2 ~ 20周龄猪共430份肛门拭子样品的DNA并进行PCR检测。PBoV阳性率为64.6%(278 /430),PBoV1 /2阳性率为27.2%(117 /430),PBoV3 /4 /5阳性率为45.1%(194 /430),混合感染率为7.7%(33 /430),PBoV3 /4 /5阳性率显著高于PBoV1 /2阳性率(P = 0.034) 。PBoV1 /2在2 ~ 10周检出率高于其他周龄,但是与其他周龄猪体内检出率统计分析无显著性差异,PBoV3 /4 /5主要感染8 ~ 16周猪,与4周以内猪差异显著,与其他猪群差异不显著。对各型的核苷酸与参考序列核苷酸相似性分析显示PBoV1 /2之间的平均相似度为85.4%, PBoV3 /4 /5之间的平均相似度为67.2%。PBoV在健康猪群中流行广泛且存在共同感染现象,对猪的健康尤其是肠道微生物平衡可能存在潜在影响。
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博落回bHLH转录因子的克隆、表达分析及植物表达载体构建
作者:
黄鹏;刘金凤;柳亦松;唐其;曾建国
期刊:
分子植物育种 ,2017年15(4):1332-1337 ISSN:1672-416X
作者机构:
湖南农业大学园艺园林学院, 兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心, 长沙, 410128;湖南农业大学, 兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心, 长沙, 410128;[黄鹏; 刘金凤; 唐其; 曾建国] 湖南农业大学园艺园林学院, 兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心, 长沙, 410128;[柳亦松] 湖南农业大学, 兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心, 长沙, 410128
关键词:
博落回;bHLH1转录因子;实时定量表达;表达载体构建
摘要:
碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)类转录因子在植物的发育、抗逆和次生代谢产物的调控等方面起重要的作用.通过将其他物种的bHLH基因序列在博落回转录组数据库中进行比对筛选到1个同源性较高的 unigene (McbHLHl)并对序列生物信息学分析,该基因开放阅读框(ORF)长为744 bp,编码247个氨基酸,预测其编码的分子质量为27.021 kD,理论等电点为10.08.实时荧光定量结果显示McbHLH1基因在根部表达量最高,茎和叶子中表达量极低.表明McbHLH1可能参与博落回苄基异喹啉生物碱(BIAs)的合成与调控,并构建植物表达载体用于基因功能验证.
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博落回McTYDC基因的克隆与实时定量表达分析
作者:
刘金凤;黄鹏;柳亦松;唐其;曾建国
期刊:
分子植物育种 ,2017年15(2):501-506 ISSN:1672-416X
作者机构:
湖南农业大学园艺园林学院, 兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心, 长沙, 410128;湖南农业大学, 兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心, 长沙, 410128;[刘金凤; 黄鹏; 唐其; 曾建国] 湖南农业大学园艺园林学院, 兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心, 长沙, 410128;[柳亦松] 湖南农业大学, 兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心, 长沙, 410128
关键词:
博落回;酪氨酸脱羧酶;实时定量表达
摘要:
酪氨酸脱羧酶(TYDC)位于苄基异喹啉类生物碱(BIAs)生物合成的初始位置,其在合成BIAs的过程中发挥重要作用。我们通过博落回转录组数据筛选到1个博落回TYDC (McTYDC2)候选基因并进行生物信息学分析。通过克隆ORF区并实时定量表达分析该基因在不同组织中的表达规律,发现其表达规律与博落回中BIAs代谢规律相符。该研究有助于下一步验证McTYDC2基因的功能以及阐明McTY DC2基因在博落回中合成BIAs的合成机制等方面的研究。
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2011—2015年临床分离粪肠球菌和屎肠球菌分布情况及耐药性分析
作者:
李佳;刘国烨;胡露露;康海全;邓丽华;...
期刊:
南京医科大学学报(自然科学版) ,2017年40(10):1353-1356 ISSN:1007-4368
作者机构:
[黎满香; 林荣高; 薛立群; 蒋伟; 陈滔] 湖南农业大学动物医学院
关键词:
粪肠球菌;屎肠球菌;耐药性;临床分布
摘要:
目的:了解徐州医科大学附属医院2011—2015年粪肠球菌和屎肠球菌的标本来源、科室分布情况及5年间的耐药性变迁。方法:应用梅里埃VITEK2 COMPACT全自动微生物分析系统进行细菌鉴定及抗菌药物敏感试验(MIC法),结果按美国临床实验室标准化研究所标准(2014版)判定,以WHONET5.6软件分析数据。结果:2011—2015年共分离到999株非重复肠球菌属细菌,以粪肠球菌(494株)和屎肠球菌(386株)为主;菌株来源以尿液最多;粪肠球菌和屎肠球菌在重症医学科明显高于其他科室,其次为泌尿外科;屎肠球菌对一些常用抗菌药物的耐药率明显高于粪肠球菌。结论:本院重症医学科、泌尿外科和急诊ICU是预防控制的重点科室;5年间本院粪肠球菌和屎肠球菌耐药率明显高于CHINET水平,耐药形势严峻,需高度警惕,加强耐药监测和规范临床对抗菌药物的使用。
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子痫前期动物模型的研究进展
作者:
Xiao Zhong-Lin;Yang Qing* ;Zhang Jian;Fan Xiu-Jun*
期刊:
生物化学与生物物理进展 ,2016年43(6):563-569 ISSN:1000-3282
通讯作者:
Yang Qing;Fan Xiu-Jun
作者机构:
[Yang Qing; Xiao Zhong-Lin] Hunan Agr Univ, Coll Vet Med, Changsha 410128, Hunan, Peoples R China.;[Zhang Jian; Xiao Zhong-Lin; Fan Xiu-Jun] Chinese Acad Sci, Shenzhen Inst Adv Technol, Lab Reprod Hlth, Shenzhen 518055, Peoples R China.
通讯机构:
[Yang Qing] H;[Fan Xiu-Jun] C;Hunan Agr Univ, Coll Vet Med, Changsha 410128, Hunan, Peoples R China.;Chinese Acad Sci, Shenzhen Inst Adv Technol, Lab Reprod Hlth, Shenzhen 518055, Peoples R China.
关键词:
子痫前期;动物模型;高血压;蛋白尿;滋养层细胞;螺旋动脉
摘要:
子痫前期是一种非常严重的妊娠疾病,主要症状有高血压、蛋白尿、内皮功能障碍、肾小球血管内皮细胞增生以及滋养层细胞浸润不足等,动物模型是研究本病发病机理与开发诊治手段的主要工具.长期以来,针对子痫前期主要症状已经建立了多种动物模型,但不同的动物模型各有优缺点,至今仍没有一个理想的子痫前期动物模型,这也是子痫前期病因不明和缺乏有效治疗手段的主要原因之一.本文就已有的模型进行了归纳总结,旨在为不同研究需要而选择合适的模型,并为开发更为理想的子痫前期动物模型提供参考.
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赤眼鳟Toll样受体3基因cDNA全长克隆及表达分析
作者:
肖调义;李伟;王荣华;刘巧林;彭慧珍;...
期刊:
水生生物学报 ,2016年40(5):894-901 ISSN:1000-3207
作者机构:
湖南农业大学, 湖南省特色水产资源利用工程技术研究中心;[肖调义; 刘巧林; 彭慧珍] 水产高效健康生产湖南省协同创新中心, 长沙, 410128;湖南农业大学, 湖南省特色水产资源利用工程技术研究中心, 长沙, 410128;[肖调义; 刘巧林; 彭慧珍] 湖南农业大学, 湖南省特色水产资源利用工程技术研究中心;[李伟; 王荣华; 苏建明] 湖南农业大学, 湖南省特色水产资源利用工程技术研究中心, 长沙, 410128
关键词:
赤眼鳟;Toll样受体3;分子克隆;表达特征
摘要:
为探究赤眼鳟(Squaliobarbus curriculus) Toll样受体3(Toll-like receptor 3, ScTLR3)基因是否参与抗病毒免疫反应,实验运用RACE技术,克隆得到ScTLR3基因cDNA全长序列,并进行了生物信息学分析;通过Real- Time qPCR技术,检测了ScTLR3 mRNA在健康赤眼鳟10个组织中的分布以及感染草鱼呼肠孤病毒(GCRV)后肝脏、脾脏、体肾和头肾中的表达特征。结果表明: ScTLR3基因cDNA序列全长4043 bp,包括5'-非编码区(UTR) 216 bp,开放阅读框(ORF)2715 bp和3'-UTR 1112 bp; ScTLR3共编码904个氨基酸残基,推导的蛋白分子量102.67 kD,理论等电点8.76; SMART结构域预测显示, ScTLR3由N端的信号肽(SP)、富亮氨酸结构域(LRRs)、跨膜结构域(TM)和C端的Toll/白介素-1受体结构域(TIR)组成。实时荧光定量结果显示, ScTLR3 mRNA在检测的各组织中均有表达,肝脏中的相对表达量极显著高于其他组织(P<0.01);感染GCRV后,肝脏、脾脏、体肾和头肾组织中ScTLR3 mRNA均上调表达,肝脏、脾脏和体肾组织中的相对表达量在24 h达到峰值,分别为对照组的5倍、7倍和6倍。研究表明, ScTLR3具有TLRs家族基因的典型结构特征,并能被GCRV诱导表达,推测其在赤眼鳟抗GCRV入侵免疫反应中发挥了重要作用。
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猪附红细胞体MSG1基因的克隆与生物信息学分析
作者:
贾杏林;邹亚文;刘思远;程天印
期刊:
湖南农业大学学报(自然科学版) ,2016年42(5):524-527 ISSN:1007-1032
作者机构:
[贾杏林; 邹亚文; 刘思远; 程天印] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128
关键词:
猪附红细胞体;MSG1基因;生物信息学分析;克隆
摘要:
为研究猪附红细胞体MSG1蛋白质的结构与功能,应用巢氏PCR技术克隆出1 011 bp的猪附红细胞体MSG1基因,构建系统进化树并进行生物信息学分析。系统进化树分析结果显示,猪附红细胞体与小附红细胞体之间的亲缘关系较近。生物信息学分析结果显示,MSG1基因编码336个氨基酸,理论等电点(pI)为6.21,相对分子质量为36 745.8,无信号肽和跨膜区,抗原指数较高,具有较大的免疫原性。MSG1蛋白质的柔韧性区域较多,蛋白质3D结构显示为“X”立体结构,外周区域结构松散。
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氧化应激介导达氟沙星诱导LLC-PK1细胞周期阻滞
作者:
李玉娟;代佳娣;张大生;孙志良;刘兆颖
期刊:
中国抗生素杂志 ,2016年41(5):388-395 ISSN:1001-8689
作者机构:
[李玉娟; 代佳娣; 张大生; 孙志良; 刘兆颖] 湖南农业大学动物医学院, 湖南省兽药工程技术研究中心, 长沙, 410128
关键词:
达氟沙星;氧化应激;肾毒性;细胞周期
摘要:
目的探讨达氟沙星诱导LLC-PK1细胞氧化应激后细胞损伤的分子机制。方法不同浓度的达氟沙星处理LLC-PK1细胞后,通过WST-1法检测细胞增殖抑制情况,DHE、Amplex UltraRed法分别检测超氧阴离子自由基(O_2~(·-))、H_2O_2含量, Rhodamine123法检测线粒体膜电位,流式细胞仪检测分析细胞周期及RT-PCR法检测细胞周期相关基因表达含量的变化。结果达氟沙星呈浓度依赖性的抑制LLC-PK1细胞的增殖、升高细胞内O_2~(·`)、H_2O_2含量、诱导细胞周期阻滞,但线粒体膜电位没有显著性下降。100μmol/L浓度达氟沙星处理LLC-PK1细胞后细胞出现G2期周期阻滞,ROS升高含量在自身抗氧化系统修复范围内,细胞并没有出现明显损伤;而浓度达到400μmol/L时细胞发生氧化应激出现可逆性的G1期细胞阻滞,此时细胞周期素抑制蛋白p53、p21、p27mRNA表达显著升高,LLC-PK1细胞对氧化应激造成的损伤进行修复。结论400μmOl/L浓度范围内的达氟沙星处理LLC-PK1细胞24h所致的氧化应激诱导细胞周期阻滞,细胞损伤在自身修复范围之内并未导致细胞凋亡。
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霉菌毒素对家禽生产性能的影响机制及污染控制
作者:
陈继发;曲湘勇;张佳鑫;彭灿阳;彭豫东
期刊:
动物营养学报 ,2016年28(10):3025-3033 ISSN:1006-267X
作者机构:
湖南农业大学动物科学技术学院, 湖南畜禽安全生产协同创新中心, 长沙, 410128;湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128;[陈继发; 曲湘勇; 彭灿阳; 彭豫东] 湖南农业大学动物科学技术学院, 湖南畜禽安全生产协同创新中心, 长沙, 410128;[张佳鑫] 湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128
关键词:
霉菌毒素;毒性;作用机制;吸附剂;家禽
摘要:
家禽对饲料中霉菌毒素敏感性高,多种霉菌毒素对家禽均具有毒性作用。本文综述了常见霉菌毒素对家禽生长性能、免疫功能和繁殖性能的影响及其机制,同时阐述了几种常见吸附剂对霉菌毒素的脱毒效果,并对霉菌毒素吸附剂的应用前景进行展望。
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猪圆环病毒2型湖南分离株HNLYYA1全基因组的多引物滚环扩增和序列分析
作者:
王占锋;朱哲;湛洋;邓治邦;王爱兵;...
期刊:
中国兽医科学 ,2016年46(4):454-460 ISSN:1673-4696
作者机构:
[王占锋; 朱哲; 湛洋; 邓治邦; 王爱兵; 杨毅; 王乃东] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128
关键词:
猪圆环病毒2型;湖南株;多引物滚环扩增
摘要:
首先采用常规PCR法对7份湖南省某地区猪病料进行猪圆环病毒2型(PCV2)的检测,然后对1份PCV2阳性病料的总DNA进行多引物滚环扩增(MPRCA)反应, 最后利用限制性内切酶(EcoRⅠ 和NcoⅠ)酶切MPRCA产物。结果显示,酶切后的MPRCA产物条带与PCV2基因组或片段的大小一致。将回收的目的条带与Psp72载体连接,转化DH5α 菌,最后对提取的重组质粒进行测序和序列比对。获得的PCV2分离株HNLYYA1提交于GenBank(登录号KJ867555),其全基因组大小为1 767 bp,基因型为PCV2b- 1C。该株PCV2 Cap蛋白与其他毒株进行比对,发现其具有独特的氨基酸突变,NLS区34位组氨酸(H)突变为酪氨酸(Y)、LOOP GH区169位精氨酸(R)突变为甘氨酸(G)、LOOP HI区206位赖氨酸(K)突变为异亮氨酸(I)。本研究揭示了湖南PCV2分离株HNLYYA1的全基因组特征,并为环状病毒的全基因组分离研究提供新的技术途径。
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壳寡糖对脂多糖诱导猪空肠上皮细胞氧化损伤的作用
作者:
肖定福;钟佳;刘进辉;李文平
期刊:
动物营养学报 ,2016年28(7):2090-2095 ISSN:1006-267X
作者机构:
湖南农业大学动物科学技术学院, 长沙, 410128;湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128;[肖定福] 湖南农业大学动物科学技术学院, 长沙, 410128;[钟佳; 刘进辉; 李文平] 湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128
关键词:
壳寡糖;脂多糖;猪空肠上皮细胞;氧化应激;抗氧化作用
摘要:
本试验旨在通过脂多糖(LPS)诱导猪空肠上皮细胞(IPEC-J2)来建立氧化应激模型,探讨壳寡糖(COS)的抗氧化作用效果。采用噻唑蓝(MTT)法检测LPS和COS对IPEC-J2作用12、24、48 h后细胞增殖活性的变化;选择适宜浓度LPS(1.0 μg /mL)和COS(200 μg /mL)作用于IPEC-J2,分为对照组、LPS组、COS组、LPS+COS组。采用Western Blot法检测核因子E2相关因子2(Nrf2) 、血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白的表达;试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD) 、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)的含量。结果表明: 1.0 μg /mL的LPS对IPEC-J2作用24 h,细胞增殖的抑制率为41.6%,为造模的最适浓度和作用时间; COS在一定浓度范围内对IPEC-J2有增殖作用,其浓度为200 μg /mL时效果最佳,作用时间为24 h时,细胞增殖率达到126.3%。LPS+COS组较对照组的SOD、CAT活性和MDA含量差异不显著(P>0.05), Nrf2和HO-1蛋白相对表达量显著升高(P<0.05); LPS +COS组较LPS组的Nrf2蛋白相对表达量显著升高(P < 0.05), HO-1有升高趋势,但差异不显著(P > 0.05), SOD、CAT活性显著升高(P < 0.05), MDA含量显著降低(P<0.05) 。由此可见,LPS诱导IPEC-J2氧化应激,而COS可进一步促进Nrf2和HO-1蛋白的高表达,并提高抗氧化酶的活性,降低氧化产物含量,从而增强细胞对氧化应激的抵抗力,起到保护作用。
语种:
中文
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年龄≥60岁的房间隔缺损患者的介入封堵治疗
作者:
孙正旭;杨荣;孔祥清;盛燕辉;雍永宏;...
期刊:
南京医科大学学报(自然科学版) ,2016年36(5):593-596 ISSN:1007-4368
作者机构:
湖南农业大学食品科学技术学院;益阳市赫山区沧水铺人民医院;湖南农业大学动物医学院;湖南农业大学动物科学技术学院;[孙正旭; 杨荣; 孔祥清; 盛燕辉; 雍永宏; 张浩; 张海锋; 孙伟; 周艳丽] 江苏省人民医院/南京医科大学第一附属医院
关键词:
年龄;房间隔缺损;介入封堵
摘要:
目的:研究米糠植物甾醇对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholicsteatohepatitis,NASH)大鼠的干预治疗作用。方法:实验选用50只健康SD雄性大鼠,随机分为正常对照组、NASH模型组和米糠甾醇低、中、高3个剂量组(65、130、195mg/kg)。高脂饲料饲喂造模,各实验组同时进行米糠甾醇溶液灌胃干预。13周后观察各组大鼠肝组织病理学特点,测定血清中血脂总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇含量和谷丙转氨酶、谷草转氨酶、一氧化氮合酶和超氧化物歧化酶活性,并比较各组肝脏指数和脾脏指数。结果:肝脏组织切片观察到NASH模型组有明显的肝细胞脂肪变性和炎症聚集浸润,米糠甾醇各治疗组肝组织病变呈现不同程度减轻。NASH模型组血清高密度脂蛋白胆固醇含量、超氧化物歧化酶、一氧化氮合酶、谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性与正常对照组相比,均表现出明显异常;米糠甾醇各剂量组与NASH模型组比较,血清谷丙转氨酶显著降低(P<0.001)、谷草转氨酶/谷丙转氨酶比值显著升高(P<0.01);低剂量组血清超氧化物歧化酶(P<0.05)和一氧化氮合酶(P<0.001)显著降低;中剂量组血清高密度脂蛋白胆固醇显著升高(P<0.05)。结论:米糠甾醇对大鼠非酒精性脂肪性肝炎有预防与治疗作用。
语种:
中文
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苄基异喹啉类生物碱生物合成与代谢工程研究进展
作者:
刘金凤;黄鹏;卿志星;柳亦松;唐其;...
期刊:
基因组学与应用生物学 ,2016年35(8):2194-2200 ISSN:1674-568X
作者机构:
湖南农业大学园艺园林学院, 兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心, 长沙, 410128;湖南中医药大学药学院, 长沙, 410128;湖南农业大学, 兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心, 长沙, 410128;[刘金凤; 黄鹏; 唐其; 曾建国] 湖南农业大学园艺园林学院, 兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心, 长沙, 410128;[卿志星] 湖南中医药大学药学院, 长沙, 410128
关键词:
苄基异喹啉类生物碱;生物合成;代谢工程
摘要:
苄基异喹啉类生物碱(benzylisoquinoline alkaloids, BIAs)是一类具有重要研究及药用价值的次生代谢产物,目前该类生物碱主要来自于植物。但是BIAs在植物中的含量低、且大部分含有BIAs的植物具有生长周期长、受环境影响大、采集困难和难以大规模种植等问题。为解决这些问题,许多研究人员致力于解析BIAs生物合成途径并利用植物与微生物代谢工程技术提高BIAs的含量与开辟新药源。本研究将从BIAs类型与生物合成途径以及微生物与植物代谢工程几个方面对BIAs的生物合成与代谢工程研究进展进行综述,有利于BIAs的深入研究。
语种:
中文
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γ-谷维素对过氧化氢诱导氧化损伤L02细胞的增殖和保护作用
作者:
蒋维维;易金娥;谭柱良
期刊:
食品科学 ,2016年37(7):187-191 ISSN:1002-6630
通讯作者:
Yi, Jine(yijine@gmail.com)
作者机构:
[易金娥; 蒋维维; 谭柱良] College of Veterinary Medicine, Hunan Agricultural University, Changsha, 410128, China;[易金娥] Hunan Co-innovation Center Production Safety, Changsha, 410128, China
关键词:
γ-谷维素;氧化损伤;L02细胞
摘要:
目的:观察γ-谷维素对过氧化氢诱导人肝细胞(L02)氧化损伤的增殖和保护作用的影响。方法:建立过氧化氢氧化损伤模型,采用不同浓度的γ-谷维素对L02细胞进行处理,检测L02细胞增殖率、丙二醛和微量谷胱甘肽含量、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力及活性氧水平的变化。结果:γ-谷维素浓度在0.1~0.4 mmol/L对H_2O_2引起的细胞损伤具有修复作用,同时降低丙二醛含量和活性氧水平,提高超氧化物歧化酶和过氧化氢活性以及谷胱甘肽含量,且呈量效关系。结论:L02细胞经0.1~0.4 mmol/L γ-谷维素预处理后,可以缓解H_2O_2造成的氧化损伤,维持正常的生理形态。
语种:
中文
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桦木酸对Dex致小鼠氧化损伤的保护作用
作者:
朱若岑;夏伟;谭柱良;易金娥
期刊:
中国兽医学报 ,2016年36(2):305-309 ISSN:1005-4545
作者机构:
[朱若岑; 夏伟; 谭柱良; 易金娥] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128
关键词:
桦木酸;地塞米松;细胞活力;ROS水平;抗氧化能力
摘要:
为了研究桦木酸(betulinic acid,BA)对地塞米松(dexamethasone,Dex)致氧化损伤的保护作用。将35只健康雄性KM小鼠随机分为5组,即对照组、Dex组、BA低、中、高剂量(0.25、0.5、1mg/kg)+Dex组。对照组和Dex组灌服1%的可溶性淀粉,其余各组灌服混悬于可溶性淀粉中不同剂量的BA,1次/d,连续14d后,除对照组注射生理盐水外,其余4组均腹腔注射地塞米松(25 mg/kg)诱导氧化应激模型。15h后,处死小鼠,收集淋巴器官和肝脏。检测小鼠淋巴细胞的活性以及活性氧(ROS)水平,肝脏、脾脏和胸腺的超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及丙二醛(MDA)含量。结果显示,BA预处理后,能显著降低Dex诱导氧化损伤小鼠ROS水平和MDA含量,提高脾淋巴细胞和胸腺淋巴细胞的活性,增强小鼠SOD和GSH-Px活性,且呈量效关系。表明BA能加速细胞清除活性氧自由基,增强小鼠抵抗氧化损伤的能力,对Dex诱导的氧化损伤有一定的保护作用。
语种:
中文
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