作者： 章瑶;穆德添;周宇;陆英;柳亦松;...

期刊： 生物工程学报,2023年39(1):286-303 ISSN：1000-3061

作者机构： [唐其] 湖南农业大学园艺学院,湖南长沙410128;湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128;[唐其] 湖南农业大学国家中药材生产(湖南)技术中心,湖南长沙410128;[左梦婷; 柳亦松; 周宇; 刘兆颖; 陆英; 董壮; 章瑶; 穆德添] 湖南农业大学

关键词： 钩吻;实时荧光定量PCR;看家基因;萜类吲哚生物碱;钩吻素己

摘要： 钩吻是我国的一种传统中草药，具有重要的药用价值，吲哚萜类生物碱为其主要的活性组分。为研究钩吻不同部位最适看家基因，以钩吻4个不同部位根皮、茎段、叶片和花序为材料，通过实时荧光定量PCR技术，以及GeNorm、NormFinder、BestKeeper、ΔCT和Refinder软件对10个候选看家基因（18S、GAPDH、Actin、TUA、TUB、SAND、EF-1α、UBC、UBQ和cdc25）进行表达稳定性评估。结果显示，EF-1α在钩吻的4个部位中均稳定表达，为最适的看家基因。同时，为研究与生物碱合成相关基因的表达情况，基于“基因组+全长转录组+代谢组”共表达模式筛选出钩吻生物碱合成通路上18个相关基因（AS、AnPRT、PRAI、IGPS、TSA、TSB、TDC、GES、G8H、8-HGO、IS、7-DLS、7-DLGT、7-DLH、LAMT、SLS、STR和SGD），以为看家基因EF-1α为参照，利用qRT-PCR技术对这18个候选基因表达情况进行分析，结果发现这些基因的表达量与钩吻素己含量变化呈相关性，推测其可能参与钩吻生物碱钩吻素己的合成。

语种： 中文

作者： 邓沛杰;宋泽和;罗国升;刘亚力;蒋小丰;...

期刊： 动物营养学报,2022年34(11):7082-7093 ISSN：1006-267X

作者机构： [刘自逵; 邓沛杰] 湖南农业大学动物医学院,长沙410128;[刘自逵; 邓沛杰] 湖南农业大学动物科学技术学院,湖南家禽安全生产工程技术中心,长沙410128;[刘亚力; 罗国升; 蒋小丰] 湖南普菲克生物科技有限公司,长沙410128;[贺喜; 宋泽和] 湖南农业大学

关键词： 枯草芽孢杆菌;肉鸡;产气荚膜梭菌;生长性能;肠道健康

摘要： 本试验旨在研究枯草芽孢杆菌对球虫和产气荚膜梭菌混合攻毒肉鸡生长性能及肠道健康的影响。选用1日龄雄性爱拔益加肉鸡720只,随机分成8个组,每组6个重复,每个重复15只。试验采用2×4因子设计,在攻毒与不攻毒的基础下,分别设置4个处理,分别饲喂基础饲粮、基础饲粮+ 300 mg/kg枯草芽孢杆菌、基础饲粮+ 500 mg/kg枯草芽孢杆菌、基础饲粮+ 12 mg/kg恩拉霉素。攻毒组肉鸡分别于14日龄攻毒球虫、19 ~ 21日龄攻毒产气荚膜梭菌。肉鸡笼养,自由采食和饮水,试验期为42 d。结果表明:1)攻毒显著提高了肉鸡22 ~ 42日龄的料重比(P<0.05),显著提高了肉鸡28、35日龄血清二胺氧化酶活性及35日龄血清脂多糖含量(P<0.05),显著降低了肉鸡28、35日龄空肠和回肠绒毛高度、绒毛高度/隐窝深度(P<0.05),显著提高了肉鸡28、35日龄空肠和回肠隐窝深度(P<0.05),显著提高了肉鸡28、35日龄空肠肿瘤坏死因子- α(TNF-α)、干扰素- γ(IFN-γ)、核转录因子- κB (NF-κB)、白细胞介素- 6 (IL-6) mRNA表达量(P<0.05),显著提高了肉鸡28日龄空肠白细胞介素- 12(IL-12) mRNA表达量(P<0.05)。2)与基础饲粮、添加500 mg/kg枯草芽孢杆菌相比,添加300 mg/kg枯草芽孢杆菌显著提高了肉鸡1 ~ 21日龄、22 ~ 42日龄的平均日增重、末重(P<0.05),显著降低了肉鸡22 ~ 42日龄的料重比(P<0.05)。与基础饲粮相比,添加500 mg/kg枯草芽孢杆菌显著降低了肉鸡28日龄血清脂多糖含量(P<0.05),添加300 mg/kg枯草芽孢杆菌显著提高了肉鸡28、35日龄的回肠的绒毛高度(P<0.05),添加12 mg/kg恩拉霉素、300 mg/kg枯草芽孢杆菌显著降低了肉鸡35日龄的空肠TNF-α、NF-κB和IL-6 mRNA表达量(P<0.05)。3)攻毒与饲粮对肉鸡22 ~ 42日龄料重比、35日龄肠道形态(除空肠隐窝深度)、28日龄空肠NF-κB和IL-6 mRNA表达量以及35日龄空肠TNF-α、NF-κB和IL-6 mRNA表达量的影响存在交互效应(P<0.05)。由此可见,枯草芽孢杆菌能缓解球虫和产气荚膜梭菌混合攻毒对肉鸡造成的负面影响,一定程度上提长生产性能、改善肠道健康,且添加300 mg/kg枯草芽孢杆菌的效果优于添加500 mg/kg。

语种： 中文

作者： 吴聪颖;伍芷锋;程天印

期刊： 中国病原生物学杂志,2022年17(2):186-190 ISSN：1673-5234

作者机构： [程天印; 伍芷锋; 吴聪颖] 湖南农业大学动物医学院

关键词： 褐黄血蜱

摘要： 目的 对褐黄血蜱组织蛋白酶B（cathepsin L-like cysteine proteinase B,cathepsin L-lcp B）基因进行克隆及表达分析。方法 基于褐黄血蜱唾液腺转录组文库中的Contig731序列设计引物，RACE法扩增cathepsin L-lcp BcDNA（Hf-CLlCPb）全长，qPCR法分析Hf-CLlCPb在不同吸血状态下雌成蜱不同组织的表达水平。结果 Hf-CLlCPb全长1 547 bp, ORF框长1 005 bp,编码355个氨基酸；该基因在半饱血、饱血褐黄血蜱（♀）中的唾液腺表达量最高，卵巢、中肠、体壳次之；Hf-CLlCPb在半饱血褐黄血蜱（♀）中的表达量高于饱血褐黄血蜱（♀）。结论 成功克隆出褐黄血蜱Hf-CLlCPb基因全长，qPCR检测Hf-CLlCPb基因在褐黄血蜱唾液腺中高表达。

语种： 中文

作者： 许文博;吴丽梅;刘鑫;李升;黄复深;...

期刊： 畜牧兽医学报,2022年53(6):1858-1869 ISSN：0366-6964

作者机构： [黄复深] 湖南农业大学动物医学院,长沙410128;[黄复深] 湖南农业大学,湖南兽药工程技术研究中心,长沙410128;[刘鑫; 吴丽梅; 李润成; 许文博; 李升] 湖南农业大学

关键词： 多杀性巴氏杆菌CS株;全基因组序列;致病基因组学;基因多态性

摘要： 通过对多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)CS株全基因组的毒力基因分析,以期从基因组角度了解P.multocida CS的致病性机理。常规方法分离细菌,并进行毒力鉴定。基于二代测序平台对P.multocida CS进行测序,应用比较基因组学方法将其与GenBank中具全基因组来源于不同地域和宿主的P.multocida基因组进行比较分析。结果显示:猪肺疫病料中分离细菌滴鼻感染小鼠,测得其LD_(50)为5×10~2 CFU·mL~(-1),显示较强毒性。将测序后的P.multocida CS株全基因组信息提交至NCBI,获得登录号SUB11119617。通过对P.multocida CS全基因组序列的分析表明,P.multocida CS株全基因组大小为2 599 048bp,G+C含量为39.932%,编码CDs为2 580个,占整个基因组长度的69.6%,编码CDs的平均长度为952bp。此外还有53个tRNA基因和3个rRNA基因。有87.95%的编码CDs可进行COGs功能分类,29个为功能未知基因。利用RaAXML的最大释然法(maximum likelihood,ML)进行系统进化分析发现,P.multocida CS株与1个猪源性、2个牛源血清A型毒株,和1个猪源性D型毒株有较近的亲缘关系。P.multocida CS株含254个毒力相关基因,分为4大类11小类。其中铁摄取系统、黏附系统、分泌系统和双组分调控系统相关的多个基因在不同的毒株(包括血清型)的分布存在多态性。通过对基因出现频率的分析发现,铁摄取系统相关的tbpA和铁复合物外膜受体蛋白基因(iron complex outer membrane receptor protein gene,irp)以及黏附的相关的ppdD和ompA基因在血清A型出现的频率较高,这是否与不同菌株的毒力差异相关有待进一步证实。P.multocida CS的分泌系统由Ⅰ型(hly基因)、Tat型、Sec- SRP型3种类型组成。其中,hlyD基因在不同的血清型的分布频率存在多态性。P.multocidaCS株的双组分信号转导系统(TCSs)由16个调节相关基因,12个感应相关基因和2个有hybrid相关基因。这些基因在不同血清型分布的多态性与不同菌株毒力的关系有待进一步研究。综上所述,组成铁摄取系统、黏附系统、分泌系统和双组分调控系统的基因在不同的血清以及同一血清型内出现频率存在多态性,它们与P.multocida菌株毒力强弱的关系有待进一步研究。

语种： 中文

作者： Yao, Bin;Chen, Xia;Zhou, Kun;Luo, Zirui;Li, Peipei;...

期刊： 生物炭,2022年4(1):665-677 ISSN：2524-7972

通讯作者： Yaoyu Zhou

作者机构： [Zhou, Kun; Luo, Zirui; Yao, Bin; Chen, Xia; Zhou, Yaoyu; Li, Peipei] Hunan Agr Univ, Hunan Int Sci & Technol Cooperat Base Agr Typ Pol, Coll Resources & Environm, Changsha 410128, Peoples R China.;[Yang, Zihui] Hunan Agr Univ, Coll Vet Med, Changsha 410128, Peoples R China.

通讯机构： [Yaoyu Zhou] H;Hunan International Scientific and Technological Cooperation Base of Agricultural Typical Pollution Remediation and Wetland Protection, College of Resources and Environment, Hunan Agricultural University, Changsha, China

关键词： Persulfate;Biochar;Manganese ferrite;Redox cycle;Organic arsenic compounds

摘要： Direct chemical oxidation and pure adsorption could not effectively remove p-Arsanilic acid (p-ASA) and the released inorganic arsenic. Herein, one novel biochar supported MnFe2O4 (MFB) was synthesized and adopted for p-ASA degradation and synchronous adsorption of the generated inorganic arsenic. The MFB/persulfate (PS) system could remain effective under a wide pH range (3.0–9.0), and the released arsenic could be removed simultaneously by MFB. Mechanism investigation revealed that the functional groups of MFB (i.e. O–C=O and C=O), Fe and Mn oxides on MFB all contributed to PS activation. O2·− and 1O2 were the main reactive oxygen species (ROS) responsible for p-ASA degradation, and 1O2 was the predominant ROS. Besides, the MFB possessed superior reusability. Therefore, it is expected to develop a potential method for organic arsenic contaminants removal via an oxidation-adsorption process, and the results could also shed light on the better understanding of the PS activation mechanisms. Graphical Abstract: [Figure not available: see fulltext.] © 2022, The Author(s).

语种： 英文

作者： Chang, Renxu;Sun, Xudong;Jia, Hongdou;Xu, Qiushi;Dong, Zhihao;...

期刊： 畜牧与生物技术杂志(英文版),2022年13(1):1458-1468 ISSN：1674-9782

通讯作者： Xu, C

作者机构： [Xu, C; Chang, Renxu; Xu, Chuang] China Agr Univ, Coll Vet Med, Yuan Ming Yuan West Rd 2, Beijing 100193, Peoples R China.;[Chang, Renxu] Hunan Agr Univ, Coll Vet Med, Changsha 410128, Peoples R China.;[Sun, Xudong; Luo, Shengbin; Jia, Hongdou; Dong, Zhihao; Xu, Chuang; Tang, Yan; Xu, Qiushi] Heilongjiang Bayi Agr Univ, Coll Anim Sci & Vet Med, Heilongjiang Prov Key Lab Prevent & Control Bovin, 5 Xinyang Rd, Daqing 163319, Heilongjiang, Peoples R China.;[Loor, Juan J.; Jiang, Qianming] Univ Illinois, Dept Anim Sci, Mammalian NutriPhysioGen, Urbana, IL 61801 USA.;[Loor, Juan J.; Jiang, Qianming] Univ Illinois, Div Nutr Sci, Urbana, IL 61801 USA.

通讯机构： [Xu, C ] C;China Agr Univ, Coll Vet Med, Yuan Ming Yuan West Rd 2, Beijing 100193, Peoples R China.

关键词： Autophagy;Bovine mammary epithelial cells;NFE2L2;Oxidative stress

摘要： In early lactation, bovine mammary epithelial cells undergo serious metabolic challenges and oxidative stress both of which could be alleviated by activation of autophagy. Nuclear factor erythroid 2 related factor 2 (NFE2L2), a master regulator of cellular redox homeostasis, plays an important role in the regulation of autophagy and oxidative stress. Thus, the objective of this study was to investigate the role of NFE2L2-mediated autophagy on oxidative stress of bovine mammary epithelial cells in response to exogenous free fatty acids (FFA). Exogenous FFA induced linear and quadratic decreases in activities of glutathione peroxidase (GSH-Px), catalase (CAT), and superoxide dismutase (SOD), and increases in the contents of reactive oxygen species (ROS) and malondialdehyde (MDA). Protein abundance of LC3-phosphatidylethanolamine conjugate (LC3-II) and the number of autophagosomes and autolysosomes decreased in a dose-dependent manner, while protein abundance of p62 increased in cells challenged with FFA. Activation of autophagy via pre-treatment with Rap attenuated the FFA-induced ROS accumulation. Importantly, FFA inhibited protein abundance of NFE2L2 and the translocation of NFE2L2 into the nucleus. Knockdown of NFE2L2 by siRNA decreased protein abundance of LC3-II, while it increased protein abundance of p62. Furthermore, sulforaphane (SFN) pre-treatment attenuated the FFA-induced oxidative stress by activating NFE2L2-mediated autophagy. The data suggested that NFE2L2-mediated autophagy is an important antioxidant mechanism in bovine mammary epithelial cells experiencing increased FFA loads.

语种： 英文

作者： 严思思;李鑫;刘翔燕;刘水平;周迎芳;...

期刊： 中国农业大学学报,2022年27(8):162-174 ISSN：1007-4333

作者机构： [严思思] 中南林业科技大学 食品科学与工程学院/稻谷及副产物深加工国家工程实验室,长沙410004;[严思思] 湖南农业大学动物医学院/畜禽保健湖南省工程研究中心,长沙410128;[罗非君; 林亲录] 中南林业科技大学;[周迎芳; 王吉; 文利新; 刘水平; 刘翔燕; 李鑫] 湖南农业大学

关键词： 猪油;橄榄油;菜籽油;巨噬细胞

摘要： 为分析两种脂肪供能条件下3种不同油脂饮食对小鼠腹股沟皮下脂肪沉积及其巨噬细胞分型的影响,90只C57BL/6J小鼠被随机分为6组,分别饲喂低脂猪油(Lar-10%)、低脂菜籽油(Rap-10%)、低脂橄榄油(Oli-10%)、高脂猪油(Lar-30%)、高脂菜籽油(Rap-30%)和高脂橄榄油(Oli-30%),16周后解剖取腹股沟皮下脂肪组织,并对其进行苏木精-伊红染色,活性氧(Reactive oxygen species,ROS)含量检测,M1、M2型巨噬细胞标记物(CD11c和CD206)荧光双染,并通过ELISA检测其含量。结果表明:1)在低脂饮食条件下,三种油脂对小鼠腹股沟皮下脂肪组织重量、脂肪细胞横截面积、腹股沟皮下脂肪ROS含量均无显著影响(P>0.05);2)随着脂肪供能水平的提高,小鼠腹股沟皮下脂肪沉积显著增加(P<0.05),在高脂饮食条件下,Lar-30%组的小鼠腹股沟皮下脂肪组织重量显著高于Rap-30%和Oli-30%组(P<0.05),并且相对于其他两组,Oli-30%组小鼠腹股沟皮下脂肪组织中ROS含量极显著降低(P<0.01);3)高脂饮食会增加脂肪组织中巨噬细胞标记物CD11c和CD206的含量,但摄入橄榄油的小鼠CD206/CD11c比值显著高于摄入猪油和菜籽油的小鼠(P<0.05)。综上,降低脂肪供能水平能有效减少脂肪沉积,且与摄入猪油和菜籽油相比,摄入橄榄油可能通过增加CD206/CD11c比值,抑制巨噬细胞向M1型转化,减少脂肪组织中ROS的产生,降低炎症,从而减少脂肪沉积。

语种： 中文

作者： 廖帆;谭磊;雷磊;湛洋;段德勇;...

期刊： 中国兽医科学,2022年52(6):679-684 ISSN：1673-4696

作者机构： [廖帆; 谭磊; 雷磊; 湛洋; 段德勇; 王爱兵] 湖南农业大学动物医学院

关键词： 猪圆环病毒2型;ORF1基因;环介导等温扩增技术;可视化

摘要： 为建立一种适用于猪圆环病毒2型（PCV2）现场、快速、可视化检测方法，本研究根据PCV2 ORF1基因中的保守序列设计合适的环介导等温扩增（LAMP）引物对，优化反应体系及条件，并评估该方法的灵敏度和特异性。结果显示，63 ℃恒温扩增45 min即可出现梯形条带，检测下限为1.0×101 copies/μL，较普通PCR敏感性提高100倍，且当产物中加入SYBR Green Ⅰ染料后可实现可视化检测。应用该方法对72份临床样品进行检测，结果，PCV2阳性率占47.2%（34/72），与qPCR检测的符合率为98.6%（71/72），与普通PCR的符合率为94.4%（68/72）。结果表明，该基于LAMP的检测方法具有敏感特异、简便快捷、可视化的特点，为PCV2临床检测提供了一种新的选择。

语种： 中文

作者： 周昭彬;丁亚南;白心亮;宋泽和;贺喜;...

期刊： 动物营养学报,2022年34(8):5000-5010 ISSN：1006-267X

通讯作者： He, X.;Liu, Z.

作者机构： [周昭彬; 刘自逵] College of Animal Medicine, Hunan Agricultural University, Changsha, 410128, China;[宋泽和; 贺喜; 丁亚南] College of Animal Science and Technology, Hunan Agricultural University, Changsha, 410128, China;[白心亮] Inner Mongolia Ever Brilliance Biotechnology Co., Ltd., Tongliao, 028400, China

通讯机构： [He, X.; Liu, Z.] C;College of Animal Medicine, China;College of Animal Science and Technology, China

关键词： 水飞蓟素;快大型黄羽肉鸡;生长性能;屠宰性能;脂质代谢;胆汁酸代谢

摘要： 本试验旨在研究水飞蓟素对快大型黄羽肉鸡生长性能、屠宰性能、脂质代谢和胆汁酸代谢相关基因表达的影响。试验选取288羽1日龄的快大型黄羽肉鸡母雏,随机分为4个组,每组6个重复,每个重复12羽。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别饲喂在基础饲粮中添加250(低剂量) 、500(中剂量)和750 g/t(高剂量)水飞蓟素的饲粮。试验期56 d,其中1 ~ 28日龄为试验前期,29 ~ 56日龄为试验后期。结果表明:1)与对照组相比,饲粮中添加水飞蓟素可以显著提高黄羽肉鸡各阶段的末重、平均日增重以及前期平均日采食量(P<0.05),并显著降低各阶段料重比(P<0.05) 。2)与对照组相比,饲粮中添加中、高剂量水飞蓟素能够显著降低黄羽肉鸡腹脂率(P<0.05) 。3)与对照组相比,饲粮中添加水飞蓟素能够显著提高黄羽肉鸡28日龄血清高密度脂蛋白胆固醇含量(高剂量除外),显著降低28和56日龄血清低密度脂蛋白胆固醇含量(P < 0.05);饲粮中添加低、中剂量水飞蓟素能够显著降低黄羽肉鸡56日龄血清甘油三酯含量(P < 0.05) 。4)与对照组相比,饲粮中添加水飞蓟素可以显著降低黄羽肉鸡28日龄肝脏胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1) mRNA相对表达量(P<0.05),显著提高28日龄肝脏法尼酯X受体(FXR) 、胆汁酸盐输出泵(BSEP)和多药耐药蛋白2(MRP2)(低剂量除外) mRNA相对表达量(P<0.05);饲粮中添加水飞蓟素能够显著提高黄羽肉鸡56日龄肝脏BSEP和MRP2(低剂量除外) mRNA相对表达量(P < 0.05),饲粮中添加中、高剂量水飞蓟素能够显著降低56日龄肝脏CYP7A1 mRNA相对表达量(P < 0.05),饲粮中添加低、高剂量水飞蓟素能显著提高56日龄肝脏FXR mRNA相对表达量(P<0.05) 。综上所述,饲粮中添加水飞蓟素可以通过调节肝脏胆汁酸合成和转运,改善脂质代谢,进而降低黄羽肉鸡腹脂率并提高屠宰率和全净膛率,并提升肉鸡生长性能,其中以前期添加高剂量(750 g/t) 、后期添加中剂量(500 g/t)为宜。

语种： 中文

作者： 周昭彬;王维维;徐钰栋;赖宇谦;白心亮;...

期刊： 动物营养学报,2022年34(12):7686-7700 ISSN：1006-267X

通讯作者： He, X.;Liu, Z.

作者机构： [赖宇谦; 周昭彬; 徐钰栋; 刘自逵; 王维维] College of Animal Medicine, Hunan Agricultural University, Changsha, 410125, China;[白心亮] Inner Mongolia Ever Brilliance Biotechnology Co., Ltd., Tongliao, 028400, China;[贺喜; 宋泽和] College of Animal Science and Technology, Hunan Agricultural University, Changsha, 410128, China

通讯机构： [Liu, Z.; He, X.] C;College of Animal Medicine, China;College of Animal Science and Technology, China

关键词： 水飞蓟素;快速型黄羽肉鸡;抗氧化能力;免疫功能;肠道菌群

摘要： 本试验旨在研究水飞蓟素对快速型黄羽肉鸡抗氧化能力、免疫功能及肠道菌群的影响。试验选取288羽1日龄的黄羽母雏鸡,随机分为4组,每组6个重复,每个重复12羽。对照组(CON组)饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加250 (S250组)、500 (S500组)、750 mg/kg(S750组)的水飞蓟素。试验全期56 d,1 ~ 28日龄为试验前期,29 ~ 56日龄为试验后期。结果表明:1)与CON组相比,试验前期,S250组、S500组、S750组肝脏总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)、核因子E2相关因子2 (Nrf2) mRNA表达量显著升高(P <0.05),S500组肝脏SOD和过氧化氢酶(CAT)活性显著升高(P <0.05);试验后期,S250组、S500组、S750组肝脏T-AOC和GCLC mRNA表达量显著升高(P<0.05),S250组肝脏CAT和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著升高(P<0.05),S500组、S750组肝脏Nrf2 mRNA表达量显著降低(P<0.05)。2)与CON组相比,试验前期,S500组、S750组空肠黏膜干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-6(IL-6)、免疫球蛋白M(IgM) mRNA表达量显著升高(P<0.05),S250组、S500组、S750组空肠黏膜免疫球蛋白G(IgG) mRNA表达量显著降低(P<0.05);试验后期,S250组、S500组空肠黏膜IFN-γ、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6、IgG mRNA表达量显著升高(P<0.05),S250组、S500组、S750组空肠黏膜IgM mRNA表达量显著降低(P <0.05)。3)与CON组相比,试验前期,S250组、S500组、S750组盲肠菌群Chao1、Goods_coverage、Shannon、Simpson和Observed_species指数均显著升高(P<0.05)。4)与CON组相比,试验前期,S250组、S500组、S750组盲肠厚壁菌门(Firmicutes)和粪杆菌属(Faecalibacterium)相对丰度均显著升高(P<0.05),盲肠拟杆菌门(Bacteroidetes)、另枝菌属(Alistipes)、AF12相对丰度显著降低(P<0.05);试验后期,S750组盲肠软壁菌门(Tenericutes)相对丰度显著降低(P<0.05),S500组盲肠布劳特氏菌属(Blautia)相对丰度显著升高(P<0.05)。5)试验前期,CON组肉鸡盲肠的优势菌属为Alistipes、HB2_32_21、AF12和科尔韦尔氏菌属(Colwellia),S250组盲肠的优势菌属为Faecalibacterium和颤螺菌属(Oscillospira),S500组盲肠的优势菌属为乳杆菌属(Lactobacillus)。试验后期,S250组盲肠的优势菌属为双歧杆菌属(Bifidobacterium),S500组盲肠的优势菌属为Anaerofustis。由此可见,饲粮中添加水飞蓟素可以增强快速型黄羽肉鸡肝脏抗氧化能力和空肠黏膜免疫功能,优化盲肠菌群组成,试验前期、后期均以饲粮中添加中剂量(500 mg/kg)水飞蓟素为宜。

语种： 中文

作者： 李丹;徐义葳;程天印

期刊： 中国病原生物学杂志,2022年17(8):924-928,933 ISSN：1673-5234

作者机构： [李丹; 程天印; 徐义葳] 湖南农业大学动物医学院

关键词： 褐黄血蜱卵;酶;蛋白酶抑制剂

摘要： 目的 分析新产褐黄血蜱卵原生质蛋白及功能,揭示蜱胚发育的物质需求,为创新免疫控蜱策略奠定基础.方法 采用LC/MS/MS技术,搜索唾液腺转录组文库鉴定褐黄血蜱卵原生质蛋白和高丰度卵成分.结果 检获特异性肽段503条,由此鉴定多肽137条,高可信的82条,属于79种蛋白,其中34种已知功能的分别属于酶类、蛋白酶抑制剂、转运蛋白、蛋白合成与修饰、免疫相关蛋白等五类;序列比对表明,在抑制剂和转运蛋白两类中,成员有明显的家族性;定量分析显示,在卵蛋白中,丰度最高的蛋白是contig_43009+19714,另外三种分别为contig_42244+44787、contig_195、contig_12613,其丰度排名依次为第2、6、7.电泳显示,新鲜卵蛋白大小25-400 ku之间,但分布不均,在近120 ku、90 ku等9处形成浓染条带;切带分析显示,9个条带中的高丰度蛋白均为contig_43009、contig_19714、contig_42244、contig_44787等Vn片段,说明蜱卵产出时其内的Vn(或Vg)已降解成大小不同的肽段.结论 新产褐黄血蜱卵原生质蛋白具有多样性、系统性和家族性.

语种： 中文

作者： Liu, Shuiping;Mao, Xinru;Ge, Lei;Hou, Lili;Le, Guannan;...

期刊： 动物营养(英文),2022年8(1):300-309 ISSN：2405-6545

通讯作者： Huang, KH

作者机构： [Le, Guannan; Ge, Lei; Liu, Shuiping; Huang, Kehe; Hou, Lili; Mao, Xinru; Gan, Fang] Nanjing Agr Univ, Coll Vet Med, Nanjing 210095, Peoples R China.;[Le, Guannan; Ge, Lei; Liu, Shuiping; Huang, Kehe; Hou, Lili; Mao, Xinru; Gan, Fang] Nanjing Agr Univ, Inst Nutr & Metab Disorders Domest Anim & Fowls, Nanjing 210095, Peoples R China.;[Le, Guannan; Ge, Lei; Liu, Shuiping; Huang, Kehe; Hou, Lili; Mao, Xinru; Gan, Fang] Nanjing Agr Univ, Coll Vet Med, MOE Joint Int Res Lab Anim Hlth & Food Safety, Nanjing 210095, Peoples R China.;[Wen, Lixin] Hunan Agr Univ, Coll Vet Med, Changsha 410128, Peoples R China.

通讯机构： [Huang, KH ] N;Nanjing Agr Univ, Coll Vet Med, Nanjing 210095, Peoples R China.;Nanjing Agr Univ, Inst Nutr & Metab Disorders Domest Anim & Fowls, Nanjing 210095, Peoples R China.;Nanjing Agr Univ, Coll Vet Med, MOE Joint Int Res Lab Anim Hlth & Food Safety, Nanjing 210095, Peoples R China.

关键词： Deoxynivalenol;Phenethyl isothiocyanate;Autophagy;Oxidative damage;Porcine intestinal epithelial cell

摘要： Deoxynivalenol (DON) is considered to be the most harmful mycotoxin that affects the intestinal health of animals and humans. Phenethyl isothiocyanate (PEITC) in feedstuff is an anti-nutritional factor and impairs nutrient digestion and absorption in the animal intestinal. In the current study, we aimed to explore the effects of PEITC on DON-induced apoptosis, intestinal tight junction disorder, and its potential molecular mechanism in the porcine jejunum epithelial cell line (IPEC-J2). Our results indicated that PEITC treatment markedly alleviated DON-induced cytotoxicity, decreasing the apoptotic cell percentage and pro-apoptotic mRNA/protein levels, and increasing zonula occludens-1 (ZO-1), occludin and claudin-1 mRNA/protein expression. Meanwhile, PEITC treatment ameliorated DON-induced an increase of the inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase 2 (COX-2) mRNA levels and intracellular reactive oxygen species (ROS) level, and a decrease of glutathione peroxidase 1 (GPx1), superoxide dismutase 2 (SOD2), catalase (CAT) and heme oxygenase 1 (HO-1) mRNA levels. Additionally, PEITC treatment significantly down-regulated autophagy-related protein 5 (ATG5), beclin-1 and microtubule-associated protein 1 light chain 3B (LC3-Ⅱ) mRNA/protein levels, decreased the number of green fluorescent protein-microtubule-associated protein 1 light-chain 3 (GFP-LC3) puncta and phosphatidylinositol 3 kinase (PI3K) protein expression, and up-regulated phospho-protein kinase B (p-Akt) and phospho-mammalian target of rapamycin (p-mTOR) protein expression against DON. However, the activation of autophagy by rapamycin, an autophagy agonist, abolished the protective effects of PEITC against DON-induced cytotoxicity, apoptosis and intestinal tight junction disorder. Collectively, PEITC could confer protection against DON-induced porcine intestinal epithelial cell injury by suppressing ROS-mediated autophagy. © 2021 Chinese Association of Animal Science and Veterinary Medicine

语种： 英文

作者： 汤起武;谭胜国;葛玲瑞;李运虎;田清武;...

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2022年48(1):87-94,119 ISSN：1007-1032

作者机构： [谭胜国; 葛玲瑞; 李运虎; 汤起武] 湖南生物机电职业技术学院动物科技学院;[田清武] 湘西民族职业技术学院成教部;[余兴龙] 湖南农业大学动物医学院

关键词： 湘西黄牛;粪源;大肠埃希菌;耐药性;耐药基因;多位点测序分型

摘要： 为了解湘西黄牛粪源大肠埃希菌的耐药情况,从湘西黄牛主产区花垣县和凤凰县6个不同规模的湘西黄牛养殖场采集黄牛肛门拭子样品,用麦康凯培养基和大肠埃希菌特异性引物分离、鉴定大肠埃希菌;采用K-B法对分离的大肠埃希菌进行5类共18种常用抗菌药物的敏感性试验;利用超高通量荧光定量PCR对16株多重耐药大肠埃希菌的7类共22种耐药基因进行检测;用大肠埃希菌8个管家基因对此16株分离株进行多位点序列分型(MLST),并运用goeBURST程序和MEGA 7.0对其进行ST聚类分析和进化树分析。结果表明:从采集的206份黄牛肛门拭子样品中共分离、鉴定出大肠埃希菌170株;分离自各牛场的大肠埃希菌对四环素、多西环素、氨苄西林、复方新诺明和甲氧苄氨嘧啶的耐药性较高,耐药性最高的牛场对这5种抗菌药物的耐药率分别为29.63%、 16.67%、22.22%、16.67%、33.33%,共有16株多重耐药菌,有8种耐药谱型;有acrA-01(100.00%)、fox5(81.25%)、 sul1(68.75%)、sul2(75.00%)、folA(100.00%)、tetR-02(81.25%)、intI-1(clinic)(68.75%)和tnpA-01(50.00%)等6类8种耐药基因被检出;共获得11种ST型,其中,有9种新的ST型;16株分离株可分成2个克隆群和7个单独型;所有分离株聚集归为2个大群,分别为2个分支和7个分支。可见,湘西黄牛粪源大肠埃希菌的耐药性整体偏低,多重耐药菌主要出现于大型规模养殖场,且具有一定的复杂性,应加强对大型规模黄牛养殖场粪源大肠埃希菌耐药性的监控。

语种： 中文

作者： 刘金梦;秦贝贝;黎航航;肖调义;苏建明

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2022年48(4):488-495 ISSN：1007-1032

作者机构： 湖南省特色水产资源利用工程技术研究中心,,湖南农业大学动物科学技术学院;[黎航航] 湖南农业大学动物科学技术学院;[苏建明] 湖南农业大学动物医学院;[刘金梦; 秦贝贝; 肖调义] 湖南省特色水产资源利用工程技术研究中心<&wdkj&>湖南农业大学动物科学技术学院

关键词： 草鱼;小肽转运载体;克隆;生物信息学分析;共线性分析;组织表达

摘要： 采用RT–PCR和cDNA末端快速扩增技术克隆草鱼(Ctenopharyngodon idellus)II型小肽转运载体(PepT2)基因全长cDNA序列,对其进行生物信息学和共线性分析,并采用实时荧光定量PCR技术检测...展开更多 采用RT–PCR和cDNA末端快速扩增技术克隆草鱼(Ctenopharyngodon idellus)II型小肽转运载体(PepT2)基因全长cDNA序列,对其进行生物信息学和共线性分析,并采用实时荧光定量PCR技术检测分析健康草鱼PepT2基因在不同组织中的表达情况。结果表明:草鱼PepT2基因的cDNA序列全长为2733 bp,包括开放阅读框2169 bp(编码722个氨基酸残基),5′非编码区82 bp和3′非编码区482 bp;草鱼PepT2基因结构含有20个外显子和19个内含子;预测蛋白相对分子质量为8.032×104,等电点为6.01,该蛋白具有与哺乳动物同源蛋白类似的12个螺旋跨膜结构,并且在跨膜区9和10之间有1个大的外环,跨膜区氨基酸高度保守,含有6个蛋白激酶C磷酸化位点和3个N–糖基化位点;预测的PepT2蛋白三级结构包含有18个α–螺旋和21个β–折叠;氨基酸序列同源性分析结果显示,草鱼PepT2氨基酸序列与斑马鱼(Danio rerio)的同源性最高,为86.65%,与其他所比较的物种的同源性则为52.83%~68.15%;系统进化树分析表明,草鱼与斑马鱼的亲缘关系最近;与斑马鱼相比,草鱼PepT2所在的染色体保留着大多数基因,具有保守的基因块;实时荧光定量表达分析表明,草鱼PepT2在肠道中的表达量最高,在肾脏中的表达量次之。收起

语种： 中文

作者： 刘鑫;许文博;吴丽梅;李升;黄复深

期刊： 中国兽医科学,2022年52(12):1586-1591 ISSN：1673-4696

作者机构： [黄复深] 湖南农业大学动物医学院,湖南长沙 410128;[黄复深] 湖南农业大学湖南兽药工程技术研究中心,湖南长沙 410128;[刘鑫; 吴丽梅; 许文博; 李升] 湖南农业大学

关键词： 多杀性巴氏杆菌;DCS株;檀香醇;抑菌效果;抑菌机制

摘要： 为了探讨檀香醇对多杀性巴氏杆菌(Pm)的抑菌效果,以PmDCS分离株为研究对象,采用倍比稀释法测定了檀香醇对PmDCS株的最小抑菌浓度(MIC_(50)),利用小鼠检测檀香醇的体内抑菌效果。同时分别利用实时荧光定量PCR(qPCR)及聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测檀香醇对Pm DCS株细胞分裂相关基因和核糖体基因的表达及细菌蛋白表达的影响。结果显示,Pm DCS株对小鼠的LD_(50)为1×10~5 CFU/ mL,檀香醇对PmDCS株的MIC_(50)为128 μg/ mL。每只经256和512 μg檀香醇处理24 h的PmDCS株感染小鼠,肺部细菌计数明显低于生理盐水组小鼠。细菌经64、128、256 μg/ mL檀香醇处理24 h后,菌体蛋白的表达量降低。qPCR检测结果显示,Pm DCS株经檀香醇处理后,体内ftsZ、ftsW、zipA和slmA基因的表达量极显著降低(P<0.01),rpoE、rpmJ、rpsJ、rpsI和rpsA基因的表达量显著降低(P<0.05),rpsC和rpsO基因的表达量显著升高(P<0.05)。可见,檀香醇可通过降低细菌的细胞分裂相关基因的表达量而干扰细菌细胞的分裂,同时通过扰乱核糖体基因对细胞某些蛋白的表达,从而产生抑菌作用。

语种： 中文

作者： 罗灵芝;杨鹏江;丁彦彬;勾明郗;赵墩;...

期刊： 中国兽医科学,2022年52(03):278-284 ISSN：1673-4696

作者机构： [罗灵芝; 杨鹏江; 丁彦彬; 勾明郗; 赵墩; 余兴龙; 杨磊] 湖南农业大学动物医学院

关键词： 鹅出血性多瘤病毒;荧光定量PCR

摘要： 为了建立一种能快速、灵敏且准确检测鹅出血性多瘤病毒（goose hemorrhagic polyomavirus,GHPV）的诊断方法，将GHPV的VP1基因构建到载体pClone007 Blunt Simple Vector上，将获得的重组质粒作为标准阳性模板，以建立GHPV VP1基因的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法，并对该方法的特异性、敏感性、重复性和在临床检测中的应用进行验证。结果显示，所建立的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法的标准曲线呈良好的线性关系，其线性相关系数R2=0.975，其扩增效率E=86.731%，熔解曲线呈现单峰；检测鹅细小病毒、鹅圆环病毒、鹅副黏病毒、鸭坦布苏病毒、鹅星状病毒时呈阴性，具有较好的特异性；最低检出浓度为（1.16×101copies/μL），比普通PCR方法灵敏100倍；其中组内变异系数在0.10%～1.48%之间，组间变异系数在1.07%～2.24%之间，具有较好的重复性和稳定性；对20份临床组织样品检测结果进行分析发现，与普通PCR检测结果相比阳性率高出20%，其中阳性符合率为100%，总符合率为80%。上述结果表明，本研究建立的检测GHPV的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法，对GHPV的快速诊断和监测具有重要意义。

语种： 中文

作者： 穆德添;万凌云;韦树根;吴长桥;潘丽梅;...

期刊： 农业生物技术学报,2022年30(9):1737-1746 ISSN：1674-7968

作者机构： [吴长桥; 田艺; 唐其; 穆德添] 湖南农业大学园艺学院;[万凌云; 付金娥; 韦树根; 潘丽梅] 广西壮族自治区药用植物园;[柳亦松] 湖南农业大学动物医学院

关键词： 钩藤;改良CTAB法;单萜吲哚生物碱;异胡豆苷合酶

摘要： 钩藤（Uncaria rhynchophylla）为我国常用大宗中药材之一，主治头痛眩晕、阿尔茨海默和高血压等症，其有效成分主要为萜类吲哚生物碱（terpenoid indole alkaloids, TIAs）。异胡豆苷合酶（strictosidine synthase, STR）是TIAs生物合成途径中的关键酶，目前在钩藤中还未见报道。为了寻找参与钩藤TIAs生物合成的STR基因，本研究采用LC-MS法测定钩藤的根、叶片、茎钩、蒴果等不同部位中钩藤碱和异钩藤碱的含量，比较筛选4种总RNA提取方法。全长克隆了1条可能参与钩藤TIAs生物合成的候选基因UrSTR，并进行了生物信息学分析，利用qPCR分析了UrSTR在钩藤不同部位中的表达模式。结果表明：（1）通过LC-MS法测定，钩藤碱与异钩藤碱在钩藤蒴果中含量最高，根中含量最低。（2）改良CTAB法为钩藤不同部位总RNA的最佳提取方法。（3） UrSTR基因全长为1 122 bp，编码一条374个氨基酸的肽链，具有跨膜螺旋结构，理论分子量为41.446 kD，理论等电点为7.549，在进化分析中发现，其与阿拉比卡咖啡（Coffea arabica）和中果咖啡（C. canephora）的STR基因聚为一类，亲缘关系较近。（4） q PCR结果显示，UrSTR基因主要在钩藤蒴果中表达，根中的表达量最低。通过分析发现，UrSTR基因的表达量与钩藤碱/异钩藤碱含量的趋势一致，提示UrSTR基因可能是钩藤STR候选基因之一，参与了TIAs的生物合成。本研究为UrSTR基因的功能验证和钩藤生物碱合成途径的解析提供了参考。

语种： 中文

作者： 黄思娟;黄崇银;曹俊杰;王永;刘兆颖

期刊： 福建农林大学学报(自然科学版),2022年51(1):77-83 ISSN：1671-5470

作者机构： 湖南农业大学动物医学院,,湖南省兽药工程技术研究中心;[王永] 湖南农业大学动物医学院;[曹俊杰; 刘兆颖; 黄思娟; 黄崇银] 湖南农业大学动物医学院<&wdkj&>湖南省兽药工程技术研究中心

关键词： 高通量测序;钩吻;猪;肾脏

摘要： 为研究饲喂钩吻对仔猪肾脏的影响,将10头健康雄性去势二元杂种(长白猪×大白猪)断奶仔猪,随机分为对照组和给药组,每组5只.对照组仔猪饲喂不含抗菌药物的全价日粮,给药组仔猪饲喂不含抗菌药物的全价日粮+2%钩吻全草粉末,连续饲喂45 d后,分别采集两组猪的肾组织,对其进行高通量测序,并对差异表达基因进行基因本体论( GO)功能分类及京都基因和基因组百科全书( KEGG)数据库分析.结果显示,两组肾脏中共有301个差异表达基因.与对照组相比,给药组有180个基因显著下调, 121个基因显著上调,其中与代谢、转运相关的基因,如溶质载体家族2成员13( SLC2A13) 、溶质载体家族35成员5( SLC35A5) 、含黄素单氧化酶2( FMO2) 、醛氧化酶1( AOX1)等出现显著下调( P<0.05) .荧光定量PCR对差异表达基因进行验证,其结果与转录组学结果基本一致.表明饲喂钩吻对仔猪肾脏的物质转运和药物代谢有一定影响.

语种： 中文

作者： 王吉;刘翔燕;李晓文;李荣芳;文利新

期刊： 畜牧兽医学报,2022年53(12):4159-4171 ISSN：0366-6964

作者机构： [王吉; 文利新] 湖南农业大学动物医学院,畜禽保健湖南省工程研究中心,长沙410128;[王吉] 湖南农业大学动物科学技术学院,长沙410128;[王吉] 长沙绿叶生物科技有限公司,长沙410100;[文利新] 湖南省畜禽安全生产协同创新中心,长沙410128;[李荣芳; 李晓文; 刘翔燕] 湖南农业大学

关键词： 母羊生殖应激;生殖应激综合征;妊娠毒血症;母羊代谢紊乱;母羊

摘要： 母羊的生殖应激主要包括母羊主动应激、母羊被动应激以及胎羊宫内应激。适当的生殖应激是正常发情、维持妊娠、发动分娩、顺利哺乳的重要生理基础。但长期或过度的生殖应激，将引起母羊代谢紊乱、免疫功能损害、生殖障碍以及胎羊或羔羊发育受阻等，这一系列能造成母体健康损害的疾病和临床表现，被定义为“母羊生殖应激综合征”。本文对母羊生殖应激及母羊生殖应激综合征进行了定义，并对生殖应激理论的综合临床应用进行了探讨，为预防和治疗生殖疾病（如妊娠期毒血症、产后乏力、子宫内膜炎等）提供了理论依据。

语种： 中文

作者： 李玉娟;肖宁;贾文丹;李霞荣;郑晓峰;...

期刊： 畜牧兽医学报,2022年53(3):938-946 ISSN：0366-6964

作者机构： [李玉娟] 湖南农业大学动物医学院,湖南省兽药工程技术研究中心,长沙410128;[李玉娟] 湘南学院基础医学院,郴州423000;[贾文丹; 肖宁; 郑晓峰; 李霞荣; 孙志良] 湖南农业大学

关键词： 钩吻;氟马西尼;肾上腺素;毒性机制;GABAA受体

摘要： 旨在研究氟马西尼联合肾上腺素对钩吻中毒大鼠的解救效果,并验证钩吻可能的毒性作用靶点,为钩吻中毒机制探讨及解救钩吻中毒病例提供参考。构建钩吻大鼠中毒模型,将60只大鼠随机分为4组,分别为对照组、氟马西尼解救组、肾上腺素解救组、联合用药(氟马西尼+肾上腺素)解救组,记录各组大鼠中毒及死亡情况,并监测各组大鼠血压、心率,评价各组药物的解救效果。采用分子对接、全细胞膜片钳技术,预测钩吻主要毒性物质钩吻素己与解救药物作用的靶点,阐释其可能的解毒机制。结果显示:钩吻灌胃大鼠的半数致死量(LD_(50))为0.25g·kg~(-1),氟马西尼联合肾上腺素使用时对钩吻中毒的大鼠有显著的解救效果,存活率由25%提高到92% (P<0.01),且平均中毒症状出现时间由16.56min延长至25.98min(P<0.01),平均死亡时间由40.13min延长至58.05min(P<0.01),解救效果显著高于氟马西尼和肾上腺素单独解救组。联合用药组还可显著缓解中毒所致的大鼠血压、心率下降的临床表征。分子对接计算机模拟结果显示,氟马西尼与钩吻素己都与GABAA受体同一活性位点有较好的结合效果,且氟马西尼的结合能-85.47kJ·mol~(-1),强于钩吻素己结合能-77.15kJ·mol~(-1)。全细胞膜片钳结果显示,钩吻素己可显著延长GABAA受体离子通道的开放时间,而氟马西尼可拮抗此作用。综上所述,氟马西尼和肾上腺素联合使用对钩吻中毒大鼠具有明显的解救效果,钩吻神经毒性靶点与氟马西尼作用的GABAA受体密切相关,肾上腺素对调节中毒所致的血压下降起到关键作用,联合用药可起到标本兼治效果。

语种： 中文