作者： 高志鹏;李德亮;戴荣四;钟蕾;肖调义

期刊： 生物学杂志,2025年42(01):126-130 ISSN：2095-1736

作者机构： [高志鹏; 李德亮; 戴荣四; 钟蕾; 肖调义] 湖南农业大学水产学院

关键词： 卓越农林人才培养;水产;培养体系;协同育人

摘要： 阐述湖南农业大学水产学科在水产类卓越农林人才培养过程中开展的改革和创新，主要包括建立“卓越人才”培养体系，创建“双创融合”的混合式课程教学模式，探索“卓越人才”协同育人机制，以上人才培养模式取得了良好的理论和实践成果，将改革过程中的经验和做法进行总结，以期为国内相关高校开展水产类卓越农林人才培养提供参考和依据。

语种： 中文

作者： 冯兴浪;丁戈野;张秋实;侯金亮;刘智明;...

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2024年50(4):82-88 ISSN：1007-1032

作者机构： [李军华#&#&#FENG Xinglang; 肖调义; 向建国; 侯金亮; 张秋实; 刘智明; 丁戈野; 冯兴浪] 湖南农业大学水产学院,湖南 长沙 410128;湖南文理学院生命与环境科学学院,湖南 常德 415000;[陈中元] 湖南文理学院

关键词： 大口黑鲈;烂身病;嗜水气单胞菌;毒力基因;药物敏感性;致病性

摘要： 从湖南省醴陵市某大口黑鲈工厂化养殖场中患烂身病的大口黑鲈体表溃疡处分离得到 1 株病原菌MS315509,经形态学和分子生物学鉴定,确定该病原菌为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila).人工感染结果显示,MS315509 对大口黑鲈鱼苗的半数致死剂量为 5.47×107 cfu/mL,为弱毒株;MS315509 携带细胞兴奋性肠毒素基因(alt)、细胞毒性肠毒素基因(act)和黏附素基因(aha1)3种毒力基因;采用 12种抗生素与12种中草药对菌株MS315509 进行药物敏感性试验,结果表明MS315509 对庆大霉素、头孢拉定、石榴皮、苏木、五倍子、诃子等高度敏感,对四环素、头孢唑啉、卡那霉素、苯唑西林、恩诺沙星、青霉素、强力霉素、链霉素、黄连、艾叶和熟地黄等表现出耐药性.

语种： 中文

作者： 李耀国;廖依静;王静安;肖调义

期刊： 水产学报,2024年48(1):26-39 ISSN：1000-0615

作者机构： [李耀国; 廖依静; 王静安; 肖调义] Hunan Engineering Technology Research Center of Featured Aquatic Resources Utilization, Hunan Agricultural University, Changsha, 410128, China

关键词： 赤眼鳟;生理学实验室蛋白2(LGP2);序列结构;表达特征;蛋白互作;GCRV抗性

摘要： 为探究赤眼鳟遗传学和生理学实验室蛋白 2(laboratory of genetics and physiology 2,LGP2)的功能特征及抗草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)育种参考潜力,实验克隆获得了 2 940 bp的赤眼鳟lgp2(Sclgp2)全长cDNA和 721 bp的 5′端上游序列.Sclgp2 cDNA编码 680 个氨基酸,包含DEXDc(DExD/H-box helicase domain)、HELICc(helicase superfamily C-terminal domain)和CTD(C-terminal regulatory domain)结构域;其 5′端上游序列含有MafB(muscle aponeurosis fibromatosis B)和IRF3(interferon regulatory factor 3)等转录因子结合位点.不同物种LGP2 的功能结构域、磷酸化修饰位点数具有相似性,同时也存在结构域排布位置及序列的差异.赤眼鳟和草鱼lgp2 cDNA序列比较初步发现 2 个位于RNA结合功能区的GCRV抗性关联位点.系统进化分析显示,赤眼鳟LGP2 先与草鱼、鲫和青鱼聚在一起,再与鲤科鱼类等聚为一大支.荧光定量表达分析显示,赤眼鳟脾脏中sclgp2 表达水平显著高于其他组织,肌肉、心脏中表达量次之,而肠中表达量最低.GCRV感染后,肝脏中ifn1 表达水平在 24～72 h显著下降,其他组织sclgp2 和ifn1 表达水平未有显著变化.相关性分析结果显示,赤眼鳟肌肉sclgp2 与ifn1 表达水平呈极显著正相关(0.999).酵母双杂交互作检测发现,赤眼鳟LGP2 与MDA5 存在弱相互作用,而其DEXDc(1～201 aa)、HELICc(390～476 aa)以及CTD(553～668 aa)结构域与MDA5 无互作.该研究成功获得了sclgp2 全长cDNA及 5′端上游序列,明确了其序列结构、免疫表达及与 MDA5 的互作特征,为赤眼鳟 LGP2 免疫功能属性研究奠定了基础,并为草鱼抗GCRV育种提供了参考.

语种： 中文

作者： 张姚铮泰;谢凯;石勇;李新平;肖调义;...

期刊： 水生生物学报,2024年48(6):968-978 ISSN：1000-3207

作者机构： 湖南农业大学水产学院,长沙 410128;[李新平] 西双版纳土著鱼类研究繁育中心,西双版纳 666109;[张姚铮泰; 石勇; 戴济鸿; 肖调义; 谢凯; 胡毅] 湖南农业大学

关键词： 蛋白质;脂肪;生长性能;血清生化指标;抗氧化能力;丝尾鳠

摘要： 设计蛋白质水平(34%、38%、42%)和脂肪水平(5%、8%、11%)的3×3交互实验,共配制9种实验饲料,投喂初始体重为(29.96±0.08) g的丝尾鳠(Hemibagrus wyckioid...展开更多 设计蛋白质水平(34%、38%、42%)和脂肪水平(5%、8%、11%)的3×3交互实验,共配制9种实验饲料,投喂初始体重为(29.96±0.08) g的丝尾鳠(Hemibagrus wyckioides)幼鱼8周,探究饲料中蛋白质和脂肪水平对丝尾鳠生长、血清生化指标及肝脏抗氧化能力的影响。实验结果表明:丝尾鳠平均增重率和蛋白质效率随饲料蛋白和脂肪水平的升高而升高。P42L11组增重率最高、饲料系数最低,但与P38L8、P38L11、P42L8组间并无显著性差异(P>0.05);P38L11组蛋白质效率最高,但与P34L11、P38L8、P42L8、P42L11组间并无显著性差异(P>0.05)。11%脂肪组丝尾鳠平均脏体比、体脂肪含量及血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇含量最高,显著高于5%脂肪组(P<0.05)。油红染色结果表明,11%脂肪组出现肝脏脂肪蓄积,且血清平均谷丙转氨酶活性和谷草转氨酶活性显著高于5%和8%脂肪组(P<0.05)。肠道平均消化酶活力、肝脏抗氧化酶活力及丙二醛含量随着饲料蛋白和脂肪水平的升高而升高。综上所述,适度提高饲料蛋白和脂肪水平能够增加丝尾鳠增重率,降低饲料系数。42%蛋白水平下虽然能够获得更高的增重率,但会导致蛋白质效率降低,高脂肪水平则会引起肝脏脂肪异常沉积和肝损伤。因此,在此实验条件下,丝尾鳠饲料的最佳蛋白水平在38%左右,不宜超过42%;最佳脂肪水平在8%左右,不宜超过11%。收起

语种： 中文

作者： 段伟;唐浩;孙明雪;廖伊健;肖调义;...

期刊： 渔业研究,2024年46(06):563-571 ISSN：2096-9848

作者机构： [唐浩; 段伟; 肖调义; 廖伊健; 孙明雪; 李耀国] 湖南农业大学水产学院,湖南 长沙 410128

关键词： 草鱼;腺苷酸环化酶3(AC3);草鱼呼肠孤病毒(GCRV);细胞连接;细胞层通透性

摘要： 【背景】草鱼呼肠孤病毒（GCRV）感染可通过增大血管内皮通透性而引发渗漏出血。【目的】为探明腺苷酸环化酶3(AC3)介导GCRV感染的功能机制，在草鱼肾脏细胞系（CIK）中开展了系列研究。【方法】在CIK细胞内成功实现了AC3过表达，使用荧光定量PCR(qPCR)检测GCRV感染不同时间点（0 h、12 h、24 h）ac3、claudin c、claudin 15、claudin 18、irf3、irf7、ifn1和ifn2的相对表达量；通过蛋白免疫印迹（WB）检测GCRV VP7的蛋白量；采用细胞电阻仪检测CIK细胞层不同条件下的跨内皮电阻（TEER）值，以及利用透射电镜检测CIK细胞间的连接状态。【结果】研究结果显示，AC3过表达显著增强了CIK细胞紧密连接分子claudin 15和claudin 18的表达量，但对干扰信号素通路基因irf3、irf7、ifn1和ifn2的表达水平未产生显著影响，而抑制了GCRV VP7的蛋白量。跨内皮电阻检测发现，AC3过表达显著增加了CIK细胞层的电阻值。透射电镜检测结果显示，AC3过表达降低了GCRV感染对CIK细胞间连接的损伤程度。【结论】AC3可以影响claudin分子的相对表达量及细胞屏障功能，抑制GCRV在细胞中的增殖。【意义】本研究从细胞通透性角度开拓了GCRV抗性关联分子发掘的新路径。

语种： 中文

作者： 于海罗;肖调义;骆艺文;王红权;任为;...

期刊： 水产学报,2024年48(3):143-153 ISSN：1000-0615

作者机构： [肖调义; 王红权; 章燕铃] Hunan Engineering Technology Research Center of Featured Aquatic Resources Utilization, Hunan Agricultural University, Changsha, 410128, China;[骆艺文; 任为; 叶利海] Wuhan CP Aquatic Co., Ltd, Wuhan, 430070, China;[于海罗] Hunan Engineering Technology Research Center of Featured Aquatic Resources Utilization, Hunan Agricultural University, Changsha, 410128, China<&wdkj&>Wuhan CP Aquatic Co., Ltd, Wuhan, 430070, China

关键词： 斑点叉尾鮰;胍基乙酸(GAA);生长;肝脏抗氧化性能;肌肉能量代谢

摘要： 为研究饲料中添加胍基乙酸（GAA）对斑点叉尾鮰生长、肝脏抗氧化以及肌肉能量代谢的影响。本实验共设计4个实验组，分别投喂含0（对照组）、300、600和900 mg/kg GAA（GAA0、GAA300、GAA600和GAA900）的等能等氮饲料。实验鱼初始体质量为（36.67±0.00）g，实验周期8周。结果显示，各添加GAA组末均重（FBW）和增重率（WGR）较对照组均有提高趋势，但差异不显著；添加GAA显著影响脏体比（VSI）和腹脂率（IPF），在GAA300组VSI和IPF最低；以IPF和VSI为评价指标，通过二次函数分析获得GAA最适量分别为275和150 mg/kg。添加GAA对全鱼水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分均无显著影响，对肌肉中游离氨基酸和脂肪酸均无显著影响，但能显著提高肌肉中羟脯氨酸（HYP）含量，改善肌肉品质。添加GAA可提高肝脏抗氧化能力，其中GAA300组的总抗氧化能力（T-AOC）和超氧化物歧化酶（SOD）活性显著高于对照组。添加GAA可改善肌肉能量代谢，其中GAA300组的琥珀酸脱氢酶（SDH）和丙酮酸激酶（PK）活性显著高于对照组。研究表明，饲料中添加GAA对斑点叉尾鮰生长及饲料利用无显著促进作用，但添加150～300 mg/kg GAA能降低斑点叉尾鮰腹部脂肪含量和脏体比，并能提高肝脏抗氧化能力和肌肉能量代谢。

语种： 中文

作者： 阳鸿;邓亚东;丁春华;许宝红;吕钊;...

期刊： 水生生物学报,2024年48(02):304-314 ISSN：1000-3207

作者机构： 湖南农业大学水产学院,长沙 410128;[邓亚东; 阳鸿; 肖调义; 吕钊; 许宝红; 丁春华] 湖南农业大学

关键词： 蛋白质组;血清;抗性分子;体液免疫;草鱼

摘要： 为挖掘草鱼关键抗性分子,研究利用4D label-free定量蛋白质组学技术系统分析了团队前期获得的GCRV感染存活草鱼（候选抗性草鱼）与对照草鱼的血清蛋白表达差异。共鉴定到858个草鱼血清蛋白, 329个蛋白在两类草鱼中差异表达,其中163个蛋白在候选抗性草鱼血清中显著高表达, 166个蛋白显著低表达。差异表达蛋白的功能主要注释为体液免疫反应调节相关蛋白,显著富集到补体凝血级联、细胞黏附和铁死亡等信号通路。对差异表达的免疫相关蛋白进行分析发现,候选抗性草鱼血清中体液免疫分子MASP2、C4a、C4b、C7b、C8b、C8g、C9、CFI、C3a.1、C3a.2、C3a.3和C3a.6等补体和抗原提呈相关免疫分子MHC1UBA和IGL4V8等蛋白表达水平显著高于对照草鱼,而T细胞免疫相关分子TRAV、IGHV1-1、IGHV2-1、IGHV6-1、IGHV3-2和IGHV11-2等蛋白表达水平显著低于对照草鱼。免疫印迹检测进一步证实,以C3和IgM为代表的体液免疫分子在候选抗性草鱼血清中显著高表达,可能与草鱼抗病能力关联。研究将为高抗性草鱼的选育提供可参考的分子资源。

语种： 中文

作者： 倪萍;李密;肖调义

期刊： 科学养鱼,2024年(05):80-82 ISSN：1004-843X

作者机构： 湖南农业大学,湖南省特色水产资源利用工程技术研究中心,湖南长沙 410128;[李密] 湖南开天新农业科技有限公司,湖南长沙 410200;[肖调义; 倪萍] 湖南农业大学

摘要： ＜正＞我国是世界第一水产养殖国，水产养殖产量占世界总产量的60%（《2022中国渔业统计年鉴》，2023）。随着全球水产养殖业的高速发展，水产品作为人们日常饮食中重要的动物蛋白质来源，市场需求量大且稳定。随着人们生活质量的提高，国民的消费观已从“吃得饱”向“吃得好”转变，消费者对优质水产品的需求量逐年上升（Naylor等，2021）。为了提高养殖鱼产量，养殖户普遍采用投入大量配合饲料的高密度喂养模式。然而，配合饲料转换效率较低，60%～70%的饲料经消化吸收后变成粪便排入水中，

语种： 中文

作者： 于海罗;肖调义;骆艺文;王红权;任为;...

期刊： 水产学报,2024年48(03):145-155 ISSN：1000-0615

作者机构： 湖南农业大学,湖南省特色水产资源利用工程技术研究中心;武汉正大水产有限公司

摘要： 为研究饲料中添加胍基乙酸（GAA）对斑点叉尾鮰生长、肝脏抗氧化以及肌肉能量代谢的影响。本实验共设计4个实验组，分别投喂含0（对照组）、300、600和900 mg/kg GAA（GAA0、GAA300、GAA600和GAA900）的等能等氮饲料，实验周期8周。结果显示，各添加GAA组末均重（FBW）和增重率（WGR）较对照组均有提高趋势，但差异不显著；添加GAA显著影响脏体比（VSI）和腹脂率（IPF），在GAA300组VSI和IPF最低；以IPF和VSI为评价指标，通过二次函数分析获得GAA最适量分别为275和150mg/kg。添加GAA对全鱼水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分均无显著影响，对肌肉中游离氨基酸和脂肪酸均无显著影响，但能显著提高肌肉中羟脯氨酸（HYP）含量，改善肌肉品质。添加GAA可提高肝脏抗氧化能力，其中GAA300组的总抗氧化能力（T-AOC）和超氧化物歧化酶（SOD）活性显著高于对照组。添加GAA可改善肌肉能量代谢，其中GAA300组的琥珀酸脱氢酶（SDH）和丙酮酸激酶（PK）活性显著高于对照组。研究表明，饲料中添加GAA对斑点叉尾鮰生长及饲料利用无显著促进作用，但添加150～300 mg/kg GAA能降低斑点叉尾鮰腹部脂肪含量和脏体比，并能提高肝脏抗氧化能力和肌肉能量代谢。

语种： 中文

作者： 高志鹏;戴荣四;肖调义;李德亮;钟蕾;...

期刊： 微生物学通报,2024年51(04):1329-1339 ISSN：0253-2654

作者机构： 湖南农业大学水产学院

摘要： “水产微生物学”课程是水产学与微生物学经过长期结合逐渐发展起来的一门分支学科，与水产养殖生产实践结合紧密。结合当前的学情与教学困难，我们开展了基于“翻转课堂”的“双创融合”混合式教学模式改革，本模式充分体现了“两性一度”要求，教学内容与设计突出“高阶性”，“科学前沿”主题小组汇报强调“创新性”，“自主探究”主题小组试验注重“挑战度”。通过改革和实践学生课堂积极性、主动性和参与度显著提升，培养了学生的创新思维能力和自主创新意识，激发了学生开展科学研究的灵感和动力。本文将改革过程中的经验和做法进行总结，以期为相关课程的改革和实践提供参考和依据。

语种： 中文

作者： 董小虎;欧东升;王红权;曾鸣;肖调义;...

期刊： 当代水产,2023年48(07):72,74 ISSN：1674-9049

作者机构： 湖南农业大学湖南省特色水产资源利用工程技术研究中心 湖南长沙410128;湖南省水产科学研究所 湖南长沙410153;[曾鸣; 欧东升] 湖南省水产科学研究所;[董小虎; 肖调义; 李耀国; 王红权] 湖南农业大学

摘要： ＜正＞黄鳝（Monopterus albus）俗称鳝鱼、田鳗、长鱼等，是一种生活在江河、湖泊、沟渠及稻田中的名特水产动物。其肉质鲜美、富含蛋白质、脂肪、钙、磷、铁等微量元素以及多种维生素，具有补气血、除风湿等药用价值而受到广泛青睐。但黄鳝养殖过程中由于多种问题导致产量受限、价格较高。该文对黄鳝的基本生物学特性、生产中面临的主要问题、研究进展及思路策略进行综述，以期为黄鳝产业发展提供科学参考。

语种： 中文

作者： 陈昌军;江石峰;彭晓煌;肖调义;许宝红

期刊： 当代水产,2023年48(08):71-73 ISSN：1674-9049

作者机构： [陈昌军; 江石峰; 彭晓煌; 肖调义; 许宝红] 湖南农业大学湖南省特色水产资源利用工程技术研究中心

关键词： 人工增养殖;脊索动物门;过度捕捞;水电工程建设;人工养殖;外来物种入侵;浅水区域;环境污染

摘要： 鳅科隶属于脊索动物门、辐鳍鱼纲、鲤形目,其大多为淡水底栖的小型经济鱼类,多生活在河流、山区溪流、湖泊、水田、沟渠等浅水区域。鳅科鱼类因其肉质细嫩、味道鲜美、营养丰富而受到消费者的青睐。在我国鳅科鱼类分为条鳅亚科、沙鳅亚科...展开更多 鳅科隶属于脊索动物门、辐鳍鱼纲、鲤形目,其大多为淡水底栖的小型经济鱼类,多生活在河流、山区溪流、湖泊、水田、沟渠等浅水区域。鳅科鱼类因其肉质细嫩、味道鲜美、营养丰富而受到消费者的青睐。在我国鳅科鱼类分为条鳅亚科、沙鳅亚科、花鳅亚科三个亚科,有18个属约100多种。但是近年来由于环境污染、水电工程建设、过度捕捞、外来物种入侵等原因,造成其野生资源量大量减少,这就使得经济型鳅科鱼类的人工增养殖需求格外重要和迫切。收起

语种： 中文

作者： 陈昌军;江石峰;彭晓煌;肖调义;许宝红

期刊： 当代水产,2023年48(09):79-80 ISSN：1674-9049

作者机构： [陈昌军; 江石峰; 彭晓煌; 肖调义; 许宝红] 湖南农业大学湖南省特色水产资源利用工程技术研究中心

摘要： <正>牛蛙属于脊椎动物门、两栖纲、无尾目、蛙科、蛙属。因其雄性鸣叫声如牛而得名牛蛙。牛蛙成体体长一般7～17cm，最大体长可达20cm以上，最大个体体重可达2kg。牛蛙肉质高蛋白、低脂肪、低胆固醇；牛蛙还有极高的药用价值，性平、味甘，具有滋补解毒的功效，防生疮毒、可促进伤口愈合、增进食欲等功能。但在牛蛙的养殖过程中违规用药、不遵守休药期规定、养殖尾水不达标排放的现象常有出现，导致牛蛙产品质量降低。过去传统的牛蛙养殖大部分养殖户随意利用自家田地建设养殖场，

语种： 中文

作者： 苏杭;肖调义;许宝红;刘巧林;吕丽刚;...

期刊： 水产学报,2022年46(5):785-796 ISSN：1000-0615

作者机构： [苏杭; 肖调义; 许宝红; 刘巧林; Lü L.; 刘益] Hunan Engineering Technology Research Center of Featured Aquatic Resources Utilization, Hunan Agricultural University, Changsha, 410128, China

关键词： 草鱼;多克隆抗体;草鱼呼肠孤病毒(GCRV);表达特性

摘要： 为研究草鱼补体蛋白5a （complement component 5a，C5a）、补体蛋白5a受体（C5a receptor，C5aR）he 凝血因子II（blood coagulation factor II，FII）在感染草鱼呼肠孤病毒（grass carp reovirus，GCRV）时的蛋白表达和相互作用，针对草鱼C5a和FII蛋白构建了原核表达体系、针对草鱼C5aR蛋白构建C5aR-KLH偶联物，纯化蛋白，免疫日本大耳兔制备3种蛋白的多克隆抗体。用蛋白质印迹（Western blot）、免疫共沉淀（Co-IP）和拉下（pull down）实验检测三种蛋白表达与互作关系，Western blot结果显示，C5a和C5aR在健康草鱼的肝脏、脾脏、肾脏、头肾、肠、鳃和肌肉中均有蛋白表达，FII在肝脏、脾脏和肠中表达，而在肾脏、头肾、鳃和肌肉中不表达；在感染GCRV的草鱼肝脏组织中C5a、C5aR和FII蛋白均随病程进展呈现上升趋势。Co-IP结果显示，在GCRV处理后，C5a、C5aR和FII蛋白具有相互作用关系。pull down结果显示，C5a pull down共鉴定得到C3、RIG-I等28种候选蛋白，C5aR pull down共鉴定得到转醛醇酶、巨球蛋白等24种候选蛋白。该研究为深入探讨C5a、C5aR和FII互作调控关系以及进一步探索补体和凝血级联系统中3个关联蛋白响应GCRV感染的作用机制提供了基础。

语种： 中文

作者： 刘金梦;秦贝贝;黎航航;肖调义;苏建明

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2022年48(4):488-495 ISSN：1007-1032

作者机构： 湖南省特色水产资源利用工程技术研究中心,,湖南农业大学动物科学技术学院;[黎航航] 湖南农业大学动物科学技术学院;[苏建明] 湖南农业大学动物医学院;[刘金梦; 秦贝贝; 肖调义] 湖南省特色水产资源利用工程技术研究中心<&wdkj&>湖南农业大学动物科学技术学院

关键词： 草鱼;小肽转运载体;克隆;生物信息学分析;共线性分析;组织表达

摘要： 采用RT–PCR和cDNA末端快速扩增技术克隆草鱼(Ctenopharyngodon idellus)II型小肽转运载体(PepT2)基因全长cDNA序列,对其进行生物信息学和共线性分析,并采用实时荧光定量PCR技术检测...展开更多 采用RT–PCR和cDNA末端快速扩增技术克隆草鱼(Ctenopharyngodon idellus)II型小肽转运载体(PepT2)基因全长cDNA序列,对其进行生物信息学和共线性分析,并采用实时荧光定量PCR技术检测分析健康草鱼PepT2基因在不同组织中的表达情况。结果表明:草鱼PepT2基因的cDNA序列全长为2733 bp,包括开放阅读框2169 bp(编码722个氨基酸残基),5′非编码区82 bp和3′非编码区482 bp;草鱼PepT2基因结构含有20个外显子和19个内含子;预测蛋白相对分子质量为8.032×104,等电点为6.01,该蛋白具有与哺乳动物同源蛋白类似的12个螺旋跨膜结构,并且在跨膜区9和10之间有1个大的外环,跨膜区氨基酸高度保守,含有6个蛋白激酶C磷酸化位点和3个N–糖基化位点;预测的PepT2蛋白三级结构包含有18个α–螺旋和21个β–折叠;氨基酸序列同源性分析结果显示,草鱼PepT2氨基酸序列与斑马鱼(Danio rerio)的同源性最高,为86.65%,与其他所比较的物种的同源性则为52.83%~68.15%;系统进化树分析表明,草鱼与斑马鱼的亲缘关系最近;与斑马鱼相比,草鱼PepT2所在的染色体保留着大多数基因,具有保守的基因块;实时荧光定量表达分析表明,草鱼PepT2在肠道中的表达量最高,在肾脏中的表达量次之。收起

语种： 中文

作者： 刘益;丁春华;吕钊;余建波;王红权;...

期刊： 水产学报,2022年46(12):2396-2408 ISSN：1000-0615

作者机构： [Yi L.; Chunhua D.; Zhao L.; Jianbo Y.; Hongquan W.; Xuewen Z.; Ligang L.; Kejun L.; Dongfang L.; Tiaoyi X.; Qiaolin L.] Hunan Engineering Technology Research Center of Featured Aquatic Resources Utilization, Hunan Agricultural University, Changsha, 410128, China;[Cunbin S.; Yan R.; Qing W.] Key Lab of Aquatic Animal Immune Technology of Guangdong Province, Key Lab of Fishery Drug Development, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Pearl River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Guangzhou, 510380, China

关键词： 草鱼;草鱼呼肠孤病毒;母源免疫因子;早期发育;时效性;保护效果

摘要： 为探究草鱼母源免疫因子传递特性，实验借助酶联免疫吸附实验（ELISA）和实时荧光定量PCR（qPCR）技术分别检测分析了草鱼呼肠孤病毒（grass carp reovirus， GCRV）弱毒疫苗免疫草鱼母本及其子代（即母源免疫子代）早期胚胎阶段至1龄期间5种免疫因子（IgM、C3、LZM、MBL和Bf）蛋白活性和基因表达水平的周年变化规律。结果显示，草鱼母本经GCRV弱毒疫苗免疫后，血液中5种免疫因子蛋白活性及基因表达水平在产卵期均显著高于对照组1.5倍以上，至免疫后第11个月与对照组无显著差异。母源免疫子代发育至水花（4 d）时，IgM、C3、MBL和Bf的基因表达水平均高于对照组；发育至乌仔（15 d）时，IgM、C3和Bf的蛋白活性水平均略高于对照组；发育至5～11月龄时，5种免疫因子在肝脏、脾脏、肾脏和头肾等免疫器官中仍存在高表达。研究表明，GCRV弱毒疫苗促使母源免疫因子在亲本和子代体内富集表达具有一定的时效性，最长可维持至11个月，为实际生产中草鱼母本疫苗免疫程序的制定提供参考依据。

语种： 中文

作者： 欧琳;张余;陈晓芳;周刚;黄宇宏;...

期刊： 水产科技情报,2022年49(3):137-142 ISSN：1001-1994

作者机构： 湖南农业大学 湖南省特色水产资源利用工程技术研究中心,湖南长沙 410128;[陈晓芳; 刘巧林; 张余; 黄宇宏; 周刚; 肖调义; 欧琳; 陈蕾] 湖南农业大学

关键词： 克氏原螯虾;洞庭湖区;遗传多样性

摘要： 为了解洞庭湖区养殖克氏原螯虾的遗传多样性，从线粒体Cytb和COⅠ基因入手，经基因组DNA提取、PCR扩增、序列测定和拼接，比较分析了岳阳华容县和益阳南县2处主养殖区内共11个采集点的克氏原螯虾遗传结构。试验结果显示，在华容县的6个采集点中，基于Cytb基因的克氏原螯虾的单倍型多样性指数为0.506,核苷酸多样性指数为0.272 65;基于COⅠ基因的克氏原螯虾的单倍型多样性指数为0.258,核苷酸多样性指数为0.136 1。在南县的5个采集点中，基于Cytb基因的克氏原螯虾的单倍型多样性指数为0.467,核苷酸多样性指数为0.259 74;基于COⅠ基因的克氏原螯虾的单倍型多样性指数为0.244,核苷酸多样性指数为0.122 3。单倍型系统进化树和遗传距离分析表明，11个采集点的克氏原螯虾呈现交叉分布，遗传分化不显著。结果表明，洞庭湖区养殖克氏原螯虾近亲交配严重，遗传多样性低。

语种： 中文

作者： 肖调义;龙哲;李彬;张秋实;秦玲;...

期刊： 水生生物学报,2022年46(2):238-247 ISSN：1000-3207

通讯作者： Xiong, S.-T.

作者机构： [龙哲; 秦玲; 张秋实; 李彬; 肖调义; 熊舒婷] College of Animal Science and Technology, Hunan Agricultural University, Changsha, 410128, China

通讯机构： [Xiong, S.-T.] C;College of Animal Science and Technology, China

关键词： 草鱼;高通量测序;差异表达;组织表达

摘要： 为探索基于高通量筛选抗性主效miRNA功能分子的方法应用于抗性草鱼（Ctenopharyngodon idellus）的选育,研究借助高通量测序鉴定分析感染GCRV前后的草鱼头肾组织中miRNAs。测序结果共鉴定出821个成熟miRNAs,其中118个在GCRV攻毒组特异表达, 82个为未攻毒组特有;差异分析结果显示, GCRV处理后有88个miRNA显著下调表达、46个miRNA显著上调表达; qPCR结果显示miR-21在GCRV感染组中的头肾中表达量最高, miR-194a在两个比较组中的差异倍数最大,达到48倍之高;组织表达结果发现部分差异表达miRNA在脾脏、肾脏、头肾、皮肤和鳃等免疫相关器官中高表达;这些结果提示不同的miRNAs在草鱼的GCRV应答过程中发挥着不同的功能,为抗病草鱼的选育提供可参考的分子资源。

语种： 中文

作者： 刘琴;贾钊;陈康勇;朱晓真;王梓璇;...

期刊： 水生生物学报,2022年46(12):1867-1875 ISSN：1000-3207

通讯作者： Zou, J.

作者机构： [王梓璇; 刘琴; 陈静; 邹钧; 贾钊; 陈康勇; 王俊亚; 朱晓真] College of Fisheries and Life Science, Shanghai Ocean University, Shanghai, 201306, China;[李耀国; 肖调义] Hunan Engineering Technology Research Center of Featured Aquatic Resources Utilization, Hunan Agricultural University, Changsha, 410128, China

通讯机构： [Zou, J.] C;College of Fisheries and Life Science, China

关键词： 细胞因子;白介素10;单克隆抗体;免疫分析;草鱼

摘要： 白细胞介素10（Interleukin-10，IL-10）主要由2型先天淋巴细胞（Type 2 innate lymphoid cell，ILC2）和辅助性2型T细胞（T helper 2 cell，Th2）分泌，具有调控B细胞、单核/巨噬细胞、树突状细胞等免疫细胞生长、增殖与分化的功能，并发挥机体免疫应答调节以及协同其它细胞因子维持免疫系统稳态的作用。本研究利用大肠杆菌（Escherichia coli，E. coli）表达系统制备了高纯度的草鱼（Ctenopharyngodon idella，Ci）IL-10重组蛋白，免疫小鼠制备单克隆抗体后通过免疫印迹、激光共聚焦和流式细胞术对抗体进行分析，研究结果表明获得的单克隆抗体不仅能特异识别大肠杆菌表达的CiIL-10重组蛋白，而且能识别HEK293细胞表达的真核蛋白。脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）和草鱼白细胞介素1β（IL-1β）刺激草鱼性腺细胞系（GCO）36小时的免疫荧光染色分析表明该单克隆抗体能与草鱼内源IL-10结合，但IL-10阳性细胞数量较对照组无明显增多。本研究成功制备了高纯度CiIL-10重组蛋白，获得了特异性好的高质量单克隆抗体，为草鱼ILC2和Th2细胞的增殖、分化和功能研究奠定了基础。

语种： 中文

作者： 季宁;魏伟;郭家鸿;王俊亚;李耀国;...

期刊： 水生生物学报,2022年46(9):1293-1300 ISSN：1000-3207

通讯作者： Ji, N.;Zou, J.

作者机构： [邹钧] 上海海洋大学水产与生命学院,上海201306;[邹钧] 湖南农业大学,湖南省特色水产资源利用工程技术研究中心,长沙410128;[魏伟; 王俊亚; 郭家鸿; 季宁] 上海海洋大学;[肖调义; 李耀国] 湖南农业大学

通讯机构： [Ji, N.; Zou, J.] C;College of Fisheries and Life Science, China

关键词： 原核表达;单克隆抗体;免疫荧光;草鱼

摘要： 草鱼呼肠孤病毒（Grass carp reovirus, GCRV）是导致该病的主要病原,研究将Ⅰ型草鱼呼肠孤病毒GCRV-873株的外衣壳蛋白VP7基因进行原核表达,获得高度纯化VP7重组蛋白,通过免疫BALB/c小鼠,首次制备筛选得到高效价单克隆抗体。结果显示, GCRV-I vp7基因可在原核表达系统中高效表达,主要以包涵体形式存在,大小约为40 kD。免疫小鼠后筛选到了5株IgG类型阳性杂交瘤细胞株,其中3株亚型为IgG1, 2株亚型为IgG2a。Western Blotting实验和直接免疫荧光实验显示,该抗体可特异识别GCRV-873,并且ELISA检测原核重组蛋白的效价高达204800,亲和常数为4.04×10~9。研究制备的VP7蛋白单克隆抗体,为GCRV-I病毒诊断技术开发及病毒感染机制的深入研究提供实验基础。

语种： 中文