作者： 张佩琪;李真诚;王宜平;岑美珍;刘进辉;...

期刊： 中国兽医学报,2018年38(7):1445-1450 ISSN：1005-4545

作者机构： 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410000;湖南省兽药工程技术研究中心, 湖南省兽药工程技术研究中心, 湖南, 长沙, 410000;[张佩琪; 李真诚; 王宜平; 岑美珍; 刘进辉] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410000;[纪春晓] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410000 湖南省兽药工程技术研究中心, 湖南省兽药工程技术研究中心, 湖南, 长沙, 410000

关键词： MDCC-MSB-1细胞;细胞周期;凋亡通路

摘要： MDCC-MSB-1细胞是鸡马立克氏病毒（MDV）诱导产生的T淋巴细胞增生性肿瘤细胞系之一，已被作为模型广泛应用于抗肿瘤药物的研究中。本文旨在探讨与MDCC—MSB-1细胞周期被阻滞在G1期的调控因子作用机制，以及诱导MDCC-MSB-1细胞凋亡的信号传导通路。MDV所致瘤细胞增殖抑制机制的深入研究，为人类肿瘤病的治疗研究提供良好的动物模型展望，也为新型药物的开发开辟出新的思路。

语种： 中文

作者： 王东亮;湛洋;胡意;雷昕诺;庞培;...

期刊： 中国兽医学报,2018年38(1):235-240 ISSN：1005-4545

作者机构： [王东亮; 湛洋; 胡意; 雷昕诺; 庞培; 张素娇; 王爱兵; 杨毅; 王乃东] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128

关键词： 猪圆环病毒2型;病毒样颗粒;亚单位疫苗

摘要： 病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)是某种病毒的1种或几种结构蛋白在体外组装而成,由于VLPs不包含病毒基因组,在宿主细胞中不能自我复制,因此VLPs在亚单位疫苗应用中具有较高的生物安全性。自猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)在世界范围内流行以来,已经给全球养猪业带来巨大经济损失,因此PCV2的致病机理和疫苗研究具有重要现实意义。PCV2Cap蛋白(capsid protein)是病毒唯一的衣壳蛋白,也是主要的免疫原性蛋白,60个Cap蛋白亚基在体外能自行组装成PCV2VLPs,该VLPs因与天然病毒粒子形态相似并保留了病毒完整的构象表位,已经在PCV2组装和侵染机理研究、亚单位疫苗的研发及其相关性系统疾病(PCV2-systemic disease, PCV2-SD)的预防研究中得到广泛应用。本文主要对PCV2Cap蛋白的Loops结构及其VLPs的制备研究进展进行阐述,为PCV2侵染机理与亚单位疫苗的研发等提供参考。

语种： 中文

作者： 贺秀媛;朱翠娟;袁慧;张君涛;原维;...

期刊： 上海交通大学学报. 医学版,2018年38(1):42-47 ISSN：1674-8115

通讯作者： Lian, F.

作者机构： 上海交通大学医学院附属仁济医院心外科, 上海, 200127;上海交通大学电子信息与电气工程学院, 薄膜与微细技术教育部重点实验室, 上海, 200240;同济大学医学院附属第十人民医院检验科, 上海, 200072;[颜春 ; 谢玮岳 ; 薛松 ; 连锋 ] 上海交通大学医学院附属仁济医院心外科, 上海, 200127;[马玉洁 ; 杨志 ] 上海交通大学电子信息与电气工程学院, 薄膜与微细技术教育部重点实验室, 上海, 200240

关键词： 金纳米颗粒;间充质干细胞;外泌体;自噬

摘要： 目的·探讨球形金纳米颗粒(AuNPs)阻断大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的自噬流对外泌体分泌的影响。方法·体外培养大鼠MSCs,分别以不同浓度AuNPs(0、15、30、90、150 μg/mL)处理细胞,CCK-8法检测细胞活力,以评估AuNPs细胞毒性。细胞分3组:正常对照组、AuNPs组(20 μg/mL AuNPs作用72 h)和阳性对照组(5 μmol/L氯喹作用4 h)。透射电镜下观察超微结构,超速离心提取细胞上清液外泌体,行纳米颗粒分析仪和电镜检测。共聚焦显微镜观察细胞自噬,Western blotting验证。结果· 0~ 30 μg/mL的AuNPs对细胞增殖的影响小。AuNPs组的MSCs外泌体分泌增多,体积减小,LC3和p62表达增高(均P<0.05),自噬小体增多,溶酶体和自噬小体融合受阻。结论· AuNPs阻断MSCs自噬流,调节外泌体分泌。

语种： 中文

作者： 王欣茹;尹代杰;杨逸豪;李萌;刘思齐;...

期刊： 中国预防兽医学报,2018年40(7):643-645,649 ISSN：1008-0589

作者机构： 湖南农业大学国际学院, 湖南, 长沙, 410128;湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128;[王欣茹; 尹代杰; 杨逸豪; 李萌; 刘思齐] 湖南农业大学国际学院, 湖南, 长沙, 410128;[刘伟] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128

关键词： 野猪;杜氏颚口线虫;线粒体DNA;cytb基因;种系发育分析

摘要： 为阐明野猪杜氏颚口线虫分离株线粒体细胞色素b （cytb）基因的遗传变异情况，并利用该基因探究杜氏颚口线虫与其它线虫的种群遗传关系。本研究利用PCR扩增从野猪体内分离出的杜氏颚口线虫cytb基因，并对该基因序列进行分析。结果显示，8株杜氏颚口线虫分离株线粒体cytb基因序列长度均为1 067 bp，与Genbank中登录的杜氏颚口线虫分离株同源性均大于98.3 %，与其它线虫的同源性均小于72.0 %；通过该基因建立的系统发育树分析显示，所有的杜氏颚口线虫分离株均与已知杜氏颚口线虫属于同一大分支。表明，线粒体cytb基因序列种内相对保守，种间差异明显，可以作为分子标记应用于杜氏颚口线虫的种间遗传变异研究。本研究为杜氏颚口线虫的分子流行病学和群体遗传学奠定基础。

语种： 中文

作者： 杨婷婷;黄复深;张雨龙;张宇航;李宏

期刊： 农业生物技术学报,2018年26(8):1392-1400 ISSN：1674-7968

作者机构： 湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128;湖南农业大学, 湖南省兽药工程技术研究中心, 长沙, 410128;[杨婷婷; 张雨龙; 张宇航; 李宏] 湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128;[黄复深] 湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128 湖南农业大学, 湖南省兽药工程技术研究中心, 长沙, 410128

关键词： 猪胸膜肺炎放线杆菌;重组NLPI蛋白(rNLPI);免疫保护效果;小鼠

摘要： 猪传染性胸膜肺炎 （porcine contagious pleuropneumonia, PCP）是猪（Sus scrofa）的一种呼吸道疾病，影响世界养猪业，其病原菌为猪胸膜肺炎放线杆菌（Actinobacillus pleuropneumoniae, APP），现有疫苗由于保护效果不甚理想，因此有必要寻找新的疫苗候选分子。本研究检测了猪APP重组NLPI蛋白（recombinant NLPI, rNLPI）的免疫保护作用。根据GenBank中已报道的APP nlpi基因序列设计引物对，然后以 APP的基因组为模板PCR 扩增nlpi基因，测序后进行生物信息学分析，发现该基因（GenBank No.： MH027649）由900 bp组成，编码1个含299个氨基酸的蛋白质，为一外膜脂蛋白，此外膜蛋白在多种APP血清型之间具有很高同源性。将nlpi基因亚克隆至 pET32a（＋）载体，转化大肠杆菌（Escherichia coli） BL21（DE3），用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside, IPTG）诱导表达APP rNLPI，并经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE）和蛋白质印迹（Western blot, WB）确认。结果表明，在34 kD处有特异性条带，可被相应的阳性血清识别。动物保护实验采用BALB/c小鼠（Mus musculus）进行，酶联免疫吸附法（enzyme-linked immuno sorbent assay, ELISA）用于测定免疫球蛋G（immunoglobulin G, IgG）抗体滴度。结果表明,弗氏不完全佐剂＋50 μg rNLPI、弗氏不完全佐剂＋30 μg rNLPI、弗氏不完全佐剂＋10 μg rNLPI、30 μg rNLPI免疫后，可诱导小鼠分别产生40%、20%、10%和20%的存活率；佐剂组和生理盐水对照组存活率为0。幸存小鼠慢慢恢复健康，并正常采食。可见，rNLPI皮下免疫可诱导小鼠产生免疫应答和较高的抗攻击感染的免疫保护力。该研究结果为进一步筛选猪传染性胸膜肺炎分子疫苗积累了基础资料。

语种： 中文

作者： 向思亭;易想炼;赵静;谭柱良;易金娥

期刊： 营养学报,2018年40(3):279-284 ISSN：0512-7955

作者机构： 湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128;湖南畜禽安全生产协同创新中心, 湖南畜禽安全生产协同创新中心, 长沙, 410128;[向思亭; 易想炼; 赵静; 谭柱良] 湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128;[易金娥] 湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128 湖南畜禽安全生产协同创新中心, 湖南畜禽安全生产协同创新中心, 长沙, 410128

关键词： γ-谷维素;过氧化氢;细胞凋亡;L02细胞;DNA损伤

摘要： 目的探讨γ-谷维素（gamma-oryzanol,γ-Orz）对过氧化氢（hydrogen peroxide,O2）诱导人肝细胞（L02）凋亡的保护作用。方法 O2建立L02细胞凋亡模型,用不同浓度（0.1,0.2和0.4 mmol/L）γ-Orz对L02细胞进行预处理,检测细胞总抗氧化能力（total antioxidant capacity,T-AOC）与产生羟自由基（OH·）的能力,三磷酸腺苷酶（adenosine triphosphatase,ATPase）活力以及一氧化氮（nitric oxide,NO）水平;Hoechst 33258染色观察细胞形态变化;流式细胞术检测细胞周期变化;琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡过程中DNA的裂解。结果γ-Orz呈剂量依赖性下调L02细胞产生NO水平,上调OH·的清除能力、ATP酶活力与T-AOC活性,调控各细胞周期的百分比,恢复细胞形态,有效改善O2诱导的细胞凋亡。结论γ-Orz对O2致L02细胞凋亡具有保护作用,与其抑制氧化应激,增强ATP酶活力,减少DNA损伤及细胞周期阻滞有关。

语种： 中文

作者： 陈梅;张换成;柳亦松;刘兆颖;曾建国

期刊： 中国兽医学报,2018年38(9):1766-1770 ISSN：1005-4545

作者机构： 湖南农业大学动物医学院, 兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心, 湖南, 长沙, 410128;湖南农业大学动物医学院, 湖南省兽药工程技术研究中心, 湖南, 长沙, 410128;[陈梅; 张换成; 柳亦松; 曾建国] 湖南农业大学动物医学院, 兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心, 湖南, 长沙, 410128;[刘兆颖] 湖南农业大学动物医学院, 兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心, 湖南, 长沙, 410128 湖南农业大学动物医学院, 湖南省兽药工程技术研究中心, 湖南, 长沙, 410128

关键词： 二氢血根碱;二氢白屈菜红碱;博落回散;残留分析

摘要： 建立了一种用于同时测定鸡肌肉中二氢血根碱和二氢白屈菜红碱的UPLC-MS/MS方法.肌肉样品经乙腈-水(95∶5)溶液超声提取后,离心取上清液经脱脂后氮吹浓缩,甲醇复溶.采用Agilent Poroshell 120 EC-C18(2.1 mm×150 mm i.d.,2.7 μm)色谱柱分离,采用正离子化模式下的多反应监测模式进行测定.方法的特异性良好,二氢血根碱和二氢白屈菜红碱在0.2～200 μg/L质量浓度范围内线性关系良好(r2≥0.999 6),最低定量限均为0.4 μg/kg,平均回收率分别为103.44％和104.36％,准确度RE均≤10.49％,精密度RSD均≤7.43％.该方法应用于长期饲喂博落回散的健康雌性白羽肉鸡的鸡胸肌组织中二氢血根碱和二氢白屈菜红碱的残留量检测,在500 mg/kg博落回散组测得DHSA残留量为0.804 μg/kg.该方法灵敏度高,重复性好,适用于鸡肌肉中二氢血根碱和二氢白屈菜红碱的残留定量检测.

语种： 中文

作者： 朱利娟;易想炼;赵静;王喜红;文利新;...

期刊： 动物营养学报,2018年30(3):1035-1043 ISSN：1006-267X

作者机构： 湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128;长沙绿叶生物科技有限公司, 长沙, 410125;弗罗兹瓦夫环境与生命科学大学兽医学院, 波兰, 弗罗兹瓦夫, 50-375;湖南畜禽安全生产协同创新中心, 湖南畜禽安全生产协同创新中心, 长沙, 410128;[朱利娟] 湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128 长沙绿叶生物科技有限公司, 长沙, 410125

关键词： 桦木酸;地塞米松;氧化应激;丝裂原活化蛋白激酶

摘要： 本试验旨在研究桦木酸(BA)对地塞米松(Dex)诱导氧化应激小鼠的保护作用和机制。将40只健康雄性昆明小鼠随机分为5组,即对照(NC)组、Dex组、0.25 mg / kg BA组、 0.50 mg / kg BA组、1.00 mg / kg BA组。NC组和Dex组小鼠灌服1 %的可溶性淀粉溶液,其余各组按不同剂量的BA灌服,连续14 d后,除对照组注射生理盐水外,其余4组均腹腔注射Dex(25 mg / kg BW)诱导氧化应激模型。检测各组小鼠肝脏、脾脏和胸腺总抗氧化能力(T-AOC) 、抑制羟自由基能力和过氧化物酶(POD)的活性,反转录(RT) -PCR检测脾脏和胸腺丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中凋亡信号调节激酶1(ASK1) 、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和P38基因的表达量,蛋白质免疫印迹(Western Blot)法检测脾脏MAPK信号通路中ASK1、JNK和P38蛋白的表达量。结果表明:1)与NC组相比,Dex组的肝脏T-AOC、抑制羟自由基能力,脾脏POD活性,胸腺T-AOC、抑制羟自由基能力均极显著下降(P<0.01);与Dex组相比,0.50和1.00 mg / kg BA组肝脏T-AOC、抑制羟自由基能力以及POD活性均显著或极显著的升高(P < 0.05或P<0.01),0.50 mg / kg BA组脾脏T-AOC、0.50和1.00 mg / kg BA组脾脏抑制羟自由基能力、0.25和1.00 mg / kg BA组脾脏POD活性均显著或极显著的升高(P<0.05或P<0.01),0.50和1.00 mg / kg BA组胸腺T-AOC、抑制羟自由基能力和POD的活性均显著或极显著升高(P< 0.05或P<0.01) 。2)与NC组相比,Dex组脾脏和胸腺ASK1、JNK和P38 mRNA表达量均极显著升高(P < 0.01);与Dex组相比,0.50和1.00 mg / kg BA组脾脏和胸腺ASK1、JNK和P38 mRNA表达量均显著或极显著下降(P<0.05或P<0.01) 。3)与NC组相比,Dex组脾脏JNK和P38蛋白的表达量极显著升高(P<0.01);与Dex组相比,0.50 mg / kg BA组脾脏ASK1蛋白的表达量显著降低(P<0.05),0.25、0.50和1.00 mg / kg BA组脾脏JNK和P38蛋白的表达量显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01) 。由此可见,BA预处理后,增强了Dex应激小鼠肝脏、脾脏和胸腺的T-AOC、抑制羟自由基能力和POD活性,降低了Dex应激小鼠脾脏和胸腺MAPK信号通路中ASK1、JNK和P38 mRNA表达量以及脾脏ASK1、JNK和P38蛋白的表达量。BA对Dex造成的氧化损伤具有预防性的保护作用,并且这种保护作用与JNK-P38 MAPK信号通路相关。

语种： 中文

作者： 靳元春;刘进辉;孔小鲜;谭磊;刘伟

期刊： 中国预防兽医学报,2018年40(2):167-169 ISSN：1008-0589

作者机构： [靳元春; 刘进辉; 孔小鲜; 谭磊; 刘伟] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128

关键词： 蛇源裂头蚴;核糖体DNA;ITS基因序列;种系进化关系

摘要： 为了研究蛇源裂头蚴种系发育关系,本研究对大王蛇裂头蚴湖南株的核糖体DNA内转录间隔区(ITS)进行扩增与测序,并对其基因序列进行比对后绘制种系进化树,分析蛇源裂头蚴与其它带科绦虫的种群遗传关系.结果显示,12个蛇源裂头蚴分离株ITS基因序列长度差异较小,为1 386 bp~1 404 bp;各分离株之间ITS-1和ITS-2差异分别为0.2 %~1.3 %和0.4 %~2.2 %,与GenBank中登录的其它带科绦虫相比,同源性均分别低于66.3 %和52.1 %.表明蛇源裂头蚴ITS基因序列在种内相对保守,种间差异较大,可以作为蛇源裂头蚴的分子遗传标记.分离株系统进化树显示,所有分离株与欧猬迭宫绦虫位于同一大分支,与其他带科绦虫得到了很好的鉴别.本研究为蛇源裂头蚴的鉴别诊断、分子流行病学调查等方面的研究奠定基础.

语种： 中文

作者： 李蓝祁;刘江静;陈晓丽;李欣;路永强;...

期刊： 畜牧兽医学报,2018年49(7):1387-1393 ISSN：0366-6964

作者机构： 湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室, 北京, 100193;吉林农业大学动物科学技术学院, 长春, 130118;北京市畜牧总站, 北京, 100107;[李蓝祁] 湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室, 北京, 100193

关键词： 奶牛;发情鉴定;活动量;计步器

摘要： 旨在探究奶牛发情期活动量变化规律,及其受胎次、季节和发情处理方式3个因素的影响,提高计步器发情检测方法检出率。随机选择某奶牛场150头产后健康泌乳牛和7头青年牛,使用计步器自动检测牛发情前后活动量数据,并采用直肠检查进行发情牛确认。结果表明,奶牛发情开始后活动量(>1 500)显著高于间情期(<500) (P<0.05),且发情后4.5h达最高(2 179±1 073),随后逐渐下降,至发情结束后,恢复到间情期水平;发情期活动量升高倍数和持续时间受胎次、季节和发情处理类型影响显著(P<0.05)。综上表明,运用计步器自动检测荷斯坦奶牛发情时,应综合考虑胎次、季节和发情处理方式因素对活动量变化的影响,再根据本场具体情况设定与本场相切合的预报阈值。

语种： 中文

作者： 黄鹏;刘金凤;卿志星;柳亦松;唐其;...

期刊： 基因组学与应用生物学,2017年36(6):2458-2463 ISSN：1674-568X

作者机构： 湖南农业大学园艺园林学院, 兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心, 长沙, 410128;湖南中医药大学药学院, 长沙, 410208;湖南农业大学, 兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心, 长沙, 410128;[黄鹏; 刘金凤; 唐其; 曾建国] 湖南农业大学园艺园林学院, 兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心, 长沙, 410128;[卿志星] 湖南中医药大学药学院, 长沙, 410208

关键词： 博落回;四氢小檗碱氧化酶;实时定量表达

摘要： 小檗碱是一种具有重要药用价值的次生代谢产物,目前该化合物主要来自于植物。四氢小檗碱氧化酶(STOX)是合成小檗碱的最后一步反应的酶,其在合成小檗碱的过程中发挥着关键的作用。本研究通过博落回转录组数据筛选到1个小檗碱氧化酶候选基因,并通过PCR技术对该序列进行克隆并进行生物信息学分析。经过克隆该序列中ORF区并用荧光定量PCR发现该基因的组织特异性表达规律与小檗碱代谢规律一致。该研究对下一步分析该基因功能、阐明博落回中STOX基因的合成机制和下一步运用植物代谢工程技术提高小檗碱在博落回中的含量具有重要意义。

语种： 中文

作者： 严思思;刘水平;肖海思;曾禹;周慧娟;...

期刊： 中国油脂,2017年42(10):80-83 ISSN：1003-7969

作者机构： 湖南农业大学动物医学院, 湖南畜禽安全生产协同创新中心, 长沙, 410128;湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128;湖南省长沙市岳麓区农业林业畜牧局, 长沙, 410013;[严思思; 刘水平; 肖海思; 曾禹; 周慧娟; 文利新] 湖南农业大学动物医学院, 湖南畜禽安全生产协同创新中心, 长沙, 410128;[王吉; 朱圆缘; 刘娟] 湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128

关键词： 猪油;玉米油;大豆油;调和油;血脂;肾功能;心血管

摘要： 以小鼠为模型模拟我国居民膳食习惯,探讨两种水平的玉米油与猪油的调和油、大豆油与猪油的调和油对小鼠体重、体脂率、血脂、血糖、肾功能、主动脉弓病理组织形态的影响。将40只8周龄雄性C57BL /6J小鼠随机均分为玉米油与猪油调和油推荐摄入量组(CR) 、玉米油与猪油调和油实际摄入量组(CA) 、大豆油与猪油调和油推荐摄入量组(SR) 、大豆油与猪油调和油实际摄入量组(SA),每组的基础日粮中分别添加3.8%玉米油与猪油的调和油、6.5%玉米油与猪油的调和油、 3.8%大豆油与猪油的调和油、6.5%大豆油与猪油的调和油,饲喂8周后进行称重、解剖,采集外周血清检测血脂、血糖、肾功能,取主动脉弓做HE病理切片。结果表明: SA组的体重、体脂率均极显著高于CA组(P< 0.01),SA组的脂联素含量极显著低于CA组(P< 0.01),SA组的LDL - C含量显著高于CA组(P< 0.05),SA组的尿酸含量、尿素含量、肌酐含量均极显著高于CA组(P< 0.01); SA组的体重、体脂率、HDL - C含量、LDL - C含量、尿酸含量、尿素含量、肌酐含量均极显著高于SR组(P< 0.01);各组主动脉弓病理组织切片均未观察到病变。表明在我国居民当前烹调油摄入水平下,与大豆调和油比较,选择玉米调和油能明显降低体重和体脂率,同时能有效改善血清LDL - C含量,降低患心血管疾病的风险。并且与玉米调和油比较,摄入更高剂量的大豆调和油更易促进肥胖并造成肾功能损伤。

语种： 中文

作者： 段德勇;程天印

期刊： 畜牧兽医学报,2017年48(3):530-537 ISSN：0366-6964

作者机构： [段德勇; 程天印] 湖南农业大学动物医学院, 湖南畜禽安全生产协同创新中心, 长沙, 410128

关键词： 微小牛蜱;不同饱血状态;唾液;中肠;菌群结构

摘要： 旨在探明微小牛蜱随吸血时间的延长,中肠和唾液微生物菌群结构的差异,以及优势菌属在中肠和唾液中增殖和迁移的特点。在无菌条件下采集半饱血、饱血微小牛蜱唾液和中肠内容物;提取细菌总DNA,PCR扩增其16SrDNA V3-V4区,Illumina MiSeq双端测序;对序列进行拼接和过滤、OTUs聚类、物种注释及多样性分析。结果显示,共得到134 317条序列,聚类后获得1 304个OTUs,半饱血雌成蜱唾液(SP)、饱血雌成蜱唾液(SF)、半饱血雌成蜱中肠内容物(MP)、饱血雌成蜱中肠内容物(MF)分别获得336、332、269、289个OTUs,其中152个OTUs为4个样本共有;4个样品在门水平上,以变形菌门和厚壁菌门为优势菌门,变形菌门在中肠中的含量大于唾液,而厚壁菌门反之;在属水平上,4个样本以柯克斯体属、不动杆菌属、甲基杆菌属、短波单胞菌属、立克次体属、埃希菌属为优势菌属,其中柯克斯体属、不动杆菌属在4个样本中含量均较大,柯克斯体属在半饱血状态下,含量高于饱血状态;不动杆菌属在唾液中的含量高于中肠。结果表明,微小牛蜱中肠和唾液中有复杂的微生物菌群结构;细菌在不同组织中的分布不同,其含量随吸血时间的延长而发生变化。

语种： 中文

作者： 寇红祥;李蓝祁;王振玲;任康;李树静;...

期刊： 畜牧兽医学报,2017年48(7):1221-1228 ISSN：0366-6964

作者机构： [寇红祥] 吉林农业大学动物科学技术学院,长春130118;[寇红祥] 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室,北京100193;湖南农业大学动物医学院,长沙410128;北京农业职业学院,北京,102442;北京市畜牧总站,北京,100107

关键词： 牛;发情鉴定;排卵;活动量;阴道黏液电阻值

摘要： 准确的发情鉴定与排卵时间预测对确定输精时间具有重要意义。本研究随机选择产后60~90d健康二胎西门塔尔牛与头胎荷斯坦奶牛各10头为试验牛,试验牛同期发情后,采用外部观察与直肠检查确定发情、排卵时间,并使用计步器每30min自动检测牛发情前后及排卵前后的活动量,同时,使用发情排卵仪每4h测定阴道黏液电阻值(简称电阻值)变化。结果表明,间情期电阻值(300±12)Ω显著高于发情期(P<0.05),发情开始前4h,电阻值迅速下降,到发情开始后8~12h,下降至最低(220±27)Ω,随后逐渐回升,到排卵结束,恢复至间情期水平;间情期牛活动量较低,发情后活动量激增,平均增加(10.8±7.0)倍,发情结束后恢复正常。发情持续时间、开始发情~排卵时间与发情结束~排卵时间分别为(15.6±2.8)、(26.8±4.2)与(11.3±4.3)h;电阻最低值~排卵时间为(15.0±1.3)h。发情排卵时,活动量与阴道黏液电阻值变化规律的揭示,对准确发情鉴定与输精具有重要指导意义,二参数结合使用大大提高了发情鉴定效率及排卵时间预测准确性,具有重要的自动化发情监测及排卵预测技术研发价值。

语种： 中文

作者： 袁志航;袁慧;邬静;陈小军;刘兆颖;...

期刊： 中国兽医学报,2017年37(8):1553-1557 ISSN：1005-4545

作者机构： 湖南农业大学动物医学院, 湖南兽药工程技术研究中心, 湖南, 长沙, 410128;湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128;[袁志航; 邬静; 陈小军; 刘兆颖; 孙志良] 湖南农业大学动物医学院, 湖南兽药工程技术研究中心, 湖南, 长沙, 410128;[袁慧] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128

关键词： 钩吻素子;脂多糖;炎症;巨噬细胞

摘要： 为揭示钩吻素子的体外抗炎作用机理,利用硝酸还原酶法和ELISA法研究了不同质量浓度(100,200,400mg/L)的钩吻素子对一氧化氮(NO)和细胞因子白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌的影响,运用了QPCR的方法检测了钩吻素子对诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)、IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA表达水平的影响,并运用Western blot法检测了钩吻素子对iNOS蛋白表达的影响。结果显示,100,200,400mg/L质量浓度的钩吻素子能够极显著的抑制RAW264.7细胞NO的产生以及IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌(P<0.01),同时能够剂量依赖性的降低iNOS、IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA水平,抑制脂多糖(LPS)引起的iNOS蛋白表达的升高(P < 0.01)。由此推论,钩吻素子可能通过抑制炎症因子的分泌,减少NO的释放,下调iNOS、IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA水平,抑制iNOS蛋白过度表达达到其抗炎作用。

语种： 中文

作者： 陈颀;包显颖;苏云;李斌;曹立红;...

期刊： 动物营养学报,2017年29(8):2826-2835 ISSN：1006-267X

作者机构： 中国科学院亚热带农业生态研究所畜禽健康养殖研究中心, 中国科学院亚热带农业生态过程重点实验室;[陈颀; 包显颖; 冯泽猛?; 李铁军; 印遇龙] 畜禽养殖污染控制与资源化技术国家工程实验室;[陈颀; 包显颖; 冯泽猛?; 李铁军; 印遇龙] 湖南省畜禽健康养殖工程技术研究中心;[陈颀; 包显颖; 印遇龙] 农业部中南动物营养与饲料科学观测实验站, 长沙, 410125;湖南师范大学生命学院动物营养与人体健康实验室, 长沙, 410081

关键词： 氨基酸;白酒糟;酿酒酵母培养物;营养价值评估;猪

摘要： 为评估白酒糟酿酒酵母培养物在猪饲料中的应用价值,本试验在测定白酒糟酿酒酵母培养物中水分、粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分、粗纤维、氨基酸含量等营养成分的基础上,采用全收粪法测定猪对白酒糟酿酒酵母培养物中营养物质的全消化道表观消化率,并通过安装T型瘘管测定猪对白酒糟酿酒酵母培养物中氨基酸的回肠末端表观消化率。结果表明:白酒糟酿酒酵母培养物的水分、粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分、粗纤维含量分别为8.34%、31.12%、5.00%、13.46%和11.00%,总能为19.53 MJ / kg,霉菌毒素含量远低于国家标准。猪对白酒糟酿酒酵母培养物中干物质、总能、粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维和粗灰分的全消化道表观消化率分别为48.79%、38.33%、 54.15%、82.94%、23.17%和20.29%,消化能为11.75 MJ / kg;猪对白酒糟酿酒酵母培养物中必需氨基酸和非必需氨基酸的回肠末端表观消化率的平均值分别为72.38%和69.37%,其中赖氨酸、甲硫氨酸的回肠末端表观消化率均超过80%。由此得出,白酒糟酿酒酵母培养物中氨基酸的吸收和利用率较高,可应用于猪饲料生产。

语种： 中文

作者： 朱娜;夏宇飞;张磊;方超;柴强强;...

期刊： 中国预防兽医学报,2017年39(3):196-200 ISSN：1008-0589

作者机构： 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128;湖南农业大学动物医学院, 湖南畜禽安全生产协同创新中心, 湖南, 长沙, 410128;[朱娜; 夏宇飞; 张磊; 方超; 柴强强; 周成捷; 王送林] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128;[黎满香] 湖南农业大学动物医学院, 湖南畜禽安全生产协同创新中心, 湖南, 长沙, 410128

关键词： 肠球菌;粪肠球菌;屎肠球菌;毒力基因;溶血试验

摘要： 为研究猪流行性腹泻(PED)病猪群中肠球菌及其携带毒力基因的变化情况,本研究采用PCR方法对115株猪源肠球菌检测其11种毒力基因的分布情况及进行了其溶血试验和明胶液化试验。结果,共检测到9种毒力基因:EF3314、efaA、ge1E、ace、asa1、cy1A、esp、Hyl和 EF0591,其中 asa373和 AS未检测到。72株健康猪源分离菌中毒力基因检出率分别为12.5%、9.7%、5.6 %、 2.8%、13.9%、4.2%、8.3%、15.3 %和1.4 %。43株PED病猪分离菌毒力基因阳性率分别为20.9%、25.6%、2.3%、18.6%、51.2%、11.6%、20.9%、0和7.0%。溶血试验结果显示115株肠球菌中溶血的占88.7 %,其中α-溶血占40%, β-溶血占48.7%,共有8株检测到溶血素A基因(clyA),检出率为6.9%。11株粪肠球菌全部表现溶血,其中健康猪源分离株为α-溶血,PEDV感染猪分离株为β-溶血。明胶液化试验表明115株肠球菌中只有两株能液化明胶,均为粪肠球菌,一株为健康猪源分离株,一株为PEDV感染猪分离株,而且从这两株菌中均检测到了明胶酶E(ge1E)基因。表明PED猪源肠球菌毒力基因检出率明显高于健康猪源肠球菌(p<0.05)。明胶液化试验和溶血试验结果表明,粪肠球菌的这两种表型与基因型为肠球菌种中表达一致性是最高的,其携带毒力基因为肠球菌中所占比例最高。通过两种不同来源肠球菌毒力基因的比较,为PED的分析治疗与防控提供依据。

语种： 中文

作者： 毛玉;刘沅;蔡杰;庞培;李进军;...

期刊： 中国兽医学报,2017年37(11):2038-2042 ISSN：1005-4545

作者机构： [毛玉; 刘沅; 蔡杰; 庞培; 李进军; 邓治邦] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128

关键词： 肠道;细胞因子

摘要： 用PCV2感染5周龄昆明系小鼠,分别在感染后7,14,21,28,35,42 d处死小鼠,取脾脏、腹股沟淋巴结、Peyers结做PCR鉴定PCV2感染情况,提取肠道中蛋白检测SIgA及肠道相关细胞因子IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ含量的变化。结果显示:随着感染时间的延长,试验组小鼠肠道SIgA、IL-2和IFN-γ水平均呈先升高后降低的趋势,IL-4和IL-10呈持续升高的趋势。结果表明:小鼠肠道SIgA及相关细胞因子的含量在PCV2的刺激下发生了不同程度的改变。

语种： 中文

作者： 王贵平;李君佩;罗广;李晓云;贾杏林

期刊： 中国兽医学报,2017年37(11):2101-2107 ISSN：1005-4545

作者机构： [王贵平; 李君佩; 罗广; 李晓云; 贾杏林] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128

关键词： 猪肺炎支原体;猪肺泡巨噬细胞;外源性抗原递呈加工;mRNA表达量

摘要： 将从健康仔猪分离到的猪肺泡巨噬细胞(PAM)分别按1∶10、1∶3和1∶1的比例与猪肺炎支原体(Mhp)232株共同孵育。在孵育12 h后收获PAM,用qPCR检测PAM中MHCⅡ分子mRNA表达量,确定PAM和Mhp的最佳孵育比(ROI)。将PAM和Mhp按ROI比例混合孵育(试验组),用等体积的10% RPMI-1640液代替Mhp与PAM孵育作为对照组。分别在孵育后12,24,36,48 h收获试验组和对照组的PAM。用实时荧光定量PCR(qPCR)检测PAM中与外源性抗原加工递呈功能相关分子MHCⅡ、SLA-DM、Li和CD86、TLR2和TLR6 mRNA表达量,分析Mhp感染对PAM外源性杭原递呈功能的影响。结果显示:相关因子MHCⅡ、SLA-D、Li、CD86和TLR6在Mhp感染PAM 12 h后,mRNA表达量升高(17~380倍);感染24 h后降至对照组表达水平的0.043~0.391倍;感染36 h后极大地降低;感染后48 h全部检测不出。TLR2因子mRNA表达量在Mhp感染12 h后降至对照组的0.767倍,感染24 h后全部全部检测不出。从检测结果可以看出,Mhp感染早期(12 h)可以引起PAM抗原递呈功能相关因子mRNA表达量增加;感染晚期(24 h以后)会抑制PAM的外源性抗原递呈加工功能相关因子mRNA表达量。结果表明:Mhp感染早期,动物机体可以通过PAM导致免疫增强,后期会引起免疫抑制。本试验探索了Mhp对PAM外源性抗原加工递呈功能相关因子mRNA表达量影响,为进一步研究Mhp致病机理提供了有益的参考。

语种： 中文

作者： 岑静;王赛;廖华媛;李润成;葛猛;...

期刊： 中国兽医科学,2017年47(2):212-216 ISSN：1673-4696

作者机构： [岑静; 王赛; 廖华媛; 李润成; 葛猛; 余兴龙] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128

关键词： 猪渗出性皮炎;猪葡萄球菌;表皮脱落素

摘要： 为了解患渗出性皮炎仔猪中猪葡萄球菌内表皮脱落素的流行情况,采集2个猪场（A场和B场）29头患病猪的痂皮、痂皮下渗出液共48份,进行了猪葡萄球菌的分离鉴定及其脱落素基因的检测。结果显示,48份样品中共分离到29株含脱落素基因的葡萄球菌,经生化鉴定和Gap基因测序分析,表明所有菌株均属于猪葡萄球菌。其中,A场和B场分离的猪葡萄球菌脱落素检出率分别为93.3%和64.3%;A场可检出Exh A、Exh C、Exh D和Shet A共4种脱落素基因,B场可检出Exh A、Exh D和Shet A共3种脱落素基因,但Shet A的检出率在2个猪场中均为最高且与其他3种脱落素大量共存,共存率在A场和B场分别为61.5%和70.0%。2个猪场中痂皮源葡萄球菌中脱落素检出率均高于皮下渗出液,脱落素与渗出性皮炎病具有较高的相关性,其检出率受到2个猪场不同的饲养环境和采样部位的影响,Shet A的高检出率与其他脱落素共存的情况,提示该毒素可能广泛参与了猪葡萄球菌的致病作用。

语种： 中文