作者： 宋金秋;李晖;谭磊;刘伟

期刊： 中国预防兽医学报,2017年39(7):594-596 ISSN：1008-0589

作者机构： 湘西民族职业技术学院, 湖南, 湘西, 416000;湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128;[宋金秋; 李晖] 湘西民族职业技术学院, 湖南, 湘西, 416000;[谭磊; 刘伟] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128

关键词： 褐黄血蜱;cox1基因;序列分析;种系发育关系

摘要： 为分析山羊褐黄血蜱分离株的线粒体(mtDNA)部分序列(pcox1)的遗传变异情况,并利用cox1序列分析山羊褐黄血蜱与其它蜱的种群遗传关系,本研究利用PCR扩增山羊褐黄血蜱的部分cox1片段,并对其进行测序分析。结果显示16株山羊褐黄血蜱分离株的cox1序列长度均为800 bp左右,且分离株与基因库中褐黄血蜱位于同一分支,与其它蜱类得到了很好的鉴别。本研究表明pcox1序列种内相对保守,种间差异较大,可作为山羊褐黄血蜱的种间遗传变异研究的分子遗传标记。

语种： 中文

作者： 伍小松;罗艳辉;余兴龙;贺建华;赵墩

期刊： 农业生物技术学报,2017年25(10):1682-1688 ISSN：1674-7968

作者机构： 湖南农业大学动物科学技术学院, 长沙, 410128;湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128;[伍小松; 罗艳辉; 贺建华] 湖南农业大学动物科学技术学院, 长沙, 410128;[余兴龙; 赵墩] 湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128

关键词： 多杀性巴氏杆菌(Pm);重组甲硫氨酸转运体Q(rMetQ);免疫原性;免疫保护力;小鼠

摘要： 猪多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocidain, Pm)感染可引起猪(Sus scrofa)产生猪肺疫、猪出血性败血症和猪萎缩性鼻炎等。目前应用的灭活全菌苗交叉保护效果差且免疫保护期短,重组疫苗尚不能提供高的保护率。为研究猪多杀性巴氏杆菌重组甲硫氨酸转运体Q(recombinant methionine transporter Q, rMetQ)的免疫保护性,本研究根据GenBank中登录的Pm metQ基因序列,根据去除影响表达的长片段疏水区的相应核苷酸序列设计引物对,以Pm的基因组为模板PCR扩增metQ基因,测序进行生物信息学分析。结果表明,猪Pm metQ基因片段含768 bp核苷酸,编码255个氨基酸的蛋白质,其理论分子量为28.14 kD,是与细菌的毒性有关的胞外结合蛋白,不同血清型的该蛋白同源型达99%以上。将Pm metQ亚克隆到pET-28a(+)构建重组质粒pET-metQ并转化至大肠杆菌(Escherichia coli) BL21 (DE3),用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside, IPTG)诱导表达Pm rMetQ,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE)检测,结果表明,在28 kD处出现特异性条带。动物保护实验采用昆明小鼠(Mus musculus)进行,免疫球蛋白G (immunoglobulin G, IgG)抗体滴度采用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immuno sorbent assay, ELISA)检测。结果表明,3次免疫后第14天,铝佐剂+rMetQ组小鼠血清中的IgG抗体水平显著升高,明显高于对照组和低剂量组,对照组和低剂量组小鼠攻毒后3 d存活率为20%,7 d后全部死亡。铝佐剂+30 μg rMetQ免疫组,10只免疫组小鼠3 d后,6只死亡,存活率为40%;7 d后,又有3只死亡,存活率为10%。铝佐剂+50 μg rMetQ组3 d后存活率达80%,7 d后存活率40%。死亡小鼠剖检发现肝脏为主要病变器官,呈现有不同程度的出血点甚至坏死。可见,Pm rMetQ皮下免疫注射可诱导小鼠产生免疫应答和较高的抗攻击感染的免疫保护力。该研究为进一步筛选猪Pm分子疫苗积累了资料。

语种： 中文

作者： 向卫军;杨涛涛;李润成;余兴龙

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2017年43(2):195-199 ISSN：1007-1032

作者机构： [向卫军; 杨涛涛; 李润成; 余兴龙] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128

关键词： 猪场;蚊子;基因I 型;乙型脑炎病毒;湖南汨罗

摘要： 为探寻湖南汨罗地区猪场蚊子携带乙型脑炎病毒(JEV)的情况,对该地区3个猪场蚊子开展JEV的病原学调查研究。从该地区3个种猪场采集约3 900只蚊子,用RT–PCR方法扩增JEV NS5基因,结果从40份样品中检出17份样品呈阳性。将阳性样品研磨液接种BHK–21细胞分离病毒,经3次传代后获得了1株JEV,将新分离株命名为HNML1株。根据JEV的E基因序列设计1对引物,用RT–PCR方法扩增HNML1株的E基因,并进行序列测定和同源性分析,结果表明,该E基因的核苷酸序列与减毒活疫苗株SA14–14–2相应序列的同源性为86.9%;该E基因的氨基酸序列与减毒活疫苗株SA14–14–2相应序列的同源性为97.0%,二者存在15个氨基酸的差异(其中包括8个与关键毒力相关的氨基酸)。基因同源性分析结果表明,HNML1株为基因I型 JEV毒株。

语种： 中文

作者： 彭亚;杨青;邓植文;董思远;刘志伟

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2017年43(4):427-432 ISSN：1007-1032

作者机构： 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128;上海海洋大学水产与生命学院, 上海, 201306;[彭亚; 杨青] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128;[邓植文; 董思远; 刘志伟] 上海海洋大学水产与生命学院, 上海, 201306

关键词： 玻璃扯旗鱼;性腺发育;性别分化;性别特征

摘要： 应用形态学、解剖学及组织学方法对玻璃扯旗鱼的性别特征及其幼鱼性别分化基本过程进行研究。结果显示:在6月龄玻璃扯旗雌鱼卵巢中能观察到各时相的卵母细胞,在雄鱼精小管管腔内有大量精子;4月龄以上玻璃扯旗雌鱼的腹部隆起,并有淡黄色颗粒状组织,而雄鱼无类似结构;100日龄以上雌鱼的臀鳍有钩状小齿,但2月龄前的幼鱼无该组织。5~50日龄幼鱼性腺发育状态显示:10日龄以下幼鱼的体内无分化明显的生殖腺; 15日龄幼鱼体内有生殖包囊,且15日龄之前仅在腹腔一侧可观察到性腺组织,而25日龄幼鱼的腹腔两侧均有对称分布的类卵巢结构;至30日龄时,部分幼鱼可观察到有棒状精巢,性腺开始分化。本研究中探明了玻璃扯旗鱼性别分化及性腺发育的关键时间节点,该结果可为进一步研究其分子调控机制提供参考。

语种： 中文

作者： 伍小松;余兴龙;贺建华;赵墩

期刊： 中国兽医科学,2017年47(5):630-635 ISSN：1673-4696

作者机构： 湖南农业大学动物科学技术学院, 湖南, 长沙, 410128;湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128;[伍小松; 贺建华] 湖南农业大学动物科学技术学院, 湖南, 长沙, 410128;[余兴龙; 赵墩] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128

关键词： 多杀性巴氏杆菌;ibeB基因;免疫原性;免疫保护力;小鼠

摘要： 为了研究猪多杀性巴氏杆菌IbeB重组蛋白(rIbeB)的免疫保护性,根据G enBank中登录的多杀性巴氏杆菌ibeB基因序列设计1对引物扩增ibeB基因,并重组至pET-28a(+)构建重组表达质粒pET- ibeB,转化到大肠杆菌BL21 (D E3),经IPTG诱导获得rIbeB。生物信息学分析表明,猪多杀性巴氏杆菌ibeB基因长1 392 bp,编码蛋白质含463个氨基酸。该蛋白质的理论分子质量为51.98 ku,具有2个外排蛋白结构域,属外膜外排蛋白超家族。蛋白序列比对发现,不同血清型的多杀性巴氏杆菌IbeB的同源性达99%以上。rIbeB诱导小鼠的免疫保护结果表明,第3次免疫后第14天小鼠血清中IgG抗体水平显著升高,明显高于佐剂对照组。攻毒后,对照组小鼠第3天的存活率为20%,7 d后全部死亡;免疫组第3天的存活率达70%,第7天的存活率为40%。结果表明,rIbeB蛋白具有很好的免疫原性,可诱导小鼠产生部分免疫保护力。

语种： 中文

作者： 屈泰龙;严美君;葛猛;李润成;张家祥;...

期刊： 中国兽医科学,2017年47(11):1378-1384 ISSN：1673-4696

作者机构： [屈泰龙; 严美君; 葛猛; 李润成; 张家祥; 余兴龙] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128

关键词： 分型检测;分子流行病学调查;遗传分析

摘要： 为建立可鉴定PCV2b和PCV2d基因亚型的PCR方法,通过分析GenBank内PCV2 ORF2基因序列,设计了可分别扩增ORF2基因和鉴别PCV2b、PCV2d的引物,并建立PCR方法。应用PCV2b和PCV2d引物扩增108份PCV2阳性样本,选择11份PCV2b和19份PCV2d单一阳性样本扩增ORF2基因序列,并用于遗传进化分析。结果显示,PCV2b和PCV2d引物扩增的敏感性较好,PCV2b和PCV2d最低可扩增基因拷贝数分别为19 copies/ L和80 copies/ L。108份PCV2阳性DNA中PCV2b阳性率为42.5%,PCV2d阳性率为69.4%,混合感染阳性率为12%。30条ORF2序列的遗传进化分析结果显示,11条为PCV2b基因亚型,19条为PCV2d基因亚型,遗传进化分析结果与PCR结果一致。本试验建立了一种鉴别PCV2b和 PCV2d的PCR方法,可用于PCV2流行病学的调查。

语种： 中文

作者： 马攀;方超;李润成;胡玉立;赵墩;...

期刊： 中国预防兽医学报,2017年39(2):152-155 ISSN：1008-0589

作者机构： 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128;中岸生物药业有限公司, 湖南, 长沙, 410100;[马攀; 方超; 李润成; 胡玉立; 余兴龙] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128;[赵墩] 中岸生物药业有限公司, 湖南, 长沙, 410100

关键词： 多杀性巴氏杆菌;保护性抗原;分子流行病学;亚单位疫苗

摘要： 为探索多杀性巴氏杆菌(Pm)的保护性抗原基因在A与D血清型之间分布规律及其保守性,本研究通过对湖南地区分离的92株(A型:50株;D型:42株)猪源Pm的ompA、ompH、omp87、plpE、plpP、ptfA、fhab2、vacJ和tbpA等9种保护性抗原基因进行PCR检测。结果显示:在以上9种基因中ompA、ompH、omp87以及ptfA的检出率最高,均为100%;vacJ和plpP基因的检出率分别为91%和66%。而fhab2和plpE基因仅在A型菌株中检出,检出率分别为42%和40%。选取部分菌株,对其4种检出率为100%的基因进行测序显示,omp87的同源性介于99.1%~100%;ptfA的同源性介于97.2%~100%;ompA的同源性介于91.2%~100%;ompH的同源性介于84.6%~100%。此外,经抗原表位预测,ompA和ompH基因在部分抗原表位区域存在明显差异。本研究发现omp87和ptfA两个基因存在于本研究分离的92株猪源Pm,并且相当保守,该结果为巴氏杆菌基因工程亚单位疫苗开发过程中保护性抗原的选择提供了依据。

语种： 中文

作者： 伍小松;罗艳辉;余兴龙;贺建华;赵墩

期刊： 中国预防兽医学报,2017年39(9):746-749 ISSN：1008-0589

作者机构： 湖南农业大学动物科学技术学院, 湖南, 长沙, 410128;湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128;[伍小松; 罗艳辉; 贺建华] 湖南农业大学动物科学技术学院, 湖南, 长沙, 410128;[余兴龙; 赵墩] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128

关键词： 多杀性巴氏杆菌;重组抗菌肽ABC转运体ATP结合蛋白;免疫保护力;小鼠

摘要： 为研究猪多杀性巴氏杆菌(Pm)重组抗菌肽ABC转运体ATP结合蛋白的免疫保护性,本研究采用 PCR方法扩增该蛋白基因,并将其克隆于pET-28a(+)中构建重组质粒pET-ABP,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达。分析表明,猪Pm抗菌肽ABC转运体ATP结合蛋白基因为696 bp,编码231 aa,不同血清型的该蛋白基因推导氨基酸序列同源性达99%以上。表达的蛋白分子量约为27 ku。动物实验表明,实验组小鼠三免后第14 d其血清IgG抗体水平显著升高,明显高于对照组。对照组攻毒后3 d存活率为20%, 7d全部死亡;免疫组小鼠攻毒后3 d存活率为80%, 7d存活率为40%。该研究为进一步研制Pm的混合疫苗奠定了基础。

语种： 中文

作者： 刘金凤;黄鹏;卿志星;刘秀斌;柳亦松;...

期刊： 中草药,2017年48(3):559-566 ISSN：0253-2670

通讯作者： Zeng, J.-G.

作者机构： Horticulture & Landscape College of Hunan Agricultural University, Changsha, 410128, China;National and Local Union Engineering Research Center for the Veterinary Herbal Medicine Resources and Initiative, Hunan Agricultural University, Changsha, 410128, China;Veterinary Faculty of Hunan Agricultural University, Changsha, 410128, China;[卿志星] Pharmacy College of Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, 410128, China;[刘秀斌; 刘金凤; 唐其; 黄鹏] Horticulture & Landscape College of Hunan Agricultural University, Changsha, 410128, China, National and Local Union Engineering Research Center for the Veterinary Herbal Medicine Resources and Initiative, Hunan Agricultural University, Changsha, 410128, China

通讯机构： [Zeng, J.-G.] H;Horticulture & Landscape College of Hunan Agricultural University, Changsha, China

关键词： 次生代谢;基因功能验证;酵母前体饲喂;PsP6H基因;PsCPR基因

摘要： 目的筛选效率最高的酵母前体饲喂方式,为在酵母中进行基因功能验证提供方法学指导。方法首先构建含PsP6H基因和PsCPR基因重组酵母工程菌,然后用4种不同的方法进行前体饲喂,最后质谱检测下游产物二氢血根碱来确定最优方案。结果最优的前体饲喂方法是将酵母工程菌经过半乳糖诱导31 h后在pH 8.0的Tris EDTA溶液中孵育24 h。结论不同的前体饲喂方式对酵母工程菌下游产物产生不同影响,经优化后的酵母前体饲喂方法较稳定,重复性好。

语种： 中文

作者： 段德勇;汪雅琴;程天印

期刊： 畜牧兽医学报,2017年48(11):2181-2188 ISSN：0366-6964

作者机构： [段德勇; 汪雅琴; 程天印] 湖南农业大学动物医学院, 湖南畜禽安全生产协同创新中心, 长沙, 410128

关键词： 绵羊虱蝇;形态学;分子生物学鉴定

摘要： 绵羊虱蝇是绵羊体表常见的吸血寄生虫,对其形态学特征的研究较少。为提供能够快速、准确辨识此寄生虫的依据,本研究通过超景深三维显微系统和扫描电镜对绵羊虱蝇的形态特点进行了观察,并通过分析18S rRNA基因序列进行了分子学鉴定。结果显示,绵羊虱蝇翅完全退化,无平衡棒;头部短小阔扁,无单眼,复眼小,触角极短,刺吸式口器;胸部不分节,有3对足,足末端有发达的爪,4对气门;腹部不分节,雌虫腹部大而圆,末端凹陷;雄虫腹部小,末端凸出;周身布满刚毛。18S rRNA测序结果与GenBank中已公布序列相似度为99.59%。结果表明,本研究从甘肃酒泉绵羊体表采集的寄生虫为绵羊虱蝇,且此寄生虫有较易辨识的形态学特征。

语种： 中文

作者： 王吉;严思思;谢文;周慧娟;黄海滨;...

期刊： 食品科学,2017年38(5):257-261 ISSN：1002-6630

通讯作者： Wen, Lixin(sfwlx8015@sina.com)

作者机构： [刘必英; 严思思; 周慧娟; 文利新; 王吉; 冯春红; 谢文; 黄海滨] College of Veterinary Medicine, Hunan Agricultural University, Changsha, 410128, China;[刘必英; 严思思; 周慧娟; 文利新; 王吉; 谢文; 黄海滨] Hunan Synthetic Innovation Center for Livestock Production Safety, Changsha, 410128, China

关键词： 玉米油;猪油;调和油;血脂;肝功能;抗氧化

摘要： 目的:模拟中国人饮食习惯,以小鼠为实验对象,探讨不同玉米油与猪油1:1调和油(后称为调和油)摄入量对其血脂含量、肝功能以及肝脏抗氧化能力的影响。方法:将24只8周龄雄性昆明小鼠随机平均分为空白组、推荐摄入量组和实际摄入量组,每组分别在基础日粮中添加0%、3.8%和6.5% (质量分数)的调和油,饲喂8周后称小鼠体质量,解剖,取外周血清检测血脂和肝功能指标,取完整肝脏测量肝指数、进行组织形态观测和组织切片镜检,对肝脏进行组织匀浆检测氧化损伤指标。结果:小鼠的肝指数与饲料中所添加的调和油剂量呈正相关,空白组小鼠肝脏碱性磷酸酶、谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性均明显高于摄入油脂组,推荐摄入量组的小鼠肝脏总抗氧化能力显著高于空白组和实际摄入量组,空白组的肝脏氧化损伤程度显著高于推荐摄入量组和实际摄入量组。结论:不食用油脂对小鼠肝功能有一定的影响;推荐摄入量的玉米油与猪油1:1调和油能提高小鼠肝脏抗氧化能力,降低氧化损伤。

语种： 中文

作者： 伍小松;余兴龙;贺建华;赵墩

期刊： 中国兽医科学,2017年47(5):630-635 ISSN：1673-4696

作者机构： 湖南农业大学动物科学技术学院,湖南长沙,410128;湖南农业大学动物医学院,湖南长沙,410128;[伍小松; 贺建华] 湖南农业大学动物科学技术学院, 湖南, 长沙, 410128;[余兴龙; 赵墩] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128

关键词： 多杀性巴氏杆菌;ibeB基因;免疫原性;免疫保护力;小鼠

摘要： 为了研究猪多杀性巴氏杆菌IbeB重组蛋白(rIbeB)的免疫保护性,根据G enBank中登录的多杀性巴氏杆菌ibeB基因序列设计1对引物扩增ibeB基因,并重组至pET-28a(+)构建重组表达质粒pET- ibeB,转化到大肠杆菌BL21 (D E3),经IPTG诱导获得rIbeB。生物信息学分析表明,猪多杀性巴氏杆菌ibeB基因长1 392 bp,编码蛋白质含463个氨基酸。该蛋白质的理论分子质量为51.98 ku,具有2个外排蛋白结构域,属外膜外排蛋白超家族。蛋白序列比对发现,不同血清型的多杀性巴氏杆菌IbeB的同源性达99%以上。rIbeB诱导小鼠的免疫保护结果表明,第3次免疫后第14天小鼠血清中IgG抗体水平显著升高,明显高于佐剂对照组。攻毒后,对照组小鼠第3天的存活率为20%,7 d后全部死亡;免疫组第3天的存活率达70%,第7天的存活率为40%。结果表明,rIbeB蛋白具有很好的免疫原性,可诱导小鼠产生部分免疫保护力。

语种： 中文

作者： 谭磊;王爱兵;周湘;刘雪松;孔小鲜;...

期刊： 中国兽医学报,2017年37(10):1924-1927 ISSN：1005-4545

作者机构： 湖南农业大学动物医学学院, 湖南, 长沙, 410128;湖南生物机电职业技术学院, 湖南, 长沙, 410127;[谭磊; 王爱兵; 周湘; 孔小鲜; 刘伟] 湖南农业大学动物医学学院, 湖南, 长沙, 410128;[刘雪松] 湖南生物机电职业技术学院, 湖南, 长沙, 410127

会议名称： 第五届全国人畜共患病学术研讨会

会议时间： 2017-04-21

会议地点： 中国江苏南京

关键词： 黑斑蛙裂头蚴;核糖体DNA;ITS基因;序列分析;种系发育关系

摘要： 为了研究黑斑蛙裂头蚴种系发育关系,本研究利用聚合酶链式反应(PCR)对黑斑蛙裂头蚴湖南株核糖体DNA内转录间隔区(ITS)进行扩增与测序,应用ClustalX 2.0程序对序列进行比对,再利用Mega4.0程序进行NJ法绘制种系发育树,研究黑斑蛙裂头蚴与其他带科绦虫的种群遗传关系。结果显示,湖南省不同地区10个黑斑蛙裂头蚴分离株ITS序列基本一致,为1 362~1 382bp,各分离株之间ITS-1和ITS-2序列的同源性均高于95.4%和94.6%;与基因库中其他带科绦虫ITS-1和ITS-2序列的同源性均低于59.5%和56.9%。通过建立NJ系统发育树,湖南省黑斑蛙裂头蚴分离株与欧猬迭宫绦虫位于同一大分支,得到了很好的鉴定。黑斑蛙ITS序列在种内相对保守,而种间差异较大,因此ITS序列可以作为分子标记研究黑斑蛙裂头蚴种系遗传变异,从而为黑斑蛙裂头蚴的分子流行病学和群体遗传研究奠定基础。

语种： 中文

作者： 李佳杭;李宝杰;张頔;段德勇;任显东;...

期刊： 中国兽医科学,2017年47(11):1450-1456 ISSN：1673-4696

作者机构： [李佳杭; 李宝杰; 张頔; 段德勇; 任显东; 陈海涛] 湖南农业大学动物医学院, 湖南畜禽安全生产协同创新中心, 湖南, 长沙, 410128

关键词： 猪;支气管;肺动脉;分支;伴行

摘要： 本试验旨在探究猪支气管、肺动脉的分支及伴行特点,为诊断和治疗呼吸道、心肺疾病提供形态学基础。通过ABS（丙烯腈-丁二烯-苯乙烯）铸型技术,对30个猪肺脏进行支气管、肺动脉单独和联合灌注。结果显示,猪支气管树整体呈倒＂Y＂型,右肺支气管树由右尖叶支气管、心叶支气管、副叶支气管和右隔叶支气管及其分支构成;左肺支气管树由左尖叶支气管和左隔叶支气管及其分支构成。左、右肺动脉分支与支气管各段分支相对应。结果表明,猪支气管分支与肺脏分叶相对应,肺动脉分支与支气管分支紧密伴行,右肺的通气和供血系统强于左肺。

语种： 中文

作者： 胡佩佩;杨婷婷;黄复深;唐昭山;张宇航

期刊： 农业生物技术学报,2017年25(2):299-306 ISSN：1674-7968

作者机构： [胡佩佩; 杨婷婷; 黄复深; 唐昭山; 张宇航] 湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128

关键词： 胸膜肺炎放线杆菌(APP);重组外膜蛋白2(rOmpP2);免疫保护效果

摘要： 猪传染性胸膜肺炎(porcine contagious pleuropneumoni, PCP)是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae, APP)感染猪(Sus scrofa)引起的一种接触性呼吸道疾病,是世界养猪业的五大疫病之一。为检测猪APP重组外膜蛋白P2(recombinant outer membrane protein P2, rOmpP2)的免疫保护作用,本研究根据GenBank中已报道的APP OmpP2基因序列设计引物对,以APP的基因组为模板PCR扩增OmpP2,测序后在NCBI登录(登录号: KM357903),并进行生物信息学分析,该基因由1 131 bp组成,编码一个含376个氨基酸的蛋白质,为一外膜孔道蛋白,该编码蛋白在APP不同的血清型之间具有很高同源性。将rOmpP2亚克隆至pET32a(+)载体,转化大肠杆菌(Escherichia coli) BL21(DE3),用异丙基- β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl β-D-1- thiogalactopyranoside, IPTG)诱导表达APP rOmpP2蛋白,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE)检测以及Western blot鉴定,结果表明,在42 kD处出现特异性条带,重组菌表达的rOmpP2能够被相应的阳性血清识别。动物保护实验采用BALB/c小鼠(Mus musculus)进行,免疫球蛋白G(immunoglobulin G, IgG)抗体滴度采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immuno sorbent assay, ELISA)检测。结果表明,铝佐剂+50 μg rOmpP2、铝佐剂+30 μg rOmP2及铝佐剂+10 μg rOmpP2组中,小鼠的存活率分别为50%,30%和10%,佐剂组和生理盐水对照组全部死亡,存活小鼠精神状况慢慢恢复正常,并采食。rOmpP2皮下免疫注射可诱导小鼠产生免疫应答和较高的抗攻击感染的免疫保护力。研究结果为进一步筛选猪传染性胸膜肺炎分子疫苗提供了基础资料。

语种： 中文

作者： 黄鹏;刘金凤;卿志星;柳亦松;唐其;...

期刊： 分子植物育种,2017年15(2):454-459 ISSN：1672-416X

作者机构： 湖南农业大学园艺园林学院, 兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心, 长沙, 410128;湖南中医药大学药学院, 长沙, 410208;湖南农业大学, 兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心, 长沙, 410128;[黄鹏; 刘金凤; 唐其; 曾建国] 湖南农业大学园艺园林学院, 兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心, 长沙, 410128;[卿志星] 湖南中医药大学药学院, 长沙, 410208

关键词： 博落回;去甲乌药碱合成酶;实时定量表达

摘要： 苄基异喹啉类生物碱（BIAs）是一类具有重要研究及药用价值的次生代谢产物,目前该类生物碱主要来自于植物。去甲乌药碱合成酶（NCS）参与BIAs的合成过程并发挥重要作用。为研究该基因在博落回BIAs合成过程中的作用,通过将其他物种的NCS基因序列在博落回转录组数据库中进行比对筛选到1个博落回NCS候选基因并对该序列进行生物信息学分析。经过克隆该序列中ORF区并用荧光定量PCR发现该基因的组织特异性表达规律与BIAs代谢含量相符。该研究对下一步分析该基因功能、阐明博落回NCS基因的合成机制和分子育种以及代谢工程开发新药源等方面具有重要意义。

语种： 中文

作者： 湛洋;王东亮;王乃东;蒋一凡;黄坤;...

期刊： 畜牧兽医学报,2017年48(6):1076-1084 ISSN：0366-6964

作者机构： 湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 北京, 100193;南京农业大学动物医学院, 南京, 210095;[湛洋; 王东亮; 王乃东; 蒋一凡; 黄坤; 杨毅] 湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128;[崔尚金] 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 北京, 100193

关键词： 猪圆环病毒3型;皮炎肾病综合征;巢式PCR;核衣壳蛋白质

摘要： 近期报道在美国多个州的养猪场发现了一种新型的猪圆环病毒3型毒株(porcine circovirus 3,PCV3)。为了确定PCV3是否已经在我国南方部分省份的猪场中广泛存在,并对目前PCV2疫苗是否对PCV3感染具有交叉保护作用作出科学预测,笔者对我国南方几个省份疑似猪皮炎肾病综合征的病猪组织样品进行PCV3巢式PCR检测及其核衣壳蛋白质(capsid protein,Cap)结构的PyMol和抗原表位服务器在线模拟分析。结果首次在这些病料中检测到PCV3的存在,部分病料表现为PCV2和PCV3共感染的特性。对其Cap结构及抗原性分析发现, PCV2和PCV3表现出很大的差异。因此,推测PCV2和PCV3不具有交叉免疫保护的特性,新的疫苗研究和开发,对于将来控制PCV3流行是必要的。

语种： 中文

作者： 方超;李润成;魏榕;王锐;胡玉立;...

期刊： 中国预防兽医学报,2017年39(3):210-214 ISSN：1008-0589

作者机构： [方超; 李润成; 魏榕; 王锐; 胡玉立; 黎满香; 张磊; 余兴龙] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128

关键词： 多杀性巴氏杆菌;荚膜血清F型;分离鉴定;毒力基因;致病性

摘要： 为调查多杀性巴氏杆菌(P.multocida)在湖南猪群中的流行情况,本实验室于2015年6月~2016年3月在湖南大型屠宰场采集猪肺脏222份和猪扁桃体180份临床样品,采用血琼脂培养和PCR方法进行P.multocida的分离鉴定,得到4株F型P.multocida。对分离的4株F型P.multocida进行毒力基因检测以及小鼠的致病性研究,结果显示4株菌均含有 ptfA、pthA、fimA、 sodA、 sodC、ompA、 ompH、oma87、plpB、 exbB、exbD、tonB、hgbB、Fur、 nanH、 hsf-1和 hsf-2毒力基因,但 tadD、toxA、 hgbA、 nanB. pmHAS、 tbpA毒力基因均为阴性;4株菌致病性试验结果显示,感染小鼠的剂量分别为4 cfu/只、5 cfu/只、11 cfu/只和17 cfu/只时可导致小鼠在60 h内全部死亡,表明这4株茵对小鼠有强致病力。病理切片显示,感染小鼠有明显的肺泡充血、脾淋巴细胞凋亡、肾小管和肾小球萎缩等病理变化。本实验首次在湖南地区分离到猪源荚膜血清F型P.multocida,并进行了较为详细的生物学特性研究,为国内P.multocida的流行情况和生猪多杀性巴氏杆菌病的防控补充了参考资料。

语种： 中文

作者： 蔡杰;王宇;伍勇;孙志良;李元义;...

期刊： 中国兽医学报,2017年37(3):523-529 ISSN：1005-4545

作者机构： 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128;湖南农业大学动物医学院, 国家植物功能成分利用工程技术研究中心, 湖南, 长沙, 410128;湖南农业大学动物医学院, 国家植物功能成分利用工程技术研究中心;[孙志良; 陈小军] 湖南省兽药工程中心, 湖南, 长沙, 410128;[蔡杰; 王宇; 李元义] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128

关键词： 高脂血症;Angptl3-LPL信号通路

摘要： 本研究旨在探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的降脂作用与Angptl3-LPL信号通路之间的关系。通过高脂饲料喂养建立高脂血症大鼠动物模型,将正常大鼠按体质量和体脂水平随机分为正常对照组、高脂模型组、 EGCG高剂量组(EGCG-H,30 mg·kg~(-1)·d~(-1))、EGCG低剂量组(EGCG-L、15 mg·kg~(-1)·d~(-1))、T0901317组、 EGCG-T0901317组(EGCG,30 mg·kg~(-1)·d~(-1))。连续灌胃8周后,用生化法检测血清中TG、TC、LDL-C含量, qPCR法检测脂肪组织中脂蛋白脂肪酶(LPL)mRNA和肝组织中Angptl3 mRNA相对表达量,Western blot检测蛋白表达水平。给大鼠口服选择性的LXRs激动剂T0901317后测定肝脏Angptl3 mRNA和蛋白表达水平,评价EGCG对T0901317抑制剂的作用。结果表明,与高脂模型组相比,EGCG(30、15 mg·kg~(-1)·d~(-1))能有效降低大鼠的血脂水平,明显抑制肝脏Angptl3 mRNA和蛋白表达、上调脂肪组织LPL mRNA和蛋白表达水平(P<0.05或P<0.01),且EGCG(30 mg·kg~(-1)·d~(-1))可有效抑制由T0901317引起的Angptl3 mRNA和蛋白的表达。本研究从一个新的角度揭示了EGCG通过抑制Angptl3-LPL信号通路来防治与高脂相关性疾病的可能机制,所以以Angptl3- LPL信号通路为调节靶标,可能成为治疗血脂紊乱的一条新途径。

语种： 中文

作者： 彭旺;唐小明;葛猛;杨涛涛;屈泰龙;...

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2017年43(4):423-426 ISSN：1007-1032

作者机构： 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128;湖南省动物疫病预防控制中心, 湖南, 长沙, 410007;[彭旺; 葛猛; 杨涛涛; 屈泰龙; 余兴龙] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128;[唐小明] 湖南省动物疫病预防控制中心, 湖南, 长沙, 410007

关键词： 猪萨佩罗病毒;间接免疫荧光;抗体检测;湖南

摘要： 以分离的猪萨佩罗病毒PSV HuN1/2016株感染PK15细胞,制备抗原板,建立检测猪血清中PSV抗体的间接免疫荧光(IFA)方法。结果表明:一抗最佳稀释浓度为1∶300;FITC标记的羊抗猪荧光二抗最佳稀释浓度为1∶300。该方法特异性强,敏感度高,既能将PSV抗体与PRRSV、FMDV、PCV、CSFV抗体区分开,也可以检测到中和效价0.128的阳性血清。用该方法检测湖南省部分规模化猪场208份临床血清样品的总阳性率为68%,表明PSV在湖南省流行普遍,且其感染主要发生在保育阶段。

语种： 中文