立显蛋白染色液在SDS-PAGE 中检测微量蛋白的应用
作者:
王世东;赵墩;胡玉立;周小飞;余兴龙
期刊:
中国生物制品学杂志 ,2019年32(7):803-805 ISSN:1004-5503
通讯作者:
Yu, X.-L.
作者机构:
[周小飞; 王世东; 胡玉立; 赵墩; 余兴龙] College of Veterinary Medicine, Hunan Agricultural University, Changs, 410128, China
通讯机构:
[Yu, X.-L.] C;College of Veterinary Medicine, Hunan Agricultural University, Changs, China
关键词:
立显蛋白染色液;考马斯亮蓝染色液;微量蛋白
摘要:
目的探讨立显蛋白染色液在SDS-PAGE中检测微量蛋白的应用效果。方法制备SDS-PAGE胶,采用立显蛋白染色液及普通考马斯亮蓝(Coomassie brilliant blue,CBB)染色液,检测定量的牛血清白蛋白(bovine serum albumin, BSA)的敏感度及猪细小病毒VP2蛋白、猪蓝耳病病毒N蛋白、猪丹毒杆菌Fe蛋白和猪伪狂犬病病毒gB蛋白基因工程纯化样品的纯度。结果采用立显蛋白染色液染色可识别蛋白质含量为2. 5 ng的蛋白条带,敏感性高于普通CBB染色40倍。4种蛋白纯化样品经CBB染色后检测纯度均较高,但经立显蛋白染色液染色后,4种纯化蛋白样品均检测出杂蛋白,测定的纯度均有所下降,其中VP2及gB蛋白的纯度有较大幅度下降(分别由83. 33%、100%降至51. 8%、85. 6%)。结论立显蛋白染色液染色SDS-PAGE胶中的蛋白条带敏感性高,快速简便,适用于微量蛋白质的检测。
语种:
中文
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草原革蜱和森林革蜱形态结构与分子标记的比较
作者:
周鸿铭;程天印;段德勇
期刊:
中国兽医科学 ,2019年49(3):317-323 ISSN:1673-4696
作者机构:
湖南农业大学动物医学院,湖南长沙,410128;[段德勇; 周鸿铭; 程天印] 湖南农业大学
关键词:
草原革蜱;森林革蜱;形态学;分子标记;差异分析
摘要:
为了比较草原革蜱(采自内蒙古呼伦贝尔)和森林革蜱(采自宁夏固原)的形态结构与分子标记异同点,借助体视显微镜超景深系统观察了这2种蜱的形态结构;通过分子生物学技术,测定了这2种蜱COX1、ITS2及16S rDNA基因序列,并通过比对这3种基因的同源性、构建系统发生树,分析了这2种蜱的分子标记差异。结果显示,这2种蜱均具有珐琅斑,须肢粗短,缘垛整齐等革蜱属的典型特征。草原革蜱珐琅彩浓厚且色浅呈银白色,刻点小且分布均匀、夹杂少数大刻点,背突直而短,缘垛分布均匀;森林革蜱珐琅彩覆盖大部分盾板且色深呈深褐色,刻点粗细混杂、分布较为稠密,背突向背方弯曲,尾部缘垛较其他缘垛窄;两者具有显著的形态学差异。草原革蜱COX1、ITS2、16S rDNA基因序列与GenBank中已知草原革蜱基因序列的相似度分别为99.88%、99.90%、97.58%;森林革蜱COX1、ITS2、16S rDNA基因序列与GenBank中已知森林革蜱基因序列的相似度分别为98.64%、98.60%、99.53%。进一步对比这2种蜱的COX1、ITS2、16S rDNA基因序列,发现其相似度分别为99.76%、99.75%、98.29%。结果提示:虽然草原革蜱和森林革蜱形态学差异显著,但COX1、ITS2、16S rDNA基因序列相似度极高,两者可能为同一种的不同亚种或COX1、ITS2、16S rDNA基因不适用于革蜱属的种间鉴定。
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中文
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猪源肠球菌明胶液化表型与5种毒力基因的检测分析
作者:
李岱霞;朱娜;蒋逸凡;任杰;黎满香
期刊:
中国预防兽医学报 ,2019年41(4):361-365 ISSN:1008-0589
作者机构:
[李岱霞; 朱娜; 蒋逸凡; 任杰; 黎满香] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128
关键词:
肠球菌;粪肠球菌;群体感应系统;毒力基因;明胶分解
摘要:
为探究明胶液化的表型与其5种毒力基因在不同来源和不同种属猪肠球菌中的分布差异,本研究采用PCR方法以及明胶液化试验对湖南分离的375株肠球菌携带的明胶酶基因(gelE)、调控gelE表达的毒力基因反应调节子基因(fsrA)、前肽加工蛋白基因(fsrB)、组氨酸激酶基因(fsrC)、丝氨酸蛋白酶基因(sprE)共5种毒力基因的分布情况以及液化明胶现象进行检测。结果显示,共263株肠球菌检测到了毒力基因,检出率分别为41.3 %(gelE)、45.9 %(fsrA)、50.9 %(fsrB)、48.8 %(fsrC)、48.8 %(sprE)。能够同时检测到5种毒力基因的菌株共有110株,其中粪肠球菌106株,且该5种毒力基因在106株粪肠球菌中的检出率均为最高,另外4株为其它肠球菌。在明胶液化试验中,共有155株肠球菌检测到gelE基因,但只有106株能够发生明胶液化现象,且这些菌株正是能够同时检测到5种毒力基因的106株粪肠球菌,而另外4株能够同时检测到5种毒力基因的其它肠球菌却不能发生明胶液化现象。结果表明,粪肠球菌是肠球菌中主要携带毒力基因的菌属,与屎肠球菌以及其它肠球菌相比,更容易出现液化明胶的表型,这可能与粪肠球菌中某些明胶液化的机制有关,且除gelE外,参与gelE表达的几种毒力基因对该表型的出现也具有一定的影响。
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植物多酚对氧化应激与炎症信号通路的调控机制
作者:
贺宇佳;刘明;伍树松
期刊:
动物营养学报 ,2019年31(4):1554-1563 ISSN:1006-267X
作者机构:
湖南农业大学动物医学院,长沙,410128;湖南农业大学动物科学技术学院,长沙,410128;[刘明; 伍树松; 贺宇佳] 湖南农业大学
关键词:
多酚;氧化应激;炎症;调控机制
摘要:
炎症及氧化应激是造成动物机体组织和器官损伤的主要原因之一,肠道炎症可造成肠黏膜损伤,进而影响其屏障功能,减弱动物对外界刺激的防御能力。植物多酚具有抗氧化、抗炎、调节肠道菌群等多种潜在功效,且具有低毒、无耐药性等特点,因此,在新型饲料添加剂的开发中具有广阔的应用前景。但目前大部分植物多酚在动物体内的代谢及调控机制尚不明确,这极大阻碍了其合理有效利用。本文基于近期研究就植物多酚对氧化应激与炎症信号通路的调控机制进行综述,为其在新型饲料添加剂中的应用提供理论依据。
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细菌脂多糖急性暴露通过炎症反应诱导小鼠睾丸损伤
作者:
张逢;陈指龙;易思亮;许璐瑶;方娟;...
期刊:
畜牧兽医学报 ,2019年50(5):1099-1105 ISSN:0366-6964
作者机构:
湖南农业大学动物医学院;[傅胜才] 湖南省畜牧兽医研究所;[陈指龙; 许璐瑶; 方娟; 黎陈; 张逢; 易思亮; 杨青] 湖南农业大学
关键词:
脂多糖;睾丸;炎症因子;睾酮
摘要:
旨在研究细菌脂多糖(LPS)急性暴露对小鼠睾丸及其功能的影响。将健康雄性小鼠随机分为4组:对照组(Control)、1.25mg·kg~(-1) LPS组、2.5mg·kg~(-1) LPS组和5.0mg·kg~(-1) LPS组,对照组腹腔注射200μL生理盐水,其余3组注射等体积含不同剂量的LPS,作用12h。收集睾丸组织制作石蜡切片,染色后观察其病理变化,记录体重、睾丸和附睾指数,并测定精子品质相关指标,用RT-qPCR法检测炎症相关基因TNF-α、IL-6、GAS6和TGF-β1的转录,同时用ELISA检测血清中睾酮(T)的含量。结果表明,与对照组相比,LPS急性暴露时,以剂量依赖性方式降低小鼠体重(P<0.05或P<0.01),同时显著降低睾丸指数(P<0.05或P<0.01)、精子密度(P< 0.01)及精子活力(P<0.05或P<0.01),增加精子畸形率(P<0.05或P<0.01);使睾丸组织发生不同程度的病理学变化,表现在生精细胞凋亡,曲细精管管腔增大,精子数量减少等;导致血清中睾酮(T)的含量显著下降;另外, LPS还呈剂量依赖方式增加促炎因子TNF-α和IL-6及抑制抗炎因子GAS6和TGF-β1的转录。结果提示,细菌LPS急性暴露可通过破坏机体中炎症因子的平衡,使睾丸组织受到损伤从而导致生精障碍。
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褐黄血蜱卵蛋白质组分析
作者:
徐律;程天印
期刊:
畜牧兽医学报 ,2019年50(3):627-636 ISSN:0366-6964
作者机构:
湖南农业大学动物医学院,长沙410128;湖南畜禽安全生产协同创新中心,长沙410128;兽用蛋白质工程疫苗湖南省重点实验室,长沙410128;[徐律; 程天印] 湖南农业大学
关键词:
褐黄血蜱;卵;液相色谱-串联质谱;卵黄蛋白原;特异性肽段
摘要:
本研究旨在探明褐黄血蜱卵内蛋白组分,揭示蜱胚胎发育中的关键营养物质,为筛选可干扰胚胎发育的抗原分子奠定基础。采用液相色谱-串联质谱法对新鲜褐黄血蜱的卵蛋白成分进行分析,基于该蜱的唾液腺转录组翻译文库、中肠转录组翻译文库和Uniprot数据库对各蛋白成分进行鉴定。结果显示:从褐黄血蜱卵黄蛋白提取液中检出特异性肽段221条,由此鉴定蛋白53种,其中高可信蛋白12种,能够确定的功能蛋白有肌动蛋白(actin)和卵黄蛋白原Ⅱ(vitellogenin 2,Vg-2),且Vg-2与卵黄蛋白(vitellins,Vn)一级结构相同。蜱卵原生质所含蛋白较少;Vg-2是蜱卵内存在的唯一一种卵黄蛋白原。
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含CpG-ODN基序重组抑制素质粒的构建及其对小鼠颗粒细胞相关凋亡基因表达的影响
作者:
阳美霞;张虹亮;李蓝祁;张羽芳;杨利国;...
期刊:
畜牧兽医学报 ,2018年49(8):1625-1632 ISSN:0366-6964
作者机构:
湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128;湖南省兽药工程技术研究中心, 湖南省兽药工程技术研究中心, 长沙, 410128;华中农业大学动物科技学院, 武汉, 430070;[阳美霞; 王水莲] 湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128 湖南省兽药工程技术研究中心, 湖南省兽药工程技术研究中心, 长沙, 410128;[张虹亮; 李蓝祁; 张羽芳] 湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128
关键词:
抑制素;颗粒细胞;凋亡
摘要:
旨在构建含免疫基序CpG-ODN片段的重组抑制素质粒pEGISI-CpG-ODN,并研究其对小鼠颗粒细胞中相关凋亡基因mRNA表达水平的影响,以探讨免疫佐剂CpG-ODN对小鼠卵巢颗粒细胞的作用。采集21~23日龄雌性ICR小鼠卵巢颗粒细胞,试验分为3组:空载体组(pEGFP)、抑制素重组质粒组(pEGISI)和含CpG-ODN基序的重组抑制素质粒组(pEGISI-CpG-ODN)。采用普通PCR扩增目的片段CpG-ODN,荧光定量RT-PCR(qRTPCR)检测转染后细胞中CpG及死亡受体通路相关基因(Fas、FasL、DR4/5、TRAIL、Caspase8和Caspase3)mRNA的表达水平。结果表明:重组抑制素质粒pEGISI-CpG-ODN构建成功;重组抑制素质粒(pEGISI-CpG-ODN)转染颗粒细胞后,CpG基因能在细胞中高表达;与pEGISI组相比,pEGISI-CpG-ODN组转染颗粒细胞后,能极显著降低细胞中促凋亡基因Fas、FasL、DR4/5、TRAIL、Caspase8和Caspase3mRNA的表达水平(P<0.01)。综上表明, CpG-ODN可拮抗抑制素的作用,下调小鼠颗粒细胞中凋亡基因的表达,进而影响卵泡发育。
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钩吻素子在猪的体外代谢
作者:
肖洒;黄亚军;刘艳纯;孙志良;刘兆颖
期刊:
中国兽医学报 ,2018年38(8):1568-1572 ISSN:1005-4545
作者机构:
[肖洒; 黄亚军; 刘艳纯; 孙志良; 刘兆颖] 湖南农业大学动物医学院, 湖南省兽药工程技术研究中心, 湖南, 长沙, 410128
关键词:
钩吻素子;猪;体外代谢
摘要:
研究钩吻素子在猪体外肝S9的代谢,采用高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(HPLC/QqTOF MS)对孵育后的代谢物进行结构鉴定。结果表明,钩吻素子在猪肝S9中可生成7种代谢产物,根据原形及其代谢物的精确分子质量差、产物离子,鉴定了代谢物结构,包括N-脱甲基化代谢物(M1)、C18和C19的加氢代谢物(M3)、M3的去甲基代谢物(M4)、氧化代谢物(M6、M8和M12)和脱氢代谢物(M13)。钩吻素子在猪的代谢途径主要是氧化、还原、 N-脱甲基化。其研究结果为钩吻素子在动物及人体内代谢研究奠定基础。
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猪肾脏血管分支和伴行的铸型研究
作者:
李宝杰;李佳杭;张頔;段德勇;任显东
期刊:
中国兽医科学 ,2018年48(3):346-353 ISSN:1673-4696
作者机构:
湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128;湖南畜禽安全生产协同创新中心,湖南长沙410128;[李宝杰; 李佳杭; 张頔; 段德勇; 任显东] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128 湖南畜禽安全生产协同创新中心, 湖南畜禽安全生产协同创新中心, 湖南, 长沙, 410128
关键词:
猪;肾脏;血管;分支;伴行
摘要:
本试验旨在探究猪肾动脉、肾静脉的分支及伴行特点,为肾脏疾病的诊断和治疗提供形态学基础。运用ABS(丙烯腈-丁二烯-苯乙烯)铸型技术,对30个猪肾脏进行肾动脉、肾静脉单独和联合灌注。结果显示,猪肾动脉为1条,在进入肾门之前已分支,分支类型为前、后干型和背、腹干型,且以前、后干型较为多见。前、后干型中,前干在肾窦内分成一背侧支和一腹侧支,再由背、腹侧支发出肾脏前端和中部背、腹侧的各肾段动脉。后干不分出背、腹侧支,而是由主干直接发出肾脏中部和整个后端背、腹侧的各肾段动脉。前干血液供应范围大于后干。背、腹干型中,背干直接分出肾脏前端和中部背侧的各肾段动脉。腹干分为一前侧支和一后侧支,前侧支发出肾脏前端和中部腹侧的各肾段动脉,后侧支发出肾脏中部腹侧和后端背、腹侧的各肾段动脉。腹干血液供应范围显著大于背干。各级动脉间未见吻合。猪肾静脉为1条,在肾窦内由前干静脉和后干静脉汇聚而成。前干静脉收集肾脏前端和部分中部背、腹侧的血液,后干静脉收集肾脏部分中部和后端背、腹侧的血液,各同级或者不同级静脉之间均存在吻合,分级越小吻合越广泛。肾脏动脉和静脉间的伴行,随管径变细而更加紧密。结果表明,猪肾脏背部和腹部的血液供应随分支类型的不同而存在差异。静脉血液回流通路形式多样。
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白藜芦醇通过沉默调节蛋白1-解偶联蛋白2信号通路降低小鼠睾丸间质细胞TM3的氧化损伤
作者:
张晓春;陈指龙;方娟;黎陈;伍小松;...
期刊:
动物营养学报 ,2018年30(7):2632-2640 ISSN:1006-267X
作者机构:
湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128;湖南农业大学动物科学技术学院, 长沙, 410128;[张晓春; 陈指龙; 方娟; 黎陈; 杨青] 湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128;[伍小松] 湖南农业大学动物科学技术学院, 长沙, 410128
关键词:
白藜芦醇;氧化损伤;沉默调节蛋白1;解偶联蛋白2;小鼠睾丸间质细胞TM3
摘要:
本试验旨在研究白藜芦醇( RES)对氧化损伤小鼠睾丸间质细胞TM3的保护作用,并探索其可能的作用机制。首先,用不同浓度( 0、150、200、250、300 μmol /L)的过氧化氢( H_2O_2 )处理小鼠睾丸间质细胞TM3 8 h,确定建立氧化损伤细胞模型的适宜H_2O_2浓度;然后,用不同浓度( 0、2.5、5.0和10.0 μmol /L)的RES分别处理正常细胞24 h,确定RES安全浓度;最后,用安全浓度的RES处理氧化损伤细胞24 h。在整个培养过程中采用iCELLigence实时无标记细胞功能分析仪监测细胞的增殖情况;待安全浓度的RES处理氧化损伤细胞结束后采用2',7'-二氯荧光素二乙酸酯( DCFH-DA)探针法检测细胞中活性氧( ROS)的含量,实时荧光定量PCR( RT-qPCR)和蛋白质印迹( Western blotting)法分别检测沉默调节蛋白1( SIRT1) /解偶联蛋白2( UCP2)信号通路中关键因子SIRT1和UCP2 mRNA和蛋白质的相对表达量。结果表明: 1)用浓度为150 μmol /L及以上的H_2O_2处理细胞8 h后,极显著降低细胞存活率( P<0.01) ,因此确定150 μmol /L为建立氧化损伤细胞模型的适宜H_2O_2浓度。2)用10.0 μmol /L及以下浓度的RES处理正常细胞24 h后,细胞存活率均无显著变化( P>0.05) ;用2.5、5.0和10.0 μmol /L的RES处理氧化损伤细胞24 h后,细胞存活率均显著提高( P<0.05) ,且各浓度RES组间无显著差异( P>0.05) 。因此,选用5.0 μmol /L为RES的安全浓度。3)用5.0 μmol /L的RES处理氧化损伤细胞24 h后,细胞中ROS的含量极显著降低( P<0.01) ;细胞中SIRT1 mRNA和蛋白质的相对表达量极显著增加( P<0.01) ,而UCP2 mRNA和蛋白质的相对表达量则显著或极显著降低( P<0.01或P<0.05) 。由此可见,适宜浓度的RES可激活SIRT1同时抑制UCP2的表达, UCP2通过负反馈调节方式减少细胞内ROS的生成,从而在一定程度上抑制TM3细胞的氧化损伤。
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钩吻提取物对生长猪生长性能、肠道形态和盲肠菌群的影响
作者:
陈小军;王宇;王帅帅;伍勇;李元义;...
期刊:
动物营养学报 ,2018年30(9):3626-3633 ISSN:1006-267X
作者机构:
湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128;湖南省兽药工程技术研究中心, 湖南省兽药工程技术研究中心, 长沙, 410128;加拿大麦吉尔大学健康研究中心, 蒙特利尔, H3G 1A4;[陈小军; 王宇; 王帅帅; 孙志良] 湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128;[伍勇] 湖南省兽药工程技术研究中心, 湖南省兽药工程技术研究中心, 长沙, 410128
关键词:
钩吻提取物;生长猪;生长性能;肠道形态;盲肠菌群
摘要:
本试验旨在研究钩吻提取物对生长猪生长性能、肠道形态和盲肠菌群的影响。选取56日龄生长猪75头,随机分为5组,每组3个重复,每个重复5头。对照组饲喂基础饲粮,钩吻醇提物组分别饲喂在基础饲粮中添加25、50、100 mg /kg钩吻醇提物的试验饲粮,钩吻酸提物组饲喂在基础饲粮中添加150 mg /kg钩吻酸提物的试验饲粮,试验期49 d。结果显示:与对照组相比,饲粮添加钩吻提取物对生长猪的平均日采食量均无显著影响(P>0.05),显著提高了平均日增重(P<0.05),显著降低了料重比(P<0.05),以添加100 mg /kg钩吻醇提物效果最佳;与对照组相比,饲粮添加100 mg /kg钩吻醇提物显著增加了空肠、回肠绒毛高度(P<0.05),显著降低了十二指肠隐窝深度(P<0.05);透射电镜观察结果显示,饲粮添加钩吻提取物使空肠组织微绒毛更加均匀、整齐、致密,相邻细胞间的紧密连接、中间连接和桥粒等结构均结构清晰、完整;与对照组相比,饲粮添加50、100 mg /kg钩吻醇提物显著降低了盲肠中大肠杆菌的数量(P<0.05),显著增加了盲肠中乳酸杆菌的数量(P<0.05) 。由此可见,钩吻醇提物和钩吻酸提物均可改善生长猪肠道形态,调整盲肠菌群结构,提高生长猪的平均日增重,降低料重比,以100 mg /kg钩吻醇提物效果最佳。
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猪细小病毒7型PCR检测方法的建立及应用
作者:
严美君;杨涛涛;李润成;屈泰龙;葛猛;...
期刊:
中国兽医科学 ,2018年48(6):707-711 ISSN:1673-4696
作者机构:
[严美君; 杨涛涛; 李润成; 屈泰龙; 葛猛; 余兴龙] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128
关键词:
猪细小病毒7型;聚合酶链式反应;应用
摘要:
为评估猪细小病毒7型(porcine parvovirus 7,PPV7)在猪群中的流行,根据GenBank 中PPV7全基因组序列设计1对扩增PPV7 NS1基因的特异性引物,并建立PCR方法.对该引物的退火温度进行优化,且分析其特异性和敏感性.结果显示,在52~72 ℃退火温度范围内该对引物均能特异性扩增出目的基因片段,最低检测限为3.6×102 copies / L.对不同来源的282份组织样品和来自湖南省4个不同猪场的226份血清样品进行检测,结果,组织样品中PPV7检出率为55.0%(155/ 282),血清中PPV7检出率为10.2%(23/226).其中,屠宰猪组织样品中PPV7检出率最高(71.4%),而PPV7感染对猪的健康是否存在影响还不能确定.本研究结果为PPV7流行病学的研究奠定了一定的基础.
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褪黑激素对长毛兔毛囊细胞凋亡的影响
作者:
贺亮;黄冬维;程广龙;罗超;杨永新;...
期刊:
湖南农业大学学报(自然科学版) ,2018年44(3):309-313 ISSN:1007-1032
作者机构:
湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128;安徽省农业科学院畜牧兽医研究所, 安徽, 合肥, 230031;[贺亮; 罗超; 邓治邦] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128;[黄冬维; 程广龙; 杨永新; 赵小伟; 王小飞; 齐元霞; 赵辉玲] 安徽省农业科学院畜牧兽医研究所, 安徽, 合肥, 230031
关键词:
兔;褪黑激素;毛囊细胞;细胞凋亡;基因表达
摘要:
为研究褪黑激素对皖系长毛兔毛囊细胞凋亡的影响及相关机制,选择60只皖系长毛兔,随机均分成4组,1组不埋植褪黑激素(对照),另3组每只兔按25 mg(低剂量组)、40 mg(中剂量组)和55 mg(高剂量组)分别埋植褪黑激素,饲养70 d后,进行组织病理学观察和RNA的转录组高通量测序及qPCR表达分析。结果表明:通过组织切片观察,证实55 mg褪黑激素处理能有效抑制毛囊细胞凋亡,维持细胞正常形态;通过对高剂量组和对照组测序,得到25个差异表达基因,其中有14个基因上调,11个基因下调,涉及通路包括嗜T细胞病毒感染、坏死性凋亡、甲状腺癌、铁死亡、I型糖尿病和胰岛素信号通路,其中坏死性凋亡、铁死亡通路与长毛兔毛囊凋亡相关;选取4个与凋亡相关的差异表达基因进行荧光定量验证,得到新基因MSTRG.3561表达显著上调,SLC25A5表达下调,但差异无统计学意义。
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饲粮中添加表皮生长因子对断奶仔猪血清生化指标、血清游离氨基酸和小肠黏膜水解氨基酸含量的影响
作者:
朱繁;王丽霞;贾杏林;尹佳;杨焕胜;...
期刊:
动物营养学报 ,2018年30(7):2519-2528 ISSN:1006-267X
作者机构:
湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128;中国科学院亚热带农业生态研究所, 中国科学院亚热带农业生态过程重点实验室, 长沙, 410125;湖南师范大学生命科学学院,动物营养与人体健康实验室, 长沙, 410081;[朱繁] 湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128 中国科学院亚热带农业生态研究所, 中国科学院亚热带农业生态过程重点实验室, 长沙, 410125;[王丽霞; 尹佳] 湖南师范大学生命科学学院,动物营养与人体健康实验室, 长沙, 410081
关键词:
断奶仔猪;血清生化指标;氨基酸;肠道
摘要:
本试验旨在研究饲粮中添加表皮生长因子( EGF)对断奶仔猪血清生化指标、血清游离氨基酸和小肠黏膜水解氨基酸含量的影响。选取体重相近、健康的21日龄断奶仔猪42头,随机分成3组,每组14个重复,每个重复1头仔猪。Ⅰ组为对照组,饲喂基础饲粮; Ⅱ组和Ⅲ组分别饲喂在基础饲粮中添加200和400 μg /kg EGF的试验饲粮。试验期为14 d。结果表明: 1)饲粮中添加EGF对断奶仔猪平均日增重、平均日采食量和料重比没有显著影响( P>0.05) 。2)断奶后7 d,Ⅱ组血清尿酸含量显著高于Ⅰ组( P<0.05) ,而Ⅱ组和Ⅲ组血清免疫球蛋白A含量显著低于Ⅰ组( P<0.05) 。断奶后14 d,Ⅲ组血清肌酐含量显著低于Ⅰ组( P<0.05) ,且Ⅲ组血清谷草转氨酶/谷丙转氨酶值显著低于Ⅰ组和Ⅱ组( P<0.05) 。饲粮中添加EGF对断奶仔猪血清尿素氮、葡萄糖、总蛋白、白蛋白、球蛋白、免疫球蛋白M、免疫球蛋白G、胰岛素样生长因子-1、生长激素含量,白蛋白/球蛋白,谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性没有显著影响( P>0.05) 。3)断奶后7 d,Ⅱ组血清牛磺酸、丙氨酸、瓜氨酸和组氨酸含量显著低于Ⅲ组( P<0.05) ,Ⅱ组血清精氨酸、谷氨酸和丝氨酸含量显著低于Ⅰ组和Ⅲ组( P<0.05) ,各组之间其他血清氨基酸含量无显著差异( P>0.05) 。4)断奶后14 d,与Ⅰ组和Ⅲ组比,Ⅱ组空肠黏膜缬氨酸和回肠黏膜半胱氨酸含量显著升高( P<0.05) ,Ⅱ组空肠黏膜丝氨酸、谷氨酸、丙氨酸、半胱氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸和组氨酸含量也有升高趋势( P<0.10) 。综上所述,饲粮中添加高剂量EGF能够降低断奶仔猪血清免疫球蛋白A等生化指标含量,而饲粮中添加低剂量EGF能够降低血清和小肠黏膜部分氨基酸含量。
语种:
中文
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转基因抗虫蛋白Cry1Ac与表面活性剂作用的芘探针光谱分析
作者:
Liang Yunshan* ;Huang Zhijun;Liu Yisong;Qian Ziyan;Yan Biyue;...
期刊:
高等学校化学学报 ,2018年39(5):883-888 ISSN:0251-0790
通讯作者:
Liang Yunshan;Wang Zhi
作者机构:
[Yan Biyue; Qian Ziyan; Liang Yunshan; Wang Zhi; Huang Zhijun] Hunan Agr Univ, Coll Biosci & Biotechnol, Hunan Prov Key Lab Rural Ecosyst Hlth Dongting La, Changsha 410128, Hunan, Peoples R China.;[Liu Yisong] Hunan Agr Univ, Coll Vet Med, Natl & Local Union Engn Res Ctr Vet Herbal Med Re, Changsha 410128, Hunan, Peoples R China.
通讯机构:
[Liang, YS; Wang, Z] H;Hunan Agr Univ, Coll Biosci & Biotechnol, Hunan Prov Key Lab Rural Ecosyst Hlth Dongting La, Changsha 410128, Hunan, Peoples R China.
关键词:
芘;荧光;表面活性剂;牛血清蛋白;微环境
摘要:
以芘作为外源荧光探针,采用牛血清蛋白作为参照,考察了转基因抗虫蛋白Cry1Ac与4种表面活性剂相互作用的荧光光谱特征.结果表明,鼠李糖脂和Tween 80体系的芘荧光行为有相似的变化规律,可与蛋白质发生稳定的缔合过程.Cry1Ac蛋白的亲水性和分子极性较强,在表面活性剂浓度低时,可导致芘的I1/I3值较高.在阴离子、非离子表面活性剂胶团形成后,2种蛋白质的存在均不改变芘与表面活性剂的结合位点.十六烷基三甲基溴化铵对芘的荧光有一定猝灭作用,且在Cry1Ac蛋白介入下不能形成稳定的胶束.
语种:
中文
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桦木酸对酒精性肝损伤小鼠线粒体凋亡通路的影响
作者:
马玉容;夏伟;易想炼;欧朝萍;袁志航;...
期刊:
营养学报 ,2018年40(6):599-603 ISSN:0512-7955
作者机构:
湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128;湖南省兽药工程技术技术研究中心, 湖南省兽药工程技术技术研究中心, 长沙, 410128;湖南畜禽安全生产协同创新中心, 湖南畜禽安全生产协同创新中心, 长沙, 410128;[马玉容; 夏伟; 易想炼; 欧朝萍] 湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128;[袁志航] 湖南农业大学动物医学院, 长沙, 410128 湖南省兽药工程技术技术研究中心, 湖南省兽药工程技术技术研究中心, 长沙, 410128
关键词:
桦木酸;酒精;肝损伤;线粒体凋亡通路
摘要:
目的研究桦木酸(betulinic acid,BA)对酒精性肝损伤小鼠线粒体信号通路的影响。方法56只健康雄性小鼠随机分为8组,即正常对照组(NC),酒精模型组(MC),BA低、中、高剂量组(L-BA,M-BA, H-BA,按0.25、 0.5、1 mg/kg bw给与),BA低、中、高剂量与酒精联合组(L-BAA, M-BAA, H-BAA) 。NC、MC组灌胃1%的可溶性淀粉,其余各组灌胃混悬于可溶性淀粉中不同剂量的BA,1/d,连续14d后,除NC组,L-BA, M-BA,H-BA组灌胃生理盐水外,其余4组均按10 ml/kg灌胃50%酒精诱发酒精性肝损伤模型。检测血清细胞色素P450 2E1(CYP2E1)水平,采用Western blot检测肝脏线粒体信号通路中Bcl-2、Bax、Caspase-9和Caspase-3蛋白表达的变化。结果BA预处理后,抑制由酒精引起的CYP2E1水平升高,显著降低酒精致肝损伤小鼠Bax/Bcl-2比值,明显减少Caspase-9和Caspase-3蛋白表达量,且呈量效关系。结论说明BA对酒精诱导肝损伤有预防性的保护作用,这种保护作用可能与调控线粒体凋亡通路有关。
语种:
中文
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不同产地博落回果化学成分指纹图谱研究
作者:
胡南希;郑亚杰;唐其;刘兆颖;刘薇;...
期刊:
中草药 ,2018年49(18):4417-4423 ISSN:0253-2670
通讯作者:
Zheng, Y.-J.
作者机构:
湖南农业大学兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心,湖南长沙410128;湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128;湖南农业大学园艺园林学院,湖南长沙410128;湖南农业大学兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心,湖南长沙,410128;[刘薇] 刘薇
通讯机构:
[Zheng, Y.-J.] N;National and Local Union Engineering Research Center for the Veterinary Herbal Medicine Resources and Initiative, Hunan Agricultural University, Changsha, China
关键词:
博落回果;指纹图谱;产地;主成分分析;聚类分析;原阿片碱;别隐品碱;血根碱;白屈菜红碱
摘要:
目的构建博落回Macleaya cordata果化学成分指纹图谱,建立博落回果品质评价方法。方法根据湖南省长沙市地方标准2009年版测定博落回中原阿片碱、别隐品碱、血根碱和白屈菜红碱含量;采用高效液相色谱法构建基于不同产地的博落回果化学成分指纹图谱;利用主成分分析和聚类分析方法,分析博落回果中共有指纹峰、产地和药材品质的关联性。结果构建不同产地博落回果化学成分指纹图谱,确定11个共有指纹峰;主成分分析和聚类分析将8个产地的博落回果分为2大类,其中共有峰5、7、8、9和11对指纹图谱差异贡献较大,6号峰是指纹图谱参照峰的最佳选择。结论本实验建立的博落回果化学成分指纹图谱具有良好的精密度、重复性和稳定性,能够对不同产地博落回果进行品质评价。
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猪传染性胃肠炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
作者:
王赛;苏菲;袁秀芳;徐丽华;李军星;...
期刊:
中国兽医科学 ,2018年48(1):13-18 ISSN:1673-4696
作者机构:
湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128;浙江省农业科学院畜牧兽医研究所, 浙江, 杭州, 310021;[王赛] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所, 浙江, 杭州, 310021;[苏菲; 袁秀芳; 徐丽华; 李军星] 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所, 浙江, 杭州, 310021;[余兴龙] 湖南农业大学动物医学院, 湖南, 长沙, 410128
关键词:
传染性胃肠炎病毒;重组N蛋白;单克隆抗体
摘要:
以纯化的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)重组N蛋白免疫BALB/c小鼠,按照常规方法融合、筛选,最终获得2株抗TGEV N蛋白的杂交瘤细胞系,分别命名为2G7和2C2 。2株单抗亚类均为IgG1,腹水的间接ELISA效价均为1 ∶ 10~8。2株杂交瘤细胞连续培养20代,各代次的上清效价保持不变,均为1 ∶ 12 800,说明2株细胞分泌抗体的能力稳定。通过间接免疫荧光发现,制备的2株单克隆抗体能与感染TGEV的细胞发生特异性反应,在胞浆和细胞膜上有亮绿色荧光。结果表明,所制备的2株TGEV N蛋白的特异性单克隆抗体细胞株遗传稳定,分泌的抗体敏感性高,为TGEV病原检测奠定了基础。
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桦木酸对环磷酰胺致小鼠免疫器官氧化损伤的保护作用
作者:
易想炼;朱利娟;赵静;文利新;罗晨曦;...
期刊:
动物营养学报 ,2018年30(3):1199-1206 ISSN:1006-267X
作者机构:
[易想炼; 赵静; 罗晨曦; 黄淑贤; 邬静; 朱利娟; 文利新; 易金娥] 湖南农业大学动物医学院;[朱利娟] 长沙绿叶生物科技有限公司;[文利新; 易金娥] 湖南畜禽安全生产协同创新中心;[POZNIAK Bjazej] 弗罗茨瓦夫环境与生命科学大学兽医学院
关键词:
桦木酸;环磷酰胺;免疫器官;氧化应激
摘要:
为了研究桦木酸(BA)对环磷酰胺(Cy)诱导小鼠免疫器官氧化损伤的影响。将50只健康雄性昆明小鼠随机分为5组,即对照组、Cy组及0.05、0.50、5.00 mg / kg BW BA组。对照组和Cy组灌服1%的可溶性淀粉溶液,其余各组按不同剂量的BA灌服,连续14 d后,除对照组注射生理盐水外,其余4组均腹腔注射Cy(50 mg / kg BW)诱导氧化应激模型。收集血清、脾脏和胸腺,检测血清中谷丙转氨酶(ALT) 、谷草转氨酶(AST)活性及白蛋白(ALB) 、总蛋白(TP)含量,检测脾脏和胸腺超氧化物歧化酶(SOD) 、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px) 、过氧化氢酶(CAT)活性及还原型谷胱甘肽(GSH) 、丙二醛(MDA)含量。结果显示:1)对于体重,对照组与Cy组无显著差异(P>0.05),各剂量BA组与Cy组无显著差异(P>0.05) 。2)与对照组相比,Cy极显著提高了血清AST、ALT活性(P < 0.01),而5.00 mg / kg BW BA极显著缓解了这一现象(P<0.01) 。3)与对照组相比, Cy引起了脾脏指数和胸腺指数的显著降低(P < 0.05),而0.05 mg / kg BW BA显著缓解了胸腺指数的降低(P<0.05) 。4)与对照组相比,Cy组胸腺SOD活性、胸腺CAT活性、脾脏GSH含量显著或极显著下降(P<0.05或P<0.01),脾脏MDA含量极显著升高(P<0.01);与Cy组相比,0.50 mg / kg BW BA组显著或极显著提高了脾脏和胸腺GSH-Px和CAT活性及脾脏GSH含量(P <0.05或P <0.01),极显著降低脾脏MDA含量(P < 0.01),但极显著降低了胸腺SOD活性(P<0.01);与Cy组相比,5.00 mg / kg BW BA组显著或极显著提高了脾脏和胸腺GSH-Px和CAT活性(P<0.05或P<0.01),极显著降低脾脏MDA含量(P<0.01) 。由此可见,BA能够改善Cy引起的小鼠免疫器官的氧化应激,对Cy诱导的氧化损伤有预防性的保护作用。
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桦木酸对环磷酰胺致小鼠肠道氧化损伤的影响
作者:
王喜红;朱利娟;易想炼;赵静;向思亭;...
期刊:
畜牧兽医学报 ,2018年49(4):818-824 ISSN:0366-6964
作者机构:
[王喜红; 朱利娟; 易想炼; 赵静; 向思亭; 谭柱良; 袁志航; 易金娥] 湖南农业大学动物医学院;[易金娥] 湖南畜禽安全生产协同创新中心
关键词:
桦木酸;氧化损伤;环磷酰胺;肠道黏膜
摘要:
旨在研究桦木酸(betulinic acid,BA)对环磷酰胺(cyclophosphamide,Cy)致小鼠肠道氧化损伤的影响。将健康雄性昆明小鼠随机分为5组:对照(NC)组、Cy组、0.5mg·kg~(-1) BA组、5.0mg·kg~(-1) BA组、50.0mg·kg~(-1) BA组。NC组和Cy组灌服1%的可溶性淀粉,其余各组按不同剂量的BA混悬于可溶性淀粉中灌服,1次·d~(-1),连续14d后,除NC组注射生理盐水外,其余4组均连续2d腹腔注射Cy(50mg·kg~(-1))诱导肠氧化损伤模型。检测肝、脾和胸腺指数,肠黏膜中分泌型免疫球蛋白α(secretory immunoglobulin a,SIgA)水平,血清和肠道中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量变化。结果表明:BA预处理后,能缓解Cy引起的肝、脾和胸腺指数下降,促进肠黏膜SIgA的分泌,不同程度缓解了Cy引起小鼠血清和小肠MDA、GSH含量的升高,以中剂量效果最佳,BA对SOD活力无影响。结果表明BA能改善Cy引起的小鼠肠道脂质过氧化及提高肠道中SIgA的分泌,对Cy诱导的肠道氧化损伤有预防性的保护作用。
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